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以感病紫茉莉叶片为材料,采用RT-PCR方法克隆落葵皱缩花叶病毒(Basella rugose mosaic virus,Ba RMV)的外壳蛋白(coat protein,CP)基因,并构建p ET30a-Ba RMV-cp原核表达载体。将原核表达载体转化大肠杆菌[Rosetta(DE3)Plys S],成功诱导表达得到大小约为40.0 k D的与预期大小相符的融合蛋白(His-CP)。SDS-PAGE电泳完毕后用0.25 mol·L~(-1)的KCl溶液染色,将目的蛋白切胶纯化后免疫新西兰大白兔,制备抗血清。间接酶联免疫吸附法(ID-ELISA)检测该抗体的效价为1︰16 000,Western-blotting分析表明该抗体具有很强的特异性。对野外感病紫茉莉和实验室内接种发病本氏烟检测结果也表明,所制备的抗体具有良好的特异性,可用于大规模样品检测。 相似文献
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【目的】研究不同的肥料处理对烟叶机械承受能力的影响,及其潜在的作用机制。【方法】以云烟87为试验材料,设计大田试验,通过方差分析和显著性检验进行研究。【结果】与对照组相比,硫酸钾、硼砂、水溶性有机钾、水溶性有机钾+喷施含微量元素的菌肥和含微量元素的菌肥处理能显著提高云烟87脚叶、下二棚和腰叶的机械承受能力,降低田间折断率,同时能提高烟叶主叶脉中的木质素含量。研究结果显示,抗折损的烟叶主叶脉中木质素含量以及烟叶叶肉组织中的木质素合成关键酶过氧化物酶(POD)和L-苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性普遍偏高。烟叶的最大机械承受重量与主叶脉中的木质素含量呈正相关。主叶脉解剖结构特征表明,抗折断烟叶中的维管束厚度较大,机械组织较多,肥料处理能增加维管束厚度。【结论】以上肥料处理能提高烟叶叶肉组织中POD和PAL活性、叶柄主脉木质素含量,使茎秆机械强度增加,有效增强烟叶机械承受能力。 相似文献
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利用荧光显微镜对烟草互交组合Nicotiana tabacum K326×Nicotiana rustica与Nicotiana tabacum K326×Nicotiana debneyi授粉后花粉管生长部位和形态进行观察比较。结果显示,在正交组合中,N.rustica、N.debneyi花粉管大量生长进入Nicotiana tabacum K326花柱离柱头3/4区间后停止生长,在停止生长部位弯曲、膨胀,形成大量不规则胼胝质颗粒;用蒙导法、切割花柱法、已开放花朵授粉及已开花朵重复涂抹授粉等方法均未能有效促进2个父本花粉管在K326花柱中生长,而蕾期授粉花粉管可以生长进入子房,但授粉后没有获得种子;在反交组合中,K326花粉管可以在N.rustica、N.debneyi花柱中大量生长并进入子房,N.debneyi授粉后获得种子,种子萌发率为(49.67±1.53)%。 相似文献
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