应用MTT比色法评价不同牛血清促细胞生长作用   总被引：1，自引：0，他引：1  

张宝红  钟恒禄  卢惠芳  张为宇  林莹  韩忠燕  黄海愉 《中国畜牧兽医》2009,36(5):84-86

细胞培养过程中血清的选择对细胞的促生长增殖具有重要作用。本试验分别以商品新生牛血清、自制新生牛血清、自制成年牛血清培养成纤维细胞、骨髓瘤细胞、杂交瘤细胞，通过MTT比色法来判断细胞的增殖能力，进而对血清质量作出评价。结果表明，自制新生牛血清具有良好的促细胞生长作用(相对生长率＞0.96)，并且3次试验结果比较差异不显著(P＞0.05)，具有较好的重复性；而成年牛血清和无血清空白对照组促细胞作用不明显。因此应用MTT比色法能够评价血清质量。  相似文献   

青年期广西本地水牛下丘脑催产素的免疫组化定位     

宋小白  韩涛  凌泽继  杨柄壮  许典新  秦津  韩忠燕  潘琼  李瑞明  谢莹雪 《黑龙江畜牧兽医》2009,(4)

为研究青年期广西本地水牛催产素能神经元的表达特点,试验采用免疫组织化学技术中的PicTureTM二步法对广西本地水牛催产素神经元的定位及分布进行了研究.结果表明:下丘脑分泌催产素的神经元主要分布在室旁核、视上核和弓状核,在视前内侧核、视交叉上核、下丘脑前核、下丘脑后核、背内侧核、腹内侧核和乳头体核等核团也有一定数量的阳性神经元;阳性神经纤维仅见于室旁核、弓状核、乳头体核,在正中隆起第三脑室室管膜附近有较多数量的阳性神经纤维.观察结果提示:下丘脑催产素经神经垂体、第三脑室、血管3条途径释放;不同种属动物下丘脑催产素存在差异.  相似文献   

不同重悬细胞法在洗涤过程中对水牛外周血单个核细胞活率的影响     

韩忠燕  张宝红  黄海愉  张为宇  黄维义  钟恒禄 《中国畜牧兽医》2009,36(4):100-102

为了探讨在离心洗涤水牛外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell, PBMC）过程中以移液器吹打法和晃动离心管法重悬细胞对其活率的影响。对经密度梯度离心后初步收集到的PBMC,分别用移液器吹打和晃动离心管2种方法重悬细胞,离心洗涤后对细胞活率进行计数。结果发现,移液器吹打法得到的细胞活率为（74.9±2.6）%,而晃动离心管法使细胞活率达到（98.5±0.5）%,差异极显著（P<0.01）。说明在洗涤PBMC时,晃动离心管法重悬细胞能大大提高细胞活率,可为那些对细胞活率要求高的试验提供一个较为有效的方法。  相似文献   

两种免疫组化方法对催产素在下丘脑分布的测定影响     

宋小白  韩涛  曾令坤  韩忠燕  凌泽继  李瑞明  秦津 《江西农业大学学报》2008,30(6)

为探讨免疫组织化学染色中常用的PicTure^TM二步法与链霉素抗生物素-过氧化物酶（streptaridin—peroxidase,sP）法在中枢神经下丘脑中催产索定位的优劣,选取摩拉杂交一代水牛（试验组）与广西本地水牛（沼泽型）（对照组）的下丘脑分别进行染色,结果显示：PicTure^TM二步法试验组的平均直径（P：0．015）和阳性面积（P：0．02）均差异显著,光密度值未见显著差异。SP法光密度、平均直径和阳性面积均未见显著差异。SP法光密度值（O．9139&#177;0．03487）明显高于二步法光密度值（0．2139&#177;0．05642）,可能与DAB染色时间有关。就本试验而言,从背景非特异性染色、阳性面积和平均直径差异性等方面考虑,在神经内分泌神经元定位中,二步法优于SP法。  相似文献   

影响免疫组化染色的因素分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

韩涛  秦津  韩忠燕  曾令坤  李瑞明  宋小白 《中国畜牧兽医》2009,36(3):63-65

免疫组织化学染色是应用抗体结合组织中特异性抗原的特殊染色方法，广泛应用于肿瘤病理诊断和神经解剖学。但是，免疫组化试验操作步骤繁多，在实际操作过程中经常遇到一些问题，这就需要认真分析问题的原因，找到解决问题的方法。笔者就此问题展开论述。  相似文献   

