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利用浓度梯度SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳对猪囊尾蚴的囊液和虫体，猪带绦虫成虫的头颈节、成节、孕节，猪带绦虫的虫卵以及羊囊尾蚴的蛋白成分进行了对比分析。结果发现：囊液、虫体、头颈节、成虫、孕节、虫卵、羊囊尾蚴分别有35条（15．0－150．4kd）、44条（15．0－133．7kd)、22条（13．3－163．9kd)、19条（13．3－90．1kd)、19条（13．3－90．1kd)、30条（13．3－99．4）和38条（15．0－133．4kd)蛋白带；其中15．0kd和35．5kd两条共同抗原蛋白带，在猪带绦虫各阶段和羊囊尾蚴中含量最大的蛋白带同时也是阶段性的共同抗原蛋白带。这些结果为下一步的保护性抗原筛选奠定了基础。 相似文献
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将40只BALB／c小鼠随机分为2组，A组以VR1020免疫作为对照，B组以TS2l抗原基因的真核表达型质粒VTS2l免疫。用ELISA检测免疫小鼠IgG总量和特异性抗体水平，MTT比色法检测小鼠脾淋巴细胞伴刀豆蛋白A(ConA)刺激的增殖反应及IL—2的谤生活性，常规法检测外周血免疫细胞数量的动态变化。结果显示，VTS2l免疫小鼠血清的IgG含量和特异性抗体效价显著高于对照组小鼠；免疫小鼠脾淋巴细胞ConA刺激增殖反应和IL—2诱生活性均比对照组小鼠显著增强；免疫小鼠的淋巴细胞、巨噬细胞等免疫细胞的数量也显著超过对照组。免疫小鼠的细胞和体液免疫反应显著增强，表明VTS2l具有很强的免疫激活作用，有进一步研制开发成为猪囊虫病DNA疫苗的潜力。 相似文献
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将猪囊尾蚴抗原基因TS11亚克隆至VRl020真核表达载体中，用菌落原位杂交法筛选重组质粒，将其转染COS7细胞，以Northern Blotting检测插入片段的转录；用ELISA检查其翻译表达产物。结果表明：VTS11在真核细胞中能够转录TS11基因的mRNA；其蛋白表达产物能为兔抗猪囊虫高免血清所识别，在转染真核细胞24h后，即可检测到正确表达的猪囊尾勘抗原蛋白。这些为深入研制猪囊虫的DNA疫苗奠定了可靠的基础。 相似文献
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小鼠对猪囊虫抗原基因TS76的免疫应答 总被引：3，自引：0，他引：3
将猪囊虫抗原基因 TS76的真核表达型质粒 VTS76单独或与 p UC18联合肌肉免疫注射于 BAL B/ c小鼠 ,以MTT比色法检测小鼠脾淋巴细胞 Con A刺激的增殖反应及 IL - 2的诱生活性 ,EL ISA方法检测免疫小鼠 Ig G总量和特异性抗体水平 ,常规法检测外周血免疫细胞数量的动态变化。结果发现 ,VTS76免疫小鼠各项细胞和体液免疫应答反应指数均比空白对照组小鼠显著提高 ;联合免疫组小鼠的细胞免疫应答和体液免疫应答反应指数均比 VTS76小鼠提高。由此可见 ,以 VTS76免疫小鼠可诱导其特异性细胞和体液免疫反应 ,而 p UC18又明显提高了 VTS76免疫小鼠的免疫应答水平 ,具有显著的免疫增强作用 相似文献
5.
本实验以猪带绦虫 TS11抗原基因的真核表达型质粒 VTS11肌肉免疫注射 BAL B/ c小鼠 ,四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法检测小鼠脾淋巴细胞刀豆蛋白 A(Con A)刺激的增殖反应及 IL- 2的诱生活性 ;用 EL ISA方法检测免疫小鼠 Ig G总量和特异性抗体水平 ,常规法检测外周血免疫细胞数量的动态变化。结果显示 VTS11免疫小鼠血清的特异性抗体滴度和 Ig G含量显著高于空白对照组小鼠 ;免疫小鼠脾脏淋巴细胞 Con A刺激增殖反应和 IL - 2诱生活性均比对照组小鼠显著增强 ;VTS11免疫小鼠的淋巴细胞和巨噬细胞等免疫细胞的数量也显著超过对照组。这表明 VTS11免疫小鼠 ,可诱导其产生特异性的细胞和体液免疫反应 ,VTS11具有很强的免疫激活作用 ,可望成为预防猪囊虫病的一种新型疫苗。 相似文献
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猪囊尾蚴抗原基因Ts11的克隆及其在大肠杆菌的表达 总被引：1，自引：0，他引：1
PCR扩增重组噬菌体λTs11克隆的cDNA片段,与pUC18连接,得到的重组子用以测序,并进行同源性比较分析,将该片段克隆到原核表达载体pGEX-1λT中,免疫印迹筛选得到能正确表达该片段的重组子,制备该和理组子在大肠杆菌中的表达产物,进行浓度梯度SDS-PAGE和West-ern blotting分析,结果表明Ts11 cDNA片段为522 ,编码含139个氨基酸残基的多肽,在Gen-Bank和EMBL数据库均未发现同源序列,重组质粒在大肠杆菌中表达的融合蛋白分子量为41KD,能与免抗猪囊尾蚴囊液血清产生很强的免疫反应,这些结果证实分离到一个新的编码具有较强免疫原性猪囊尾缦抗原的 DNA克隆..λλ 相似文献
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