中国野生葡萄抗霜霉病相关基因VpPR4b及其启动子的克隆和功能分析     

刘兵  李梦媛  张娜  尚博兴  刘国甜  徐炎 《园艺学报》2021,(2):265-275

以中国野生葡萄(Vitis piasezkii)‘留坝-8’(抗霜霉病)和欧亚种葡萄(V.vinifera)‘黑比诺’(易感霜霉病)为材料,克隆得到抗霜霉病相关基因VpPR4b和VvPR4b。序列分析发现VpPR4b和VvPR4b核苷酸序列相似性为98.61%。VpPR4b编码区为432 bp,编码143个氨基酸,含有BARWIN保守结构域,属于典型的Ⅱ型PR4蛋白。VpPR4b和VvPR4b均可在霜霉菌侵染后诱导表达。亚细胞定位表明VpPR4b定位于细胞膜上。分别从‘留坝-8’和‘黑比诺’中克隆得到了VpPR4b和VvPR4b的启动子,其序列相似性高达95.65%,并且含有相似的顺式作用元件。通过酵母单杂交验证了转录因子WRKY40和WRKY75可以结合VpPR4b启动子。本研究的结果表明PR4b可能在葡萄抵御霜霉病侵染过程中发挥一定作用。  相似文献   

早酥梨病程相关基因非表达子1基因（NPR1）克隆及原核表达     

张范  张朝红  徐炎  王跃进 《农业生物技术学报》2010,18(1):18-23

本研究以成年早酥梨(Pyrus bretschneideri cv.Zaosu)叶片为材料,通过RT-PCR克隆早酥梨病程相关基因非表达子1基因(NPR1)并获得其全长序列1771 bp,开放阅读框为1761 bp,编码586个氨基酸(GenBank登录号:FJ769372).利用NCBI/Blastp和ClustalX软件进行相似性分析表明,目的基因编码蛋白质序列与日本梨(p.pyrifolia)、秋子梨(P.ussuriensis)、苹果(Malus xdomestica)、烟草(Nicotiana tabacum)和拟南芥(Arabidopsis thaliana)的NPR1蛋白相似性分别为99%、98%、98%、67%和59%.将其连接pGEX-4T-1原核表达载体并转化大肠杆菌(EScherichia coli)BL21,经IPTG诱导表达获得大小约为91 kD的目的融合蛋白,融合蛋白主要以包涵体形式表达,表达量约占总蛋白17%.  相似文献   

中国野生葡萄果实抗炭疽病基因的RAPD标记   总被引：9，自引：1，他引：9  

王跃进  徐炎  张剑侠  周鹏 《中国农业科学》2002,35(5):536-540

以葡萄种间杂交组合88-110[毛葡萄83-4-96(♀)×欧洲葡萄粉红玫瑰]的F1群体为试材,运用RAPD技术,采用集群分离分析(bulked segregant analysis,BSA)法进行中国野生葡萄抗炭疽病基因连锁的分子标记研究.获得了与抗炭疽病基因相连锁的RAPD标记OPC15-1300,并在50株杂种后代、中国野生葡萄8种32个株系、14个欧洲葡萄品种中证明了该标记是可以遗传的.  相似文献   

中国野生葡萄果实抗白腐病基因的分子标记   总被引：12，自引：2，他引：12  

徐炎  王跃进  周鹏  张剑侠 《园艺学报》2003,30(1):6-9

 以感病×抗病的葡萄种间杂交组合白玉霓×塘尾的F₁ 代17 个单株及塘尾自交一代16 个单株为试材, 采用BSA 法和RAPD 技术, 通过对155 个随机引物的筛选, 获得了一个与中国野生葡萄抗白腐病基因连锁的RAPD 标记OPP09-760 , 并在中国野生葡萄8 个种的32 个株系及欧洲葡萄16 个品种中得到验证。进一步将该DNA 片段克隆并测序, 根据两端序列, 设计了一对长26 bp 的特异引物分别扩增供试材料, 获得了与该RAPD 标记相同大小的DNA 片段, 成功地将RAPD 标记转化为SCAR 标记, 可以用作抗白腐病基因的分子辅助选择的依据。  相似文献   

