排序方式： 共有7条查询结果，搜索用时 15 毫秒
1
1.
利用免疫共沉淀技术研究RSVCP、SP和NSvc4蛋白的互作 总被引：1，自引：0，他引：1
为了检测水稻条纹病毒(Rice sgipe virus,RSV)外壳蛋白(coat protein,CP)、病害特异蛋白(disease-special protein,SP)和可能的运动蛋白NSvc4自身和两两之间的互作关系,首先通过PCR扩增获得了分别融合有HA或c=Myc标签的RSV CP、SP和NSvc4基因,并将其插入到植物表达载体pEGAD或pKYLX71:35S2中.重组质粒转化根癌农杆菌(Agrobactctium tume-faciens)EHA105后,将含有不同重组质粒的根癌农杆菌菌液混合后注射烟草(Nicotiana benthamiana)叶片.提取烟草中瞬时表达的蛋白,以HA或c-Myc抗体进行免疫共沉淀试验,最后免疫混合物通过c-Myc抗体或HA抗体进行Western blot检测,确定蛋白的互作情况.结果表明,RSV CP蛋白自身能够发生互作,而CP与SP,CP与NSvc4,SP与SP,SP与NSvc4,及NSvc4与NSvc4蛋白之间均未有检测到互作现象. 相似文献
2.
水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)的外壳蛋白(coat protein,CP)参与病毒转录、复制等多个生物学过程。病毒蛋白之间的互作对病毒侵染活性非常重要,在明确RSV外壳蛋白CP能够自身互作的基础上,通过构建CP蛋白N端、M区段和C端(CP-N、CP-M和CP-C)的酵母表达载体,利用酵母双杂交系统确定外壳蛋白CP自身互作的活性区段。结果表明,N端和C端第1~81个氨基酸是参与水稻条纹病毒CP蛋白自身互作的活性区段。这一研究结果不仅有助于加深理解RSV CP蛋白在病毒基因组稳定、复制过程中的作用,也有助于加深了解RSV、寄主和传播介体之间关系。 相似文献
3.
性信息素引诱烟草甲效果研究 总被引：1，自引：0，他引：1
[目的]研究性信息素不同剂量、载体、种类与诱捕器类型引诱烟草甲的效果,为应用性信息素进行烟草甲监测与防治提供技术支撑。[方法]在福建南平烟草仓库通过信息素不同剂量、不同载体、不同诱捕器和不同诱芯来源比较烟草甲的诱捕效果。[结果]当信息素诱芯剂量浓度为2 mg时,诱虫效果最好;诱芯载体A效果最好,与载体F差异显著,与载体E差异不显著,但载体E的持效性最好;G1和G3两类诱捕器效果最好,与G2差异显著,G1更适合推广应用;4种不同信息素诱芯来源比较,以A和B两类诱芯效果最好,与诱芯C和D差异显著。[结论]性信息素不同剂量、载体、诱捕器类型和诱芯来源均能不同程度地影响烟草甲诱捕效果。 相似文献
4.
[目的]制备效价高且特异性强的黑尾叶蝉RNAi途径关键蛋白Argonaute 2(AGO2)多克隆抗体,为进一步研究AGO2蛋白在叶蝉RNAi免疫途径中的调控功能及作用机制提供技术支持.[方法]通过RT-PCR从黑尾叶蝉基因组扩增出AGO2基因的功能片段,与原核表达质粒pET-28a重组构建重组质粒,然后转化大肠杆菌BL21感受态细胞进行诱导表达;以纯化的AGO2融合蛋白免疫雄性新西兰大白兔获得高效价的多克隆抗体,并以多克隆抗体为一抗,采用Western blotting检测AGO2蛋白在健康和带毒黑尾叶蝉中的表达情况.[结果]RT-PCR扩增获得的黑尾叶蝉AGO2基因片段为1635 bp,构建的pET-AGO2重组质粒能在BL21感受态细胞中成功表达出AGO2融合蛋白,其最适表达条件:温度28℃,IPTG浓度0.5 mmol/L,诱导时间5 h,摇床转速220 r/min.以纯化AGO2融合蛋白免疫雄性新西兰大白兔获得的多克隆抗体效价为1:106,抗体浓度约350μg/mL.Western blotting检测结果表明,AGO2蛋白在健康和水稻矮缩病毒(RDV)感染黑尾叶蝉中均有表达,但与健康黑尾叶蝉相比,AGO2蛋白在RDV感染黑尾叶蝉中的表达水平更高,即RDV侵染能提高AGO2蛋白的表达水平.[结论]制备获得的黑尾叶蝉RNAi途径关键蛋白AGO2多克隆抗体具有高纯度和高效价,且特异性强,可用于检测AGO2蛋白在病毒感染黑尾叶蝉中的表达水平,进而揭示AGO2蛋白在介体昆虫RNAi途径中的功能机制. 相似文献
5.
6.
为了解奇异变形杆菌持留菌形成特征和防控家禽养殖中细菌性疾病,以鸡源致病菌奇异变形杆菌PM2658为研究对象,通过二倍稀释法测得抗生素对鸡源奇异变形杆菌PM2658的最小抑菌浓度(Minimum inhibitory of concentration,MIC),用斑点培养(spot-plate)法分析PM2658在不同抗生素和营养条件下持留菌形成特征。结果显示,硫酸庆大霉素、头孢噻肟钠、氧氟沙星对PM2658的MIC值分别为1.56、0.78和3.13μg·mL-1。在16×MIC和100×MIC硫酸庆大霉素处理下,鸡源奇异变形杆菌PM2658都可以形成持留菌,形成率分别为8.04×10~(-4)和1.03×10~(-6)。16×MIC硫酸庆大霉素-4×MIC头孢噻肟钠、16×MIC硫酸庆大霉素-4×MIC氧氟沙星、4×MIC头孢噻肟钠-4×MIC氧氟沙星、16×MIC硫酸庆大霉素-4×MIC头孢噻肟钠-4×MIC氧氟沙星不同抗生素组合处理下,鸡源奇异变形杆菌PM2658的持留菌形成规律与单独硫酸庆大霉素处理的持留菌形成规律一致,也表明鸡源奇异变形杆菌PM2658持留菌具有多重抗生素耐受性。在16×MIC硫酸庆大霉素处理下,与LB和1/2LB培养条件相比,1/5LB培养条件下鸡源奇异变形杆菌持留菌形成率最高,比前两者分别提高了17.67倍和5.05倍,说明鸡源奇异变形杆菌持留菌的形成还与营养环境密切相关。持留菌遗传学特性检测结果显示,鸡源奇异变形杆菌PM2658持留菌的遗传学特性并没有发生改变。鸡源奇异变形杆菌确实可以形成持留菌,其形成特征取决于特定的抗生素条件。 相似文献
7.
1