黑籽南瓜中NBS类抗病基因同源序列的克隆与表达分析     

丁玉梅  高婷  仲莎  姚春馨  周晓罡  杨正安  张兴国 《农业生物技术学报》2018,(8)

黑籽南瓜(Cucurbita ficifolia)是云南特有的对病害有较强抗性的一种瓜类作物。为发掘利用其蕴含的优异抗病基因资源,本研究根据已克隆到的植物核苷酸结合位点(nucleotide binding site,NBS)类抗病基因的保守氨基酸结构域基因设计简并引物,通过PCR扩增从黑籽南瓜基因组中分离了8条黑籽南瓜抗病基因同源序列(resistance gene analogous,RGAs),聚类分析和相似性比较结果显示,黑籽南瓜抗病基因同源序列2(black seed squash resistance gene analogous 2,HQRGA2(Gen Bank No.:MG946756)单独为一类,且具有核苷酸结合衔接子(nucleotide-binding adaptor shared by APAF-1,R proteins and CED-4;NBARC)结构,其余7条序列均不具有NBS保守结构域。核苷酸相似性分析表明,HQRGA2与部分抗病基因序列的相似性达到87%~99%,其中与南瓜(Cucurbita maschata)NBS类抗病蛋白基因13(squash resistance gene analogous,SQRGA-13)和SQRGA-8的相似性分别达到98.0%和97.0%。对HQRGA2编码的氨基酸保守结构域分析表明,其含有NBS类抗病基因的4个保守模块:P-loop、Kinase-2、Kinase-3a和GLPL区,且属于无Toll蛋白或白介素1受体类似的NBS富亮氨酸重复(non toll/interleukin-1 receptor like of NBS plus leucine-rich region,non-TIR-NBS-LRR)类抗病基因同源序列。HQRGA2编码氨基酸的同源性分析结果表明,其与南瓜抗病蛋白基因SQRGA-13氨基酸同源性较高,达到96.6%,与其余抗病基因同源性在16.6%~43.8%之间,NBS区域氨基酸系统进化树分析结果表明,HQRGA2可能是一个新的抗病基因片段。q RTPCR分析表明,黑籽南瓜HQRGA2片段的表达受尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)的胁迫诱导,表现出先扬后抑的表达模式,说明HQRGA2可能为抗病相关基因片段。黑籽南瓜中NBS类抗病基因同源序列HQRGA2的获得为分离克隆其完整抗病基因提供了新线索。  相似文献   

蛇足石杉新品种‘容杉2号’     

姜守阳  丁玉梅  仲莎  成晓静  韩曙  陈丽芝  杨正安 《园艺学报》2014,41(12):2557-2558

 ‘容杉2号’是从广西20多个县市收集的25份蛇足石杉种质中通过系统选育而成的新品种，具有石杉碱甲含量高及平均单株产量高的显著特点，其石杉碱甲含量为0.0714%，平均单株产量为3.89 g。  相似文献   

化学药剂处理对黑籽南瓜种子发芽率的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

仲莎  姜守阳  刘桂花  杨正安 《北方园艺》2013,(14):34-35

以新采收的黑籽南瓜种子为试材,选取10%过氧化氢、浓硫酸、10%高锰酸钾、10%氢氧化钠、200mg/L赤霉素5种化学药剂处理黑籽南瓜种子,观察其发芽率,以期筛选出能满足生产上提高种子发芽率的适合药剂。结果表明:用10%的过氧化氢处理黑籽南瓜种子2h,发芽率高达93.33%,不仅与用清水处理的对照有显著性差异,而且与其它化学药剂处理的结果也存在显著性差异,是较理想的药剂。  相似文献