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1.
为研究鸡毒支原体病和鸡传染性喉气管炎2种禽类接触性呼吸道传染病二联基因工程活载体疫苗,试验中选取鸡毒支原体TM-1基因和鸡传染性喉气管炎gD基因,经鉴定获得阳性pMD-TM-1和pMD-gD克隆质粒,酶切胶回收目的基因后分别克隆至穿梭载体构建重组pDC315-TM-1、pDC315-gD和pDC315-TM-1-gD。将构建成功的重组穿梭载体和骨架质粒同时转染293细胞,经荧光显微观察、RT-PCR和Western blot检测,成功包装出能表达TM-1蛋白、gD蛋白和TM-1-gD融合蛋白的重组腺病毒pBH-TM-1、pBH-gD和pBH-TM-1-gD。Vivapure AdenoPACKTM法纯化病毒粒子,以TCID50法确定pBH-EGFP、pBH-TM-1、pBH-gD和pBH-TM-1-gD的滴度分别为1010TCID50/mL、1010.125 TCID50/mL、109.75 TCID50/mL、1010.25 TCID50/mL,符合后续动物试验所需滴度要求。动物试验肌内免疫SFP雏鸡结果显示:重组腺病毒pBH-TM-1-gD组与常规疫苗组免疫效果无显著性差异(P0.05),可以成为一种替代抗生素的生物治疗方式。  相似文献   
2.
2014年11月河北某规模化鸡场一批4周龄左右的肉鸡发病死亡,临床表现为精神沉郁、呼吸困难、关节肿大、跛行等症状,为对此疫病进行确诊,通过病理组织学观察、细菌分离、PCR检测、药敏试验、动物致病性试验等实验室诊断方法进行系统分析。病理组织学观察结果显示肺脏出血,心脏、肝脏水肿,并伴有异嗜性粒细胞浸润;镜检可见两极深染的短杆菌;用多杀性巴氏杆菌KMT-1基因和禽呼肠孤病毒(ARV) σB基因特异性引物的扩增结果均为阳性;该巴氏杆菌分离菌可致死小鼠,且对头孢曲松、头孢哌酮等药物高度敏感。根据上述实验室检测结果并结合临床症状进行综合分析,最终确诊该病为ARV和巴氏杆菌混合感染。  相似文献   
3.
为了给天津某规模猪场提供猪传染性胸膜肺炎(PCP)的科学防控和合理的用药方案,本试验对该猪场疑似患PCP的病猪进行临床综合诊断和病理组织学观察,无菌采集病料,通过细菌的分离与培养、镜检、生化试验、卫星试验、PCR检测、动物致病性试验及药敏试验等实验室方法对分离菌进行系统分析。结果发现,病猪呼吸困难,病理剖检和病理组织学观察可见有典型的纤维素性肺炎变化;显微镜下分离菌呈多形性的革兰氏阴性杆菌,且其生化试验、卫星试验结果与传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)特性一致;用APP APX ⅣA毒素基因特异性引物扩增结果为阳性;该APP分离菌对小鼠具有致病性,且对头孢噻肟、氟苯尼考等药物高度敏感。根据实验室检测结果并结合临床综合诊断,最终判定该细菌分离株为猪传染性APP。  相似文献   
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