鹅源鼠伤寒沙门菌crp、hfq基因缺失株的构建及生物学特性分析     

李仕楷  刘佳琪  李荣旭  苏文楠  陈亦杏  郑炜鸿  朱婉君  陈济铛  张济培 《中国预防兽医学报》2023,(1):17-24

为构建鹅鼠伤寒沙门菌单基因缺失株并鉴定其生物学特性，本研究以广东地区鹅源鼠伤寒沙门菌流行株A29为研究对象，采用λ-Red同源重组技术，分别构建crp、hfq基因缺失株(A29Δcrp和A29Δhfq)及相应基因回补株，并分别采用相应引物经PCR鉴定。通过细菌培养，对各菌株生物学特性进行比较；通过PCR鉴定各菌株的遗传稳定性；采用K-B纸片扩散法检测各菌株的药物敏感性；将各菌株纯培养物经腹腔注射4周龄小鼠，测定各菌株对小鼠的毒力，并观察感染后小鼠的临床症状及各组织剖检病变与组织病理变化。PCR和测序结果表明，正确构建各基因缺失株和相应回补株。生物学特性试验结果显示，与亲本株相比，A29Δcrp菌落直径极显著变小(P<0.001)，不产酸、不产生H₂S，菌体极显著变短(P<0.001);A29Δhfq菌落边缘不整齐，不产生H₂S，菌体极显著变长(P<0.001)，表明crp、hfq基因影响细菌的菌落形态、生化特性和形态特征。菌株遗传稳定试验结果显示，菌株传至60代时，基因缺失株仍能够稳定缺失。药敏试验结果显示，与亲本株比较，A...  相似文献