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Toll样受体是参与机体天然免疫的一类模式分子,可以识别多种病原体相关分子模式,快速启动有效的免疫应答,在机体的抗感染免疫中发挥重要的作用。为了深入探讨鸡Toll样受体的免疫功能,为禽类相关疾病的预防和控制提供依据,试验通过RT-PCR技术克隆海兰褐鸡TLR15基因的全长阅读框,同时将其胞外区片段插入载体p ET32a并导入大肠杆菌BL21(DE3)中进行优化表达,经SDS-PAGE和Western Blot法检测融合蛋白,并将融合蛋白作为免疫原免疫昆明鼠后制备多克隆抗体,同时采用免疫组织化学的方法,对ch TLR15的组织表达进行检测。结果表明,海兰褐鸡TLR15编码基因全长2 607 bp,编码868个氨基酸残基,其中胞外区1 962 bp,重组蛋白分子量约为72 ku;免疫小鼠可以产生特异性的抗体,抗体效价为1∶10 000;免疫组化检测结果显示,ch TLR15主要在脾脏中表达,在肝脏和肺部表达较少。研究结果可为禽类TLR15相关的免疫调节机制分析提供物质基础,也可为后续抗感染生物制剂的开发奠定基础。 相似文献
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为探究小鼠钠碘转运体（Na+/I- symporter，NIS）蛋白的结构、功能及其在乳腺组织的表达特征，本研究扩增小鼠乳腺NIS基因编码区，测序鉴定后采用结构预测软件对NIS蛋白进行生物信息学分析，同时采用Western blotting、免疫组织化学技术和半定量PCR技术对NIS基因在不同乳腺发育时期的转录和表达水平进行分析。结果显示，小鼠NIS基因编码区全长1 857 bp，与人NIS的同源性为80.40%，保守性较强。NIS蛋白含有618个氨基酸残基，分子质量约为65.7 ku，分子式为C2996H4701N749O833S32，理论等电点为7.44，半衰期为30 h，消光系数为102 510，不稳定系数为29.31，脂溶系数为105.91，富含疏水性氨基酸，为稳定的疏水蛋白。NIS蛋白二级结构含有α-螺旋（41.42%）、延伸链（18.28%）、β-转角（4.05%）和无规则卷曲（36.25%），三级结构与之相一致。Western blotting结果显示，4个时期均出现特异性杂交带，大小为65.7 ku，与预期结果相符。免疫组织化学结果表明，NIS蛋白在小鼠的青春期、妊娠期到泌乳期的乳腺组织中表达量逐渐增加，在泌乳期达到高峰，存在显著差异（P<0.05），在退化期逐渐恢复到类似青春期状态；NIS基因mRNA的变化规律与蛋白表达一致。本研究结果为进一步探究NIS蛋白在乳腺发育和泌乳调控中的作用提供了参考依据。 相似文献
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文中分别从有效铜浓度、有效磷浓度、EDTA和EDDS、重金属复合污染、根际土中细菌和植物内生菌等几个方面介绍影响海州香薷对重金属吸附能力的原因,可为研究海州香薷的学者提供近期研究信息,也可为合理进行矿区废弃地的植物修复或植被恢复提供一定的理论依据。 相似文献
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