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为了提高小鹅瘟病毒PCR检测的检出率,试验根据现有的小鹅瘟病毒基因序列,设计合成了1对特异性引物,以实验室中保存的小鹅瘟病料DNA为模板,对反应程序中的延伸时间、退火温度等循环参数进行优化,并进行了敏感性和特异性检测。结果表明:优化后的延伸时间为45 s,退火温度为48.0℃;优化后的方法对小鹅瘟病毒可扩增出大小为550 bp的特异性条带,对照毒株扩增结果均为阴性,其灵敏度为146.00 pg/μL。说明优化后的PCR方法特异性强、敏感性高,反应时间明显缩短。 相似文献
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为了快速、准确诊断鸭瘟病毒,根据Gen Bank中登录的鸭瘟病毒基因(UL51)序列,设计合成1对特异性引物,以鸭瘟疫苗株病毒基因组DNA为模板进行PCR扩增;优化PCR扩增程序中的延伸时间、退火温度、循环次数,并对方法的敏感性和特异性进行验证。结果表明:PCR方法经优化后可扩增得到916 bp的目的条带,同预期相符;该方法的最低检出浓度为1.041μg/m L,对其他7种常见鸭易感性病原体的检测结果均为阴性。说明该诊断方法的特异性好、灵敏度高,同时操作快速、简单,可应用于实验室快速诊断鸭瘟病毒。 相似文献
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