山羊抗新城疫病毒高免血清的研制和应用     

朱鸿飞  董国雄  李俊宝 《中国预防兽医学报》1994,(5)

健康山羊用新城疫病毒（ＮＤＶ）强毒株经３次攻击（总剂最为１１～１４ｍｌ）后，可获得ＨＩ为１：２（１１）～１：２（１２）的高免血清，该血清在紧急预防和治疗中可获得良好效果：对发病早期（初显症状或出现症状之前）的感染鸡．保护率达９２％；对症状较明显的病鸡的治愈率为６２％．  相似文献   

牛胰腺核糖核酸酶A的基因克隆、表达及初步鉴定     

张泉  袁燕  朱鸿飞  张鑫宇  孙怀昌 《中国农业科学》2006,39(6):1248-1252

【目的】为了避免在制备基因治疗或基因免疫的质粒时使用动物源性的核糖核酸酶A（RNase A）。【方法】提取牛胰腺总RNA，利用RT-PCR扩增出牛核糖核酸酶A cDNA，RT-PCR产物克隆到pGEM-T载体测序验证后，将此cDNA亚克隆到大肠杆菌分泌型表达载体pEZZ18中。【结果】SDS-PAGE电泳显示其转化菌经温度诱导后能表达预计的大小为28 kD重组蛋白。用渗透法释放出表达产物，将其加入到经碱裂解粗提的质粒DNA中并孵育0.5 h，琼脂糖凝胶结果表明表达产物能很好地去除细菌的RNA并且不降解超螺旋质粒DNA。【结论】在质粒的纯化过程中，重组牛核糖核酸酶可以替代动物源性的RNase A。  相似文献   

猪呼吸与繁殖综合症病毒RT-LAMP检测方法的建立   总被引：4，自引：2，他引：4  

鑫婷  侯绍华  贾红  郭晓宇  丁家波  李延鹏  丁敏  朱鸿飞 《中国农业科学》2010,43(1):185-191

【目的】建立一种适用于猪繁殖与呼吸综合症病毒的快速、灵敏、特异性检测方法,即一步反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP)。【方法】设计3对针对PRRSVN基因的8个位点的特异性引物,用优化后的反应体系检测RT-LAMP的特异性、灵敏性并对临床样本进行检测。【结果】RT-LAMP检测方法从核酸抽提到检测仅需要70min,肉眼即可观察检测结果,该方法具有良好的特异性,灵敏度是RT-PCR的10000倍,在对50份猪血液样本RNA的检测中,该方法与传统的RT-PCR检测方法具有很好的统一性(κ=0.83)。【结论】RT-LAMP检测方法可快速、灵敏、特异的检测PRRSV,并适用基层和现场检测。  相似文献   

板蓝根试治鸡黄曲霉毒素中毒   总被引：2，自引：0，他引：2  

陈洪涛  朱鸿飞 《中国兽医杂志》1995,21(11):21-22

板蓝根试治鸡黄曲霉毒素中毒陈洪涛（扬州大学农学院，２２５００１）朱鸿飞（江苏淮阴市农科所）黄曲霉毒素是黄曲霉、寄生曲霉等霉菌寄生于谷粒等饲料上产生的代谢产物。黄曲霉毒素及其衍生物有２０余种，它对畜禽及人类均具有剧烈的毒性。主要损害肝脏，并有致癌作用。...  相似文献   

山羊抗新城疫病毒高免血清的研制和应用     

朱鸿飞  董国雄 《中国畜禽传染病》1994,(5):44-45

健康山羊用新城疫病毒（ＮＤＶ）强毒株经３次攻击（总剂量为１１－１４ｍｌ）后，可获得ＨＩ为１：２＾１＾１－１：２＾１＾２的高免血清，该血清在紧急预防和治疗中可获得良好效果：对发病早期（初显症状或出现症状之前）的感染鸡，保护率达９２％，对症状较明显的病鸡的治愈率为６２％。  相似文献   

