三种外检植物病毒的灭活处理     

陈京  胡伟贞 《植物检疫》1997,11(2):81-84

番茄环斑病毒（ＴｍＲＳＶ），烟草环斑病毒（ＴＲＳＶ），南芥菜花叶病毒（ＡｒＭＶ）的病汁液和ＰＥＧ粗提纯液，经适宜温度或甲醛处理，均丧失侵染性而有抗原性。ＴｍＲＳＶＰＥＧ粗提纯液经６０℃（水浴）处理１０分钟或２８℃７天，ＴＲＳＶ粗提纯液置２５℃一个月，Ａｒ－ＭＶ在４０℃７天条件下均可做为阳性对照的灭活处理的最佳方案。可保存抗原性在７～１２月以上。为了防止危险性检疫病毒的侵入，对入境种苗进行检疫，需建立快速、准确、标准化检疫程序，而在血清学快速诊断试验中，提供阳性对照，对提高判断准确率是必要的。因此，为了解决在诊断试剂中提供阳性对照但又不能使其检疫性病毒人为扩散这一重要问题，我们在研究三种外检病毒（ＴｍＲＳＶ，ＴＲＳＶ，ＡｒＭＶ）的检验技术的同时，又进行了一些灭活试验，用化学和物理方法钝化病毒，使其失去侵染性而保持抗原性，并应用于酶联诊断试剂盒中，本文报道了初步试验结果  相似文献   

关于“蚕豆染色病毒检疫程序”的建议     

邹雪蓉  胡伟贞 《中国进出境动植检》1995,(4):24-25

蚕豆染色病毒(Broad bean stain virus,BB-SV)属豇豆花叶病毒组,粒体为等轴多面体,直径25—28nm;自然发生于蚕豆(Vicia faba)、小扁豆(Lens esculenta)、豌豆(Pisum satium)和车轴草属(Trifolium spp.);人工接种侵染4科21属50种植物,其中豆科有17属36种,传毒介体为豆长喙象甲(Apion vorax)和豌豆根瘤象(Sitona tineatus)等4种象甲,以前者为最主要;病株花粉可通过授粉将病毒传至健株种子;远距离则通过种子传毒,种传寄主有  相似文献   

番茄环斑病毒的灭活处理     

胡伟贞  吴新华 《植物检疫》1993,7(4):306-308

番茄环斑病毒(TmRSV)的病汁液和 PEG 粗提纯液,用温度、甲醛和戍二醛以及超声波进行灭活处理。PEG 粗提纯液经温度(水浴)60℃处理10分钟或使甲醛浓度达0. 3%二种方法后,均丧失侵染性而有抗原性。将其在4℃冰箱中存放,前者抗原性能保持8个月以上,后者只能保持5个月。病汁液不经处理,在4℃冰箱中存放1个月能丧失侵染性,而抗原性也可保持8个月以上。所以阳性对照的灭活处理以病汁液在4℃下存放1个月和 PEG 粗提纯液60℃处理10分钟为最佳方案。  相似文献   

蚕豆染色病毒检测技术标准化研究初报   总被引：2，自引：0，他引：2  

邹雪容  胡伟贞 《植物检疫》1993,7(4):309-312

通过对蚕豆染色病毒生物学、血清学、形态学的研究,初步提出诊断 BBSV的标准程序为 SPA-ELISA 测定阳性反应的样品,再进行生物测定和免疫电镜观察,均为阳性者,即可定为此样品携带 BBSV。本试验筛选出蚕豆成胡10号、昆明白皮豆、豌豆A_(256)和 A_(907)为 BBSV 的鉴别寄主,其潜育期短、症状稳定,不易与其他病毒病害混淆;肯定了1990年从叙利亚进口蚕豆资源中分离到的 BBSV 提纯制剂,制备所得抗血清,经测定和国际通用的 BBSV 抗血清反应一致;提出利用 A 蛋白酶联检测 BBSV 的技术参数及其运用结果;免疫电镜诱捕法观察到病毒粒体,修饰法看到粒体外附着的外套。  相似文献   

马铃薯Y病毒组的提纯     

Edouard Kurstak  胡伟贞 《植物检疫》1985,(4)

