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纳豆激酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
利用PCR方法以分泌纳豆激酶的纳豆杆菌染色体DNA为模板扩增纳豆激酶基因,将该基因克隆到质粒载体PUC19上,筛选重组子,通过限制性内切酶和PCR技术分析初步确定该重组子所携外源基因为纳豆激酶基因。利用基因重组技术构建了纳豆激酶基因的表达载体,并在大肠杆菌中进行了表达,凝块溶解时间法(CLT)测出表达产物具有溶解血栓活性。在确定了最佳培养时间与诱导时间后,SDS-PAGE分析结果表明基因表达产物为分泌型,蛋白表达量占菌体蛋白的12%左右。 相似文献
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云芝菌丝体产SOD的深层发酵培养基的优化 总被引:1,自引:0,他引:1
通过设计L16(42)正交实验,确定了可提高云芝菌丝体中SOD活性的深层发酵培养基的最优组分,实验结果表明,培养基各组分对菌丝体生物量的影响顺序依次为黄豆粉>(NH4)2SO4>土豆>葡萄糖>麦麸,而对SOD总活力的影响顺序为(NH4)2SO4>黄豆粉>麦麸>葡萄糖>土豆.综合考虑试验结果及成本因素,确定云芝菌丝体产SOD的最适培养基为马铃薯160 g·L-1、葡萄糖16 g·L-1、麦麸10 g·L-1、黄豆粉18 g·L-1,不添加硫酸铵,pH自然. 相似文献
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