山羊抗鸡法氏整病高免血清的研制和应用     

朱鸿飞  董国雄 《中国兽医杂志》1993,19(4):56-56

  相似文献   

重组犬α6干扰素的酵母表达及其抗病毒活性评价     

宋天琪  侯绍华  郭晓宇  鑫婷  姜一曈  袁维峰  朱鸿飞  贾红 《中国畜牧兽医》2019,46(7):2144-2150

试验旨在构建犬α6干扰素毕赤酵母表达系统,并对其进行优化和筛选,以期获得高活性的重组犬α6干扰素（CaIFN-α6）。根据CaIFN-α6基因序列,按毕赤酵母菌密码子偏好性对CaIFN-α6全基因序列进行优化与合成,用Xho Ⅰ和Not Ⅰ双酶切将其连接至载体pPICZαA中,构建pPICZαA-CaIFN-α6重组表达质粒,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞。提取质粒pPICZαA-CaIFN-α6并线性化,电转入酵母感受态细胞X33中制备重组菌。采用甲醇进行诱导表达,收集上清,超滤浓缩,最终获得纯化的重组CaIFN-α6。利用BCA法测得纯化后的CaIFN-α6蛋白浓度为1.5 mg/mL,Western blotting分析表明CaIFN-α6蛋白具有良好的反应原性,SDS-PAGE显示其纯度约在95%以上,MDCK/VSV法检测其效价为2.37×10⁷ IU/mL,比活性为1.58×10⁷ IU/mg。结果表明犬α6干扰素在毕赤酵母pPICZαA表达载体系统中成功表达,且具有较高的生物活性,为后期的犬病毒病的临床预防与治疗提供了良好的支撑。  相似文献   

环磷酰胺预处理制备兔抗Ⅰ型鸭肝炎病毒高免血清     

朱鸿飞  陈浦言 《畜牧与兽医》1999,31(5):9-10

以正常鸡胚尿囊液和环磷酰胺预处理试验兔, 再以Ⅰ型鸭肝炎病毒（Ｄｕｃｋ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｖｉｒｕｓ Ｔｙｐｅ Ⅰ, ＤＨＶ Ⅰ） 标准强毒（ＡＴＣＣ, Ｃ９／Ｄ２） 接种后致死鸡胚的尿囊液, 经灭活、乳化制成油佐剂抗原多次免疫试验兔, 获得了鸡胚中和效价（ＥＰＤ５０） 达１∶３２ 以上的兔抗Ⅰ型鸭肝炎病毒高免血清（ＤＨＶ ⅠＳ） 。  相似文献   

牛分枝杆菌Mb1230基因的表达纯化及其活性评价     

李明  贾红  鑫婷  郭晓宇  袁维锋  侯邵华  侯强  高新桃  吴竞  董瑞凯  杨宏军  刘来兴  朱鸿飞 《中国畜牧兽医》2015,42(10):2544-2550

为了探究牛分枝杆菌Mb1230蛋白在牛结核病诊断中的应用价值,本试验利用PCR方法扩增出Mb1230基因,构建重组质粒pET-22b-Mb1230,经IPTG诱导表达后用亲和层析纯化重组蛋白,通过结核菌素皮内变态反应试验(TST试验)、IFN-γ释放试验(IGRA试验)和间接ELISA对重组蛋白的活性进行评价。SDS-PAGE和Western blotting结果显示,重组蛋白大小与理论值相符,且能与鼠抗His的抗体反应有特异性条带;在TST试验、IGRA试验和间接ELISA中也表现出抗原活性。结果表明,重组Mb1230蛋白具有良好的B细胞活性和T细胞活性,在牛结核病诊断中具有应用潜力。  相似文献   

细粒棘球蚴Eg95s基因的串联表达及表达系统优化   总被引：2，自引：2，他引：0  

刘丹  贾红  侯绍华  丁敏  朱鸿飞 《中国畜牧兽医》2009,36(8):33-37

为研制新型棘球蚴病基因工程疫苗,根据GenBank公布的细粒棘球蚴Eg95基因序列,针对其中一段348 bp高度亲水的优势表位序列设计引物,扩增Eg95s基因,利用同尾酶法基因同向串联方案,获得3拷贝Eg95s串联体。分别用两种表达载体pGEX-6p-1和pET-32a构建重组质粒,转化入3种大肠杆菌表达宿主BL21(DE3)、Rosseta(DE3)和Origami (DE3),对其进行IPTG诱导表达,经免疫印迹分析结果表明,均能正确表达具有免疫原性的Eg95s蛋白。通过重组蛋白的表达量、可溶性、纯化方法等方面的比较,对Eg95s重组表达系统的载体及宿主菌进行了优化,结果表明,3拷贝的串联Eg95s在以pET-32a为表达载体,Rosseta(DE3)为宿主菌的系统中表达最佳。最终获得了表达量高、可溶性好、纯化方便的Eg95s重组蛋白表达系统,为大规模生产棘球蚴病基因工程疫苗提供了科学依据。  相似文献