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猪转录因子Nanog高效表达、多克隆抗体制备及其应用 总被引：1，自引：0，他引：1
多能转录因子Nanog可维持干细胞的自我更新和多向分化潜能.为深入研究猪(Sus scrofa)Nanog在多能性调控网络的作用,本研究制备了鼠抗猪源Nanog多克隆抗体.首先,从猪肾脏中克隆Nanog基因CDS,再将CDS连接到pET32a质粒上,构建重组表达载体pET32a-Nanog.将重组载体转化大肠杆菌(Escherichia coli) Rosetta (DE3),经异丙基-β-d-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-d-thiogalactoside,IPTG)诱导表达,优化最佳诱导时间、温度和IPTG浓度等表达条件,获得分子量为57 kD的Nanog重组蛋白.将纯化的Nanog蛋白,免疫C57BL/6小鼠(Mus musculus),6周后获得阳性抗血清,通过Western blot和免疫荧光检测其抗体效价及其特异性.结果显示,在28℃、8 mmol/L IPTG、诱导2.5 h的条件下,可获得高效Nanog重组表达;制备的鼠抗猪Nanog多克隆抗体能特异性识别猪诱导多能干细胞表达的Nanog蛋白.研究结果为猪多能性干细胞的研究提供了有力工具. 相似文献
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李大龙,高中文化,黑龙江省讷河市龙河镇国庆村8组村民。2013年成立了大龙玉米种植专业合作社,入社土地9024.3亩。由于规模生产、科学管理,2013年种植的9024.3亩玉米在大灾之年总产仍然高达6530吨,亩产723.6公斤。一、遵纪守法,诚实守信,以合作社为载体带动合作社社员和村民增加收人。2013年春,他准备把入社的9024.3亩土地全部种植玉米的时候,得到了市镇两级政府和村两委及合作社社员的大力支持,村领导及时帮助解决生产过 相似文献
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多能干细胞(pluripotent stem cells,PSCs)作为一类重要的细胞资源,成为目前国内外的研究热点,获得这类细胞在当今医学研究和生物技术的发展及应用中具有重要的意义。猪(Sus scrofa)由于其生理结构和代谢特征与人(Homo sapiens)较为相似,成为动物多能干细胞建系的重点研究对象。然而目前,猪多能干细胞建系工作仍存在很多难题。本文将从猪多能干细胞建系研究的进展和存在的问题入手,对照小鼠(Mus musculus)和人相关研究的成功经验,总结目前已经报道的猪多能干细胞的培养条件、调控因子、信号通路和基因表达特征,以期为建立猪胚胎干细胞和诱导多能干细胞系提供参考。 相似文献
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王传振 《新农村(黑龙江)》2014,(16):65-65
黑龙江省讷河市农经总站在讷河市市委、市政府的领导下,在上级业务部门的指导下,在加强村级资产管理、保护农民合法权益方面取得了较大的成绩,但还存在一些问题和不足,需要进一步制定措施,完善程序,加强管理,确保村级资产保值增值。 相似文献
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本试验采用隧道式微波干燥设备干燥桑叶制作桑叶粉,以烘干法、晒干法、室内阴干法制作的桑叶粉为对照,分别配制人工饲料,采用一至二龄一次给饵法鉴定养蚕效果。结果表明,利用上述4种干燥方法加工的桑叶粉配制人工饲料养蚕,收蚁后24h疏毛率、存活率、龄期经过等指标差异不大,但起蚕率和蚕体重存在一定差异,168h三龄起蚕率以室内阴干法较高,二龄眠蚕体重以微波干燥法最重,两项指标均以80℃烘干法最差。综合考虑各种因素认为,微波干燥法是大规模生产优质桑叶粉比较理想的方法。 相似文献
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