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蒋彧何俊蓉刘菲王海娥卓碧萍 《核农学报》2013,(9):1247-1252
以兰花春剑隆昌素品种为材料,用不同剂量60Co γ射线辐照处理其根状茎,研究辐照诱变技术对兰花根状茎组织培养成活率及分化率的影响,并用ISSR分子标记技术检测春剑隆昌素组培苗辐射诱变前后引起的DNA变异情况。结果表明:10 Gy辐射处理后的根状茎分化苗率为93.2%,20Gy辐射处理后根状茎分化苗率为54.4%,而40Gy和60Gy剂量处理后的根状茎几乎全部死亡。主要变异性状是叶色失绿变淡。通过对春剑隆昌素辐射后代形态变异株的ISSR基因检测,发现经过30多年继代培养的春剑隆昌素组培苗的变异率为6%,而辐射诱变后代的变异率为18%。说明经过60Co γ辐射诱变的根状茎所获得的变异比组织培养所获得变异高。可疑突变株和对照组在15个ISSR引物扩增结果中并未出现明显的差异,ISSR分子标记结果与植株表现出的形态变化之间可能并不存在一一对应关系。 相似文献
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以中国兰春剑‘隆昌素’正常绿色组培苗为对照,对它的叶色黄化突变体的光合参数、光响应曲线及模拟参数、荧光动力学参数、CO2响应曲线进行了测定,试验结果表明突变体的净光合速率（Pn）、气孔导度（Gs）、蒸腾速率（Tr）均低于对照,胞间二氧化碳浓度（Ci）高于对照。叶绿素荧光动力学分析结果表明,叶色黄化突变体的最大荧光产量（Fm）较低,其 Fv ／Fm、ΦPSⅡ和 qP 均高于突变亲本,这表明叶色黄化突变体具有较高的光能捕获效率和转换效率。叶色黄化突变体的暗呼吸速率、表观量子效率和羧化效率都低于突变亲本,光呼吸速率也是低于突变亲本的。 相似文献
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序列相关扩增多态性(SRAP)是新一代的分子标记技术,尚未在兰花中应用过.本实验运用改进了的CTAB法提取国兰总DNA,并L16(45)正交设计,对影响中国兰PCR反应的4个因素(引物浓度、Mg2+浓度、dNTPs 浓度、扩增模版)在4个水平上进行优化试验,结果采用DPS软件分析.结果表明,在25 μl总体积中,Taq酶为1个单位的情况下,中国兰SRAP-PCR反应最佳扩增体系为: Mg2+ 2 mmol·L-1、DNA模版100 μg、dNTPs 0.25 mmol·L-1、引物0.3 μmol·L-1.这一优化的SRAP-PCR体系的建立为后续国兰SRAP分析奠定基础. 相似文献
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葡萄A病毒四川分离物的外壳蛋白基因克隆与原核表达 总被引：3，自引：1，他引：2
葡萄A病毒（Grapevine Virus A,GVA）是葡萄病毒属（Vitivirus）的典型种,在世界葡萄产区广泛分布。采集10株“藤稔”葡萄成熟枝条,使用6种葡萄病毒ELISA试剂盒检测发现10个样本中有6个感染4种不同的葡萄病毒。以GVA的ELISA阳性植株为材料进行RT-PCR扩增,首次获得了GVA四川分离物SL10的完整外壳蛋白基因（CP）。该基因全长597 bp,将其与GeneBank收录的15个GVA分离物的CP序列进行比对和构建系统进化树。把不同地理起源的GVA分离物分成2个变异组;其中Ⅰ组包括3个分离物(与Ⅱ组的其他分离物只有75.9%～80.1%的序列同一性);其余的13个分离物组成Ⅱ组（组内分离物具有84.4%～99.5%的序列同一性）。构建了GVA CP的原核表达质粒PET-30-GVAcp并转化BL21菌株,经IPTG诱导,目的基因得到了大量表达。 相似文献
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中国兰叶色突变体生理生化分析 总被引：1，自引：0，他引：1
以中国兰春剑‘隆昌素’和其叶色突变体‘叶艺隆昌素’为试材,通过测定组培苗叶片及根状茎增殖重量、分化率及生理生化指标,研究了生理生化特性对叶色突变体增殖与分化效率的影响。结果表明:叶艺突变体根状茎增殖、分化能力及分化苗平均株高均降低。叶色突变体试管苗叶绿素a、叶绿素b、叶绿素a+b含量分别为对照的16.71%、15.86%、16.49%,且在叶色突变体根状茎分化成苗的过程中,叶绿素b含量增加,而叶绿素a含量降低,而类胡萝卜素相对含量高。可溶性糖含量、可溶性蛋白质含量降低,丙二醛含量及相对电导率升高;活性氧清除酶系中过氧化物酶活性升高,超氧化物歧化酶活性和过氧化氢酶活性降低。可见叶色突变体的增殖与分化效率与其生理生化特性密切相关。 相似文献
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兰花叶色对其观赏及商业价值具有非常重要的意义.国兰春剑隆昌素(Cymbidium longibracteaturn Longchangsu)及其叶色突变体叶艺隆昌素是研究兰花叶色形成机制的重要材料.本研究采用Illumina Hiseq2500对这2种材料的根状茎进行denovo转录组测序,以鉴定其与叶艺形成相关的差异... 相似文献
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