甲型鸭肝炎病毒2A蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备   总被引：1，自引：1，他引：0  

胡文  孟春春  李传峰  陈宗艳  梁瑞英  李宁  黄云秀  吴润  刘光清 《甘肃农业大学学报》2014,(6):5-9

采用RT-PCR方法从甲型鸭肝炎病毒ZJ-V株的RNA模板中扩增出2A基因,将其克隆到表达载体pET-30(+)中,经酶切和测序鉴定后转化表达宿主菌BL21(DE3)细胞中,以IPTG诱导表达His-DHAV-2A融合蛋白.结果表明:目的蛋白在1mmol/L IPTG诱导4h的情况下以可溶性形式表达.表达产物经Ni柱纯化后获得了高纯度的融合蛋白.以纯化后的His-DHAV-2A融合蛋白为抗原免疫白兔制备多抗,Western-blot试验表明制备的多抗可与目的蛋白发生特异性反应.以上结果说明,DHAV的2A蛋白在大肠杆菌中成功表达,且制备的多抗血清可用于2A蛋白的表达检测.  相似文献   

一例樱桃谷肉种鸭坦布苏病毒病的诊断     

韦天超  农海连  磨美兰  黄云秀  陆晶莹  覃婉婷  余骋  杨程  韦平 《广西畜牧兽医》2013,(1):22-24

2010年4月以来,浙江等省份的部分鸭场的种、蛋鸭暴发一种以采食量迅速下降、产蛋急剧下降为主要临床特征的疫病,最初该病暂被命名为鸭出血性卵巢炎,现在称为鸭坦布苏病毒病或鸭黄病毒病。目前,浙江、上海、福建、广东、广西、江西、安徽、江苏、山东、河南、河北和北京等省份的鸭群均有发生该病的报道[1-4]。广西发生该病的鸭  相似文献   

鸭甲肝病毒GX株全基因组序列测定及VP1蛋白生物信息学分析     

黄云秀  李传峰  孟春春  陈宗艳  李露  宋凯杰  刘光清  韦天超 《中国畜牧兽医》2015,42(5):1039-1047

为探讨鸭甲肝病毒(DHAV)GX株基因分型特点及主要衣壳蛋白(VP1)的生物学特性,本试验对其进行全基因组序列测定,并应用分子生物学软件将DHAV GX株与DHAV 3个血清型参考毒株进行序列比对分析。结果显示,其基因组全长7 800 bp,由5'和3'非编码区(UTR)和一个大开放阅读框(ORF)组成。其中,5'UTR和3'UTR的长度分别为652和369 bp;ORF长度为6 756 bp,编码2 251个氨基酸长的多聚蛋白,其编码产物至少有12个(VP0/VP3/VP1/2A1/2A2/2A3/2B/2C/3A/3B/3C/3D);在分类地位上DHAV GX株属于DHAV-3,其与DHAV-3参考株核苷酸、氨基酸同源性最高;与DHAV-3 FS株亲缘关系最近,在同一较小分支上。DHAV GX株结构蛋白VP1以第195—201、211—221位氨基酸区段为B细胞优势表位的可能性较大。提示,VP1基因可作为研制DHAV基因工程疫苗的优势候选基因。  相似文献   

大孔吸附树脂分离淫羊藿苷生产工艺研究     

郑小强李利娟  黄云秀 《天然产物分离》2004,2(4):4-5

以淫羊藿苷含量为指标，对药材淫羊藿中淫羊藿苷进行分离研究。淫羊藿粗提取物通过优选的大孔吸附树脂吸附分离，经高效液相色谱检测，得到含淫羊藿苷20％以上的提取物。  相似文献