鱼类神经坏死病毒衣壳蛋白MCP和鮰爱德华氏菌外膜蛋白ompN1融合基因的原核表达          下载免费PDF全文

张转丹  肖正泮  武新丽  孙艳  罗应  吴昊  韦双双  裴业春  王大勇 《热带生物学报》2020,11(2):145-155

目前在针对鱼类神经坏死病毒的疫苗研究中，主要是将神经坏死病毒某些蛋白作为抗原进行注射免疫，但是传统的注射免疫并不能有效地激发黏膜免疫。笔者将鱼类神经坏死病毒的衣壳蛋白（MCP）与鮰爱德华氏菌的跨粘膜蛋白ompN1融合表达，拟制备能够抵抗神经坏死病毒的粘膜疫苗；利用从NCBI GenBank库里获得的鱼类神经坏死病毒的外壳蛋白MCP和鮰爱德华氏菌的外膜蛋白ompN1的基因序列，将两者进行序列优化与全基因合成，分别构建原核表达载体:MCP-ompN1 pET28a和MCP pET28a和ompN1 pET28a，并在大肠杆菌内分别诱导表达融合蛋白MCP-ompN1，MCP，ompN1后，再利用包涵体纯化及透析复性获得MCP-ompN1，MCP，ompN1蛋白。SDS-PAGE结果显示，原核表达纯化得到了较纯的MCP-ompN1 融合蛋白，Western Blotting结果表明，纯化得到的MCP-ompN1 融合蛋白不仅具有MCP抗原性，还具有ompN1抗原性。本实验通过原核表达纯化得到了鱼类神经坏死病毒衣壳蛋白MCP和鮰爱德华氏菌外膜蛋白ompN1的融合蛋白MCP-ompN1，为进一步验证融合蛋白MCP-ompN1能否作为抵抗神经坏死病毒的粘膜疫苗奠定了基础。  相似文献   

甜叶悬钩子植物组织培养褐化现象控制研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

郭治友  钱绍方  罗应 《安徽农业科学》2009,35(19):8848-8850

[目的]寻求甜叶悬钩子组织培养中的最佳抗褐化剂。[方法]以甜叶悬钩子的茎和叶为外植体,必MS为基本培养基,加入不同浓度的抗褐化剂（20％Na2S2O3、Vc和AC）,研究不同抗褐化剂对甜叶悬钩子组织培养的影响。[结果]AC和Vc都能对不同外植体起到抗褐化作用,在加入20％Na2S2O3的培养基上,外植体的褐化程度与Na2S2O3的浓度成正比,培养基中20％Na2S2O3的添加量达20ml时,外植体褐化最为迅速;在加入Vc的培养基上,随着Vc添加量的增加,培养基变成液体或半固体培养基,接入的外植体容易死亡;在加入AC的培养基上,AC的添加量为5g／L时,外植体的褐化率可控制在5％以下。抗褐化控制处理后,可以在诱导愈伤组织的培养基上培养出大量的愈伤组织。1结论IAC是较为理想的抗褐化剂,用量为5g／L。  相似文献   

糖萜素在畜禽饲料中的应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

张俭  罗应  唐优良  伍贤进 《安徽农业科学》2008,36(11):4776-4777

介绍了糖萜素的理化性质、技术指标及其在生产中的功能作用,分析了其在饲料中的应用和前景。  相似文献   

漂浮育苗技术在龙里县的应用总结     

韩庆波裴贵平  罗应君王 萍钟登友  刘秀培徐 维 《农技服务》2014,(2):126-126

龙里县2009年开始至今由县蔬果办开展蔬菜漂浮育苗技术工作,五年来共为我县蔬菜产业区提供各类蔬菜苗18000万余株,可栽大田面积2万余亩,为我县蔬菜产业的发展作出了较大贡献。  相似文献   

明日叶叶的愈伤组织诱导和快速繁殖   总被引：3，自引：0，他引：3  

郭治友  罗应  钱绍方 《广东农业科学》2010,37(7):70-72

为解决生产上短时间快速获得大量的明日叶(Angelica keiskei Koidz)种苗,采用明日叶叶的不同部位作为外植体进行组织培养。结果表明,利于诱导愈伤组织的培养基是N6+6-BA2.0mg/L+NAA2.0～2.5mg/L;愈伤组织诱导丛生芽分化的最佳培养基是N6+6-BA2.0mg/L;丛生芽生根培养的最优培养基是N6+NAA0.5mg/L+AC3.0g/L,其中培养基中加入50.0mg/L的CH可延缓愈伤组织的衰老。  相似文献   

HPLC法测定番木瓜种子对羟基苯甲酸和香草酸的含量(英文)     

