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【目的】克隆番茄（Solanum lycopersicum）抗病品种吉美08二氢黄酮醇4-还原酶（dihydroflavonol 4-reductase,DFR）基因,并分析枯萎病菌尖孢镰刀菌番茄专化型（Fol4287）诱导下其在番茄不同组织中的表达模式,为深入研究SlDFR基因在番茄抗病过程中的调控机制提供理论依据。【方法】采用同源克隆技术从番茄中克隆SlDFR基因cDNA全长序列,并进行生物信息学分析,采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测番茄根、茎、叶中SlDFR基因在枯萎病菌诱导下的表达模式。【结果】从番茄抗病栽培品种吉美08中克隆得到SlDFR基因,cDNA序列全长1659 bp,包含1个1149 bp的开放阅读框（ORF）,编码379个氨基酸。SlDFR蛋白的相对分子质量为42.43 kD,等电点（pI）为6.08,是一个亲水的、稳定的酸性蛋白,亚细胞定位在高尔基体上,无信号肽和跨膜结构域,有38个磷酸化位点,其中,丝氨酸18个,苏氨酸15个,酪氨酸5个。SlDFR蛋白的二级结构中α-螺旋占37.73%,延伸链占13.98%,无规则卷曲占40.69%。系统发育进化树分析结果表明,SlDFR蛋白序列与同属茄科马铃薯（Solanum pennellii）亲缘关系较近,其次为黑果枸杞（Lycium ruthenicum）。qRT-PCR分析结果显示,SlDFR基因在番茄叶中表达量最高,在根中表达量最低。SlDFR基因在番茄根、茎、叶中表达量受番茄枯萎病菌诱导,均呈现不同程度上调,其中,在根中表达量变化最大,在叶中表达量变化较小,推测SlDFR基因的表达量与番茄枯萎病菌胁迫响应有关,且番茄根部类黄酮的合成为重要胁迫响应途径。【结论】SlDFR基因表达量受Fol4287的诱导,可能参与番茄枯萎病胁迫响应过程,且对番茄枯萎病菌的响应在番茄根部更强烈,并通过调控番茄根部黄酮类物质的合成提高根系分泌物的抑菌活性从而增强番茄对枯萎病的抗性。 相似文献
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以番茄枯萎病菌尖孢镰刀菌番茄专化型(Fusarium oxysporum f.sp.lycopersici)Fol4287为研究对象,研究环境pH对其生长和产孢状况的影响,并以番茄“吉美008”为试材,通过实验室水培和离体叶片侵染的方法,研究了酸性、碱性及中性环境条件下番茄对Fol4287胁迫的响应差异,以期为实践中通过调节土壤pH抑制番茄枯萎病的发生提供参考依据。结果表明：Fol4287的菌丝最适生长pH环境为5.0,最适产孢pH环境为9.0～11.0。碱性环境中番茄幼苗的丙二醛(MDA)含量、相对电导率、超氧化物歧化酶(SOD)及过氧化物酶(POD)活性均大于酸性和中性环境,但是Fol4287的作用效果相对较弱。酸性环境条件下Fol4287对番茄幼苗伤害加重,MDA含量、相对电导率、SOD、POD活性增加量分别为55.01%、67.01%、105.07%、142.81%,均大于中性环境(19.06%、21.54%、49.81%、70.62%)。酸性环境中的番茄幼苗发病率高于中性和碱性环境。综上所述,酸性环境中Fol4287的毒力较强,而碱性环境虽然对番茄幼苗的正常生长有抑制作用但是... 相似文献
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