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菜心ISSR-PCR反应体系的优化 总被引:2,自引:0,他引:2
以菜心(Brassica campestris L.ssp.Chinensis Var.utilis Tssen.et Lee.)为材料,对影响ISSR-PCR扩增结果的因素如Mg^2+、Taq DNA聚合酶、dNTPs、Primer、模版DNA的浓度及引物退火温度、延伸时间和循环次数进行了探讨,确立了适合菜心ISSR-PCR分析的最佳反应体系和PCR扩增参数:在25pL反应体系中含10×buffer 2.5μL,2.0mmol/LMg^2+,0.5U Taq DNA聚合酶,0.2mmol/LdNTPs,0.5μmol/L引物,30ng模板DNA.PCR扩增程序:94℃预变性3min;94℃变性1min,49.7~56℃退火(退火温度随引物不同而定)1min,72℃延伸45s,40个循环;72℃延伸5min. 相似文献
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芥蓝种子加速老化研究 总被引:5,自引:0,他引:5
芥蓝种子在45℃和100%的相对湿度下进行人工加速老化,老化时间为0d,ld,2d,3d,4d,5d,6d,7d。结果表明,随着老化处理时间的增加,种子发芽率、活力指数、田间出苗率和过氧化物酶活性均呈明显下降趋势,而种子浸出液的电导率则逐渐增加。田间出苗率与发芽率、活力指数、过氧化物酶活性呈显著正相关,与种子浸出液的电导率则呈显著负相关。经加速老化芥蓝种子发芽率与田间出苗率的相关程度最高,提供了老化法通过发芽率预测芥蓝种子活力的应用前景。 相似文献
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以果梅品种桃梅为试材, 通过单因子试验分别研究了DNA模板浓度、引物浓度、 Mg2 浓度、 dNTPs浓度、退火温度及循环数等对果梅ISSR-PCR反应的影响. 建立了果梅ISSR-PCR 的最佳反应体系 20 μL反应体系中含10× buffer 2 μL, 2.5 mmol/L MgCl2, 0.2 mmol/L dNTPs, 0.32 μmol/L引物, 20~80 ng模板DNA, 1 U Taq DNA聚合酶. 利用优化的反应体系, 对19个果梅品种进行体系稳定性检测, 结果表明该反应体系的重复性和稳定性良好. 相似文献
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国外蔬菜科技利用太阳能防治病虫害 此法是利用夏季高温农闲期,通过施用有机物、注水、地表覆盖塑料薄膜等综合处理,利用太阳能提高地温达40~45℃,持续8~14天,以热消毒方式进行杀菌、杀虫、除草,同时改良土壤的理化性质,并维持土壤有益微生物的生态体系。 具体做法首先是清除前茬作物收获后遗留的残渣,充分深耕后做畦,将稻草、麦秆等有机物(每100m21~2t)和石灰氮(每100m2 100kg)混合施入畦内,用塑料薄膜覆盖后注水,封闭大棚。消毒完毕后除去薄膜并预防再次侵染病虫害,如设置排水沟,农兵种苗消毒等。此法可大幅度降低十字花科根肿病菌、根… 相似文献
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利用正交设计L16(44)探讨引物、Taq聚合酶、dNTPs、Mg^2+对菜心ISSR-PCR反应的影响.得到适合菜心IS-SR-PCR反应的最佳体系:在25μL反应体系中含2.5μL 10×buffer,2.0 mmol/L Mg^2+,0.5UTaqDNA聚合酶,0.24 mmol/L dNTPs,0.5μmol/L引物,60 ng DNA模板. 相似文献
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利用正交设计L16(44)探讨引物、Taq聚合酶、dNTPs、Mg2+对菜心ISSR-PCR反应的影响.得到适合菜心IS-SR-PCR反应的最佳体系:在25μL反应体系中含2.5μL 10×buffer,2.0 mmol/L Mg2+,0.5UTaqDNA聚合酶,0.24 mmol/L dNTPs,0.5μmol/L引物,60 ng DNA模板. 相似文献