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1,5-二磷酸核酮糖羧化酶活化酶(RCA)对桑树的光合作用具有重要调节作用。以桑树幼叶为材料分离mRNA,反转录合成cDNA,以cDNA第1链为模板,根据RCA的保守区域设计1对兼并引物,经PCR扩增获得RCA的基因功能区中间片段。对得到的桑树RCA的cDNA片段编码氨基酸进行BLAST分析表明,其与GenBank中其它植物来源的RCA有较高同源性。将RCA的部分编码区插入原核表达载体pET30a(+),并转化到大肠杆菌菌株BL21中,经IPTG诱导,RCA的部分编码区在BL21菌株成功表达。将得到的RCA基因片段反向插入植物表达载体,构建了RCA基因反义表达载体pBI121-RCA,以利于进一步阐明RCA与1,5-二磷酸核酮糖羧化酶相互作用和调控关系以及用基因工程手段深入探讨桑树光合作用机制。 相似文献
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氯化钠胁迫对桑树超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的影响 总被引:5,自引:4,他引:1
用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳研究了氯化钠(NaC l)胁迫下桑树超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)同工酶酶谱,分别测定其酶活力。结果表明:在低浓度NaC l胁迫时,桑树叶片SOD的活性升高,CAT活性稍有降低,在高浓度NaC l胁迫时桑树叶片SOD活性降低,CAT活性随NaC l浓度增加活性升高;随着NaC l胁迫时间的延长,SOD的活性呈下降趋势,CAT活性在胁迫初期降低,随NaC l胁迫时间延长活性升高,胁迫超过一定时间后活性降低。同工酶酶谱分析显示,在NaC l胁迫下桑树SOD、CAT同工酶酶谱不仅有活性的变化,也有谱带的消失和新的谱带形成。 相似文献
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本文利用解剖镜、光学显微镜及扫描电子显微镜(SEM)对不同龄期中国梨木虱若虫的外部形态特征进行了比较和描述,确定了区分不同龄期若虫的主要特征为:①体长与体宽;⑦触角节数及其上感觉孔数目;③泌蜡表皮形态。 相似文献
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MicroRNA (miRNA)作为一种重要的基因表达调控因子,在植物生长发育和响应环境胁迫过程中具有重要的调节功能.本研究克隆了桑树miR482基因(MulmiR482),发现该基因可以表达加工成两种成熟体mul-miR482-5p和mul-miR482-3p,两者在桑树根中均具有较高的表达丰度,而在叶片中的丰度较低.通过拟南芥嫁接试验发现mul-miR482-5p和mul-miR482-3p在植物体内具有长距离运输特性.将MulmiR482基因转入拟南芥,发现其可以在拟南芥中表达并可加工成成熟体,同时发现MulmiR482基因在拟南芥中表达降低了转基因植株对盐胁迫和丁香假单胞菌番茄致病变种DC3000的抗性.上述结果为深入研究桑树mul-miR482的生物功能和其表达调控机制奠定了基础. 相似文献
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溶血素为细菌分泌的能够使细胞溶解的毒素,是病原菌重要的毒力因子。利用同源克隆技术得到桑树黄化型萎缩病植原体溶血素全长基因,命名为MDPH(GenBank登录号:HQ891118)。MDPH全长717 bp,编码238个氨基酸,预测蛋白质分子质量为27.3 kD,等电点为9.29,氨基酸序列与其它植原体中已分离的溶血素有很高的同源性。蛋白质序列结构预测表明:MDPH的二级结构中富含α-螺旋,其次为β-折叠和无规卷曲,而β-转角仅占5.46%。对蛋白质序列的理化特征预测表明:MDPH有多个亲水和疏水区域,且疏水性强于亲水性;易形成跨膜螺旋,具有7个显著跨膜结构区;蛋白的抗原性较强,不含有明显的信号肽序列,为非经典分泌蛋白。将MDPH的编码区插入原核表达载体pET30a(+),并转化到E.coli BL21中,经过IPTG诱导,MDPH在BL21菌株中成功表达。研究结果为深入探讨MDPH的功能及植原体的致病机制奠定了基础。 相似文献
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