甘蔗花叶病毒田间杂草寄主鉴定     

许小洁  于伟鹏  殷复伟  耿超  田延平  李向东 《植物病理学报》2021,50(5):627-631

Sugarcane mosaic virus (SCMV) is the prevalent virus causing maize dwarf mosaic in China. Here we collected 90 weed samples belonging to 15 species, among which Setaria viridis, Echinochloa crusgalli and Digitaria sanguinalis showed distinct mosaic symptom. The maize in-bred line B73 and cultivar Denghai 605 plants inoculated with extracts of S. viridis, E. crusgalli and D. sanguinalis showed distinct mosaic symptom in the systemically infected leaves at 10 days post-inoculation. ELISA results showed that samples of S. viridis, E. crusgalli and D. sanguinalis were positive to antibody against SCMV CP. The duplex-PCR showed that samples of S. viridis, E. crusgalli and D. sanguinalis were infected by SCMV which was not belonging to group IV. The SCMV ORF of 3 weed and one maize samples shared nucleotide and amino acid sequences identities of 93.1%-99.7%. Gene-flow analysis showed that the SCMV isolates from three weed samples had frequent gene flow with the SCMV isolates from maize in Shandong Province. Phylogenetic analysis showed that all the four SCMV isolates were clustered into group I. These results indicate that S. viridis, E. crusgalli and D. sanguinalis are weed reservoir of SCMV. These results provide theoretical guidance for the effective control of SCMV.  相似文献   

甘蔗花叶病毒辅助成分-蛋白酶基因原核表达及抗血清制备     

许小洁  于伟鹏  杨广玲  韩士玲  何梦君  杨旭  李向东 《山东农业科学》2019,(3):87-91

利用RT-PCR克隆甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus, SCMV) DWK1分离物辅助成分-蛋白酶(helper component-proteinase,HC-Pro)基因,酶切后连接原核表达载体pEHISTEV,得到重组质粒pEHISTEV-SCMV-HC-Pro。将重组质粒转化大肠杆菌菌株Rosetta,经IPTG诱导后,表达出57 kD的融合蛋白。切胶回收融合蛋白,多点注射法免疫新西兰长耳兔,制备SCMV HC-Pro抗血清。间接ELISA结果表明,该血清效价为1∶8 192。感染DWK1的玉米叶片病汁液稀释128倍时,该血清仍然能够有效检测出HC-Pro。Western-blot检测结果表明,该血清可特异性检测SCMV第Ⅰ组分离物DWK1和第Ⅳ组分离物DWK2,与同属的烟草脉带花叶病毒(TVBMV)和马铃薯Y病毒(PVY)均无反应。本研究为准确、快速检测SCMV HC-Pro并进一步研究其功能和作用机制奠定了基础。  相似文献   

甘蔗花叶病毒田间杂草寄主鉴定     

许小洁  于伟鹏  殷复伟  耿超  田延平  李向东 《植物病理学报》2020,50(5):627-631

正玉米矮花叶病1963年在美国俄亥俄州首次报道[1],我国1968年在河南省首次报道。甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)是引起我国玉米矮花叶病的主要病原[2, 3]。根据基因组序列的系统发育分析,SCMV分为4个组,其中第I组分布最广,第IV组是新发现的一个强毒株系,近年来的发生呈上升趋势[4, 5]。SCMV属于马铃薯Y病毒属(Potyvirus),粒体为弯曲线状。其由蚜虫非持久性传播[6],能侵  相似文献   

中国小麦花叶病毒弱毒突变体筛选与鉴定     

许小洁  迟云化  于伟鹏  游朋朋  何梦君  耿超  田延平  李向东 《植物病理学报》2021,51(2):217-224

中国小麦花叶病毒(Chinese wheat mosaic virus,CWMV)是我国小麦土传花叶病毒病的重要病原.将CWMV RNA1、RNA2片段分别连接到pCB301-Rz载体,得到重组质粒pCWMV-RNA1和pCWMV-RNA2,这2个质粒可在本氏烟上引起花叶和畸形症状,在小麦上引起黄花叶症状.在pCWMV...  相似文献   

甘蔗花叶病毒第IV组分离物RT-PCR检测体系的建立及应用     

闫志勇  程德杰  房乐  许小洁  田延平  贾曦  李向东 《植物病理学报》2017,47(4):463-469

 甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)是引起我国玉米矮化叶病的主要病毒。根据其基因组序列,SCMV可以分为4个组,其中第IV组分离物属于新出现的强毒株系。为了快速检测SCMV尤其是IV组分离物的发生情况,我们针对SCMV I-IV组及IV组分离物设计了6对引物,从中筛选出特异性最强的2对引物(I-IV-2F/I-IV-2R和IV-1F/IV-1R),进行PCR体系的优化。优化后的PCR体系为:退火温度51℃,dNTP终浓度为0.1 mM,引物终浓度为0.20 μM,TaqDNA聚合酶终浓度为0.015 U·μL^-1。利用该体系, 引物对I-IV-2F/I-IV-2R和IV-1F/IV-1R均能够从50 ng感病叶片或0.05 ng病毒RNA中检测出SCMV。通过优化两对引物浓度比例建立了能同时检测SCMV所有分离物及第四组分离物的双重PCR体系。利用该体系从山东、河南及云南均检测出SCMV第IV组分离物的发生。本研究为SCMV尤其是SCMV第IV组分离物的快速检测提供了技术支持。  相似文献   

甘蔗花叶病毒衣壳蛋白的原核表达及抗血清制备     

许小洁  张继武  徐德坤  殷复伟  田延平  李向东 《山东农业科学》2018,(8)

将甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)第Ⅰ组分离物DWK1和第Ⅳ组分离物DWK2的衣壳蛋白(coat protein,CP)基因分别克隆到原核表达载体pEHISTEV,得到重组质粒pEHISTEV-SCMV-Ⅰ-CP和pEHISTEV-SCMV-Ⅳ-CP。将两个重组质粒转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导,均表达出分子量为38 kD的融合蛋白。切胶回收融合蛋白,免疫新西兰长耳兔5次,获得了SCMV-ⅠCP和SCMV-ⅣCP的多克隆抗体。间接ELISA结果表明,两种血清的效价均达到1∶8192。Western Blot结果表明,利用SCMV-ⅠCP制备的抗血清与DWK1反应更强,而利用SCMV-ⅣCP制备的抗血清与DWK2反应更强。本研究为SCMV检测及CP功能研究奠定了基础。  相似文献