东方百合叶片组织培养研究   总被引：21，自引：1，他引：21  

张延龙  徐炎  王洁纯 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2004,32(1):47-50

对东方百合杂交系(Orientalhybrids)中西西(Sissi)品种的叶片、叶柄进行了离体培养研究。结果表明,诱导西西叶片、叶柄分化出小鳞茎的培养基为S4(MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L),诱导率分别为22.2%,11.1%。S4培养基诱导的小鳞茎粗壮,再分化能力强,诱导率相对较高,宜采用MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L培养基作为继代培养基;生根培养基为1/2MS+IBA0.3mg/L。  相似文献   

利用胚挽救与分子标记选育葡萄无核抗寒新种质     

李莎莎  玉赛赛  傅雨恒  骆强伟  徐炎  王跃进 《园艺学报》2022,(4):723-738

以种子败育型无核葡萄为母本,中国抗寒野生种或者欧山杂交的品种为父本,通过人工大田杂交后利用胚挽救技术和分子标记选育无核抗寒葡萄新种质.在配置的14个杂交组合中,共获得杂种1021株,其中'红宝石无核'×'北冰红'成苗率最高(18.13％),获得634株.以'左优红'为父本时,'火焰无核'适宜作母本;'北冰红'和'雪兰红...  相似文献   

胚挽救创造无核抗寒葡萄新种质     

玉赛赛  李莎莎  骆强伟  徐炎  王跃进 《北方园艺》2021,(22):29-37

  相似文献   

对当前鳖用饲料生产的几点探讨     

徐炎 《饲料博览》2000,(3):45-46

鳖是我国和亚洲诸国的美食补品 ,其肉味鲜美 ,营养丰富 ,是我国出口创汇的重要水产品。我国养鳖业是从７０年代逐步开展起来的。当时养鳖业的所用饲料主要是以鲜活饵料为主 (鲜鱼、虾等 ) ,进入８０年代以来 ,由于人工温控技术的应用 ,鲜活饵料在数量和营养上都无法满足养鳖的需求 ,且投喂鲜活饵料易带进病原细菌和寄生虫等。为此我国在９０年代研制出鳖用配合饲料 ,结束了用进口鳗料喂鳖的历史 ,国内也相继建立了一大批鳖用饲料生产企业 ,以满足养鳖业迅猛发展的需要。由于技术力量不足和质量管理差等原因 ,生产的鳖用饲料还存在严重不足 ,…  相似文献   

中国野生葡萄果实抗炭疽病基因的RAPD标记   总被引：1，自引：0，他引：1  

王跃进  徐炎  张剑侠  周鹏 《中国农业科学》2002,35(5):73-77

 以葡萄种间杂交组合 88 110 [毛葡萄 83 4 96 (♀ )×欧洲葡萄粉红玫瑰 ]的F1群体为试材 ,运用RAPD技术 ,采用集群分离分析 (bulkedsegregantanalysis,BSA)法进行中国野生葡萄抗炭疽病基因连锁的分子标记研究。获得了与抗炭疽病基因相连锁的RAPD标记 :OPC15 130 0 ,并在 5 0株杂种后代、中国野生葡萄 8种 32个株系、14个欧洲葡萄品种中证明了该标记是可以遗传的。  相似文献   

中国野生葡萄果实抗白腐病基因RAPD标记的克隆及序列分析     

徐炎  王跃进  周鹏 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2002,30(6):85-88

以感病×抗病的葡萄种间杂交组合白玉霓×塘尾的F1代及塘尾自交一代33个单株为试验材料,采用BSA法和RAPD技术,对155个随机引物进行筛选,从中获得了1个与中国野生葡萄抗白腐病基因连锁的RAPD标记OPP09-760。用WizardDNAClean-upSystem试剂盒回收纯化RAPD遗传标记OPP09-760,连接于pGME-T-EasyWector上并克隆测序,得到OPP09-760的全序列,其长度为766bp。根据两端序列设计特异PCR扩增引物作为合成中国野生葡萄抗白腐病检测探针的基础,用于检测葡萄抗白腐病种质种和分子标记辅助育种。  相似文献