周开兵  王辉  梅文莉  李小娜  罗应  戴好富 《果树学报》2012,(5):939-944

【目的】为了测定番木瓜种子醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水提取物中的对羟基苯甲酸和香草酸含量,【方法】建立了测定各提取物中的2种酚酸含量的HPLC法,并检测了2种酚酸的含量。【结果】标样浓度介于1～5 mg.L-1时,标样浓度与峰面积间具有良好线性回归关系;本试验所优化的HPLC法具备良好的精密性、重演性和稳定性,简便易行,适于检测番木瓜种子粗提物中的对羟基苯甲酸和香草酸含量;2种酚酸含量以乙酸乙酯提取物中最高、正丁醇提取物中次之,水提取物中则几乎未能检测到。【结论】2种酚酸主要存在于乙酸乙酯和正丁醇提取物中,在水提取物中几乎不存在。  相似文献   

不同炭化条件制备油茶果壳生物质炭的理化性质比较研究     

侯建伟  邢存芳  杨莉琳  杨枣童  罗应 《土壤通报》2024,(2):383-390

【目的】比较不同炭化条件制备的油茶果壳生物质炭的理化性质,为生物质炭的制取和应用提供参考依据。【方法】在不同炭化温度(T:400℃、500℃和600℃)、恒温时间(t:2 h、4 h和6 h)和升温速率(v:150℃h^-1)条件下将油茶果壳制成了9种生物质炭,借鉴材料科学的方法,研究其热失重特征、形貌结构、表面官能团种类和有机组分含量等内容。【结果】随着炭化温度的升高,纤维素、半纤维素和木质素组分相继分解,600℃以后进入热失重稳定阶段。400℃→600℃升温炭化过程中,油茶果壳生物质炭的氮气吸附-脱附等温线由IV型转为Ⅲ型;400℃时,中孔丰富,总孔容积0.00309～0.00351 cm g^-1;500℃和600℃时,大孔丰富,平均总孔容积分别为0.00352 cm g^-1和0.00390 cm g^-1。随着炭化温度的升高和恒温时间的延长,C=O和C—O—C消失,—OH、—CH₂、C=C、C=O、O—H和Si—O—Si的伸缩振动峰逐渐缩窄;同时由于C=O、—OH、C—O—C...  相似文献   

热带无爪螨主要变应原Blo t 5和Blo t 21融合表达质粒诱导小鼠产生IgG和调节性T细胞     

罗应  彭美琪  肖正泮  罗承慧  王大勇  裴业春 《畜牧兽医学报》2022,53(4):1220-1230

旨在开发防治热带螨过敏症的兽用核酸疫苗,本试验通过对热带无爪螨主要变应原Blo t 5和Blo t 21的基因序列进行密码子优化,构建了热带螨主要变应原融合基因的真核表达载体pVAX1-PADRE-Blo t 5-21-CpG。为验证该真核表达载体的免疫效果,采用皮下注射,以100 μg/100 μL量的pVAX1-PADRE-Blo t 5-21-CpG核酸免疫BALB/c小鼠(n=6),通过ELISA检测小鼠血清中特异性IgG、IgG1和IgG2a的水平变化;流式细胞术检测小鼠脾淋巴细胞中调节性T细胞的变化。结果显示,真核表达质粒pVAX1-PADRE-Blo t 5-21-CpG免疫小鼠后可诱导特异性IgG和IgG2a水平升高,且IgG2a/IgG1的比值升高,这暗示免疫后小鼠机体发生偏向Th1型的免疫反应。此外,该核酸疫苗可诱导小鼠产生较高水平的CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ T细胞,这表明该真核表达质粒免疫小鼠后可能会诱发免疫抑制。  相似文献   

太子参组织培养与快繁技术   总被引：2，自引：0，他引：2  

宋丽莎  黎娇凌  肖国学  刘丽萍  罗应  钱绍方 《广东农业科学》2010,37(6):55-57

以太子参冬芽为外植体进行组织培养试验,结果表明,1/2MS+NAA0.1mg/L+6-BA2.0～3.0mg/L能诱导太子参越冬芽的顶芽和腋芽生长;1/2MS+NAA0.2mg/L+6-BA1.0mg/L适宜诱导丛生芽生长;1/2MS+NAA0.2mg/L+6-BA1.5mg/L适宜太子参组培苗增殖继代培养;MS基本培养基适宜太子参壮苗生根。  相似文献   

都匀龙胆草的组织培养与快速繁殖技术   总被引：3，自引：0，他引：3  

郭治友  刘春芳  罗应  钱绍方 《贵州农业科学》2009,37(8)

为较系统地建立地道大宗药材都匀龙胆草(Gentiana seabra Bunge)的无性快繁体系,实现其中药产业现代化大量的种苗需求,对都匀龙胆草的组织培养与快速繁殖进行了试验研究.结果表明:以MS+6-BA 1.0mg/L+IBA 3.0mg/L为培养基较利于愈伤组织诱导;以MS+6-BA 1.1mg/L+IBA 1.0mg/L为培养基较利于丛生芽的增殖,增殖系数达8.6;以MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L为培养基较有利于生根培养.首次报道培养基中添加AC 3.0g/L可以有效控制龙胆草组织培养过程中出现的褐化现象.  相似文献