马铃薯 Y 病毒组的有些成员容易提纯,并且容易获得高产量(20mg 以上/千克组织)。这些病毒有菜豆黄色花叶病毒的某些株系、三叶草黄脉、曼陀罗鞋带病毒、天仙子花叶、花生斑驳、辣椒脉斑驳、马铃薯Y、烟草蚀纹和芜菁花叶病毒的有些株系。马铃薯病毒组其他成员已证明提纯极其困难,常常得到产量很低。例如包括菜豆黄色  相似文献   

种传病毒种子检测技术的新进展     

胡伟贞 《世界农业》1988,(11)

对种传病毒的检测方法的要求是,灵敏、快速、可靠。目前,在国际上检测种子带毒的先进方法主要是以下几种:免疫电镜(ISME)、酶标免疫吸附试验(ELISA)、放射免疫测定(RISA)、dot—blot免疫吸附试验(dot—blot immunoassay,又称dot-ELISA)和核酸分子杂交(Nucleic acid hybridisation)。在这些新技术中,放射免疫测定虽灵敏,能定性定量,但标记用的位同素价格昂贵、测定结果需要复杂  相似文献   

蚕豆染色病毒的再次发生与鉴定     

夏更生  邹雪蓉  朱振东  杨久臣  胡伟贞 《植物保护》1991,17(1):18-19

蚕豆染色病毒(Broadbean stain virus—BB SV)系豇豆花叶病毒组成员,病毒粒体直径约25～28nm。1965年Lloyd等首次在英国的蚕豆上发现并描述了这种病毒。病株表现叶片褪绿斑驳和花叶,外种皮呈坏死色斑。BBSV的寄主仅限于豆科植物,易种传和花粉传,种传率约10％,其传毒介体有豆长吻象甲(Apion vorax)和豌豆根瘤象(Sitonalincatus)。现主要分布在英国、法国、德国、瑞典、捷克、奥地利、波兰、匈牙利、意大利、叙利亚、黎巴嫩、苏丹、摩洛哥、埃及和突尼斯等欧洲和西亚北非国家,已成为这些国家  相似文献   

番茄环斑病毒单克隆抗体细胞株的建立及检测方法的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

陈京  胡伟贞 《植物检疫》1994,8(1):1-3

用纯化的番茄环斑病毒（ＴｍＲＳＶ）免痊Ｂａｌｂ／ｃ小白鼠，取脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合。筛选出６株分泌ＴｍＲＳＶ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞株。抗体免疫球旦白分属于１ｇＧ２ａ，ＩｇＧ３和１ｇＭ。用免疫电镜诱捕法检测，６个ＭｃＡｂ与加拿大分离物反应均为阳性，其中ＣＥ３，ＣＧ８，９Ｇ９不与西德分离物反应。属于１ｇＧ３的单抗具有与Ａ旦白结合的特性。  相似文献   

蚕豆染色病毒检测技术标准化研究再报     

邹雪容  胡伟贞 《植物检疫》1997,11(2):65-68

蚕豆染色病毒检测技术标准化研究再报①邹雪容１胡伟贞２朱振东１霍纳新１（１中国农科院品种资源所１０００８１２农业部植物检疫实验所）Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｓｔａｎｄａｒｄｉｚａｔｉｏｎｐｒｏｃｅｄｕｒｅｆｏｒｂｒｏａｄｂｅａｎｓｔａｉｎｖｉｒｕｓｑｕ...  相似文献   

酶联免疫吸附试验(ELISA)方案     

胡伟贞 《植物检疫》1980,(1)

A.试剂1、饱和硫酸铵溶液煮沸溶解足够的(NH_4)_2SO_4,最少764克/升水放凉到室温。2、磷酸盐缓冲盐水(PBS),pH7.4。8.0克 NaCl0.2克 KH_2PO_42.9克 Na_2HPO_4.12H_2O0.2克 KCl0.2克 NaN_3将各种成分溶解在800毫升蒸馏水中,加到1,000毫升,核对 pH。3、吐温 PBS 液加1.0毫升吐温20到1,000毫升 PBS 液中,  相似文献