百合鳞茎淀粉磷酸化酶分离纯化及酶学性质研究     

孙红梅  周兰娟  王文娟  袁思施  王春夏 《园艺学报》2012,39(8):1521-1525

 从兰州百合（Lilium davidii var. unicolor）鳞茎中分离纯化淀粉磷酸化酶（Starch Phosphorylase,SP）并研究其酶学性质。结果表明：选用30% ~ 60%硫酸铵分级沉淀,SP 纯化倍数为14.78,回收率为23%,纯化的SP 亚基分子量约62.5 kD;SP 的最适反应体系缓冲液为pH 5.0 的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液,最适反应温度为30 ℃,且体系中不适合加入酚类抑制剂聚乙烯吡咯烷酮（PVP）;SP 不耐强酸,在中性和弱碱性条件下活性稳定,pH < 5 时活性较弱;在合成方向上,SP 对葡萄糖–1–磷酸（G-1-P）的Km值为2.84 mmol · L-1;1 mmol · L-1 Mg2+、Ca2+对SP 活性有极显著的促进作用,K+、Zn2+也有一定的促进作用;大部分离子在高浓度（> 10 mmol · L-1）下抑制SP 活性,但Na+随着浓度的升高,对SP 活性的促进作用增强;10 mmol · L-1 的抗坏血酸可将SP 活性提高30%。  相似文献