图像分析对免疫组化染色结果的影响     

宋小白  韩涛  李瑞明  秦津  韩忠燕  谢莹雪  杨露 《江苏农业科学》2009,(2)

为了探讨图像分析系统中光密度和灰度值对免疫组化图像判别方面的异同,采用SuperPicTureTM通用试剂二步法对沼泽型水牛、摩拉杂交水牛、荷斯坦奶牛下丘脑视上核催产素进行了检测.结果显示,与沼泽型水牛相比,彩色图片转化为八位灰度图片后,摩拉杂交水牛由差异不显著(P=0.143)转变为差异显著(P=0.03),荷斯坦奶牛差异性增强,由P=0.04至灰度图片的P=0.01.前后测得阳性面积并无明显差异.结果表明,在转化灰度图片前后,光密度和灰度值对于同一种染色结果得出不同的差异性结论,对阳性面积无显著影响.  相似文献   

牛血清中蛋白组分初步分析及其对细胞培养的影响   总被引：2，自引：1，他引：1  

张宝红  张为宇  韩忠燕  黄维义  钟恒禄  李健 《动物医学进展》2009,30(1)

为探讨牛血清中蛋白组分对细胞培养的影响,应用凝胶过滤层析对不同牛血清进行初步组分分析,并应用MTT比色法衡量不同牛血清的促细胞生长作用.结果表明,蛋白组分大小相对较为一致的新生牛血清、商品血清1、2、5(一个波峰)与蛋白组分差异较大的成年牛血清、商品血清3、4(两个或者两个以上波峰)的促细胞生长作用相比较差异显著(P相似文献   

应用MTT比色法评价不同牛血清促细胞生长作用     

张宝红  钟恒禄  卢惠芳  张为宇  林莹  韩忠燕  黄海愉 《中国畜牧兽医》2009,36(4):119-121

细胞培养过程中血清的选择对细胞的促生长增殖具有重要作用。本试验分别以商品新生牛血清、自制新生牛血清、自制成年牛血清培养成纤维细胞、骨髓瘤细胞、杂交瘤细胞,通过MTT比色法来判断细胞的增殖能力,进而对血清质量作出评价。结果表明,自制新生牛血清具有良好的促细胞生长作用(相对生长率＞0.96),并且3次试验结果比较差异不显著(P＞0.05),具有较好的重复性;而成年牛血清和无血清空白对照组促细胞作用不明显。因此应用MTT比色法能够评价血清质量。  相似文献   

貉源李氏杆菌的分离与鉴定     

李瑞明  史玉静  韩涛  韩忠燕  宋小白 《广西农业科学》2009,40(8):1091-1094

采用常规细菌分离方法从病死貉的脑、肝脏、肾脏分离培养得到6株菌株,对分离菌株进行形态特征、培养特性观察及生化特性鉴定,结果确诊分离菌株为李氏杆菌。以该菌株接种家兔,接种后第7d开始出现死亡,并从家兔的肝脏、脾脏检测出与接种细菌一致的菌株,证实了李氏杆菌对家兔亦有一定的致病性。药敏试验结果表明,该分离菌对卡那霉素、头孢噻肟钠、万古霉素、庆大霉素、丁胺卡那霉素、氨苄青霉素、链霉素敏感;必要时应筛选出具有协同作用和累加作用的抗生素,以便临床上联合应用抗生素,提高治疗李氏杆菌病的疗效。  相似文献   

水牛肺泡巨噬细胞的分离、培养及鉴定     

韩忠燕  黄海愉  沈前程  张为宇  黄维义  钟恒禄 《广西农业科学》2010,41(7):719-722

为了深入研究水牛巨噬细胞（Macrophage,Mφ）的生物学特性,探索一种简便的水牛肺泡巨噬细胞（Alveolarmacrophage,AM）分离、培养方法,采用肺气管冷PBS灌洗法分离获得水牛肺泡细胞,并进行鉴定和功能检测。结果表明,采用肺气管冷PBS灌洗法可获得大量贴壁细胞,经光学显微镜和电子显微镜观察,其形态具备巨噬细胞的典型特征;酸性磷酸酶和非特异性酯酶阳性率分别为（89.4±3.5）%和（83.6±3.4）%;细胞表面抗原MHCⅡ阳性率为（96.6±1.3）%;鸡红细胞吞噬率为（23.6±4.2）%,墨汁吞噬率为（92.3±0.6）%。可见,肺气管冷PBS灌洗法是一种获取水牛肺泡巨噬细胞的可行方法。  相似文献