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1.
根据NCBI GenBank 上登载的猪干扰素β基因序列(S41178),设计一对引物,直接从猪肝脏提取基因组DNA,经PCR 扩增及扩增产物的克隆、测序,获得了新兴本地猪干扰素β全基因片段,其大小为561 bp,与NCBI GenBank上登载的猪干扰素β基因序列完全一致,为进一步研究和开发猪基因工程干扰素制剂奠定了基础。
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2.
根据GenBank上登录的猪白细胞介素18(pIL-18)基因序列,设计了1对特异引物。利用RT-PCR对从3周龄新兴仔猪脾细胞中提取的总RNA进行了扩增,获得了约500bp的片段。将该片段克隆、鉴定、测序,证实已获得了新兴猪IL-18成熟蛋白基因片段,其大小为474bp,编码157个氨基酸,与GenBank上登录的猪IL-18成熟蛋白基因序列完全一致。
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3.
根据NCBI GenBank上登录的猪IFN—α基因序列设计了1对引物,应用PCR技术直接从3周龄新兴猪肝细胞中扩增出了约500bp的基因片段;将该片段克隆到pMD 18-T载体,经PCR、酶切及序列测定,该克隆片段由501个核苷酸组成,共编码166个氨基酸,与NCBI GenBank上登录的2个猪IFN—α基因序列(登录号为M28623和X57191)比较,核苷酸的同源性分别为99.4%和99.2%。
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