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基于传统的酸性酚—异硫氰酸胍—氯仿一步提取法,比较分析多种优化操作步骤,摸索出一种高质量提取体质量为80~150 g草鱼肠系膜脂肪组织总RNA的改良方法。试验结果显示,相较于肝脏、脾脏、肠道等脏器组织,草鱼肠系膜脂肪组织RNA丰度低,且极易在样品前处理阶段出现顽固性降解问题。探索发现,将取样量增至约30 mg,可提升RNA产量以满足常规试验需求。针对降解难题,改良常规的样品前处理技术流程,采用鲜样液氮速冻,冻样直接放入TRIzol试剂中裂解,并即刻进行长时间机械匀浆,时长约3 min等核心操作步骤,可显著降低脂肪组织样品RNA的降解。Agilent生物分析仪检测结果显示,改良方法提取的草鱼肠系膜脂肪组织RNA完整度高,关键RIN值为8.7~9.0。研究推测,长时间机械匀浆所形成的持续剪切冲击力或许有助于TRIzol试剂中的异硫氰酸胍等成分突破油滴阻碍而有效抑制内源性RNA酶。本方法提取的草鱼脂肪组织总RNA质量可满足高通量转录组测序要求。 相似文献
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为丰富科尔沁沙地针叶树种的多样性 ,“0 0 9”项目引种外来针叶树种在科尔沁沙地进行育苗造林。经多年的育苗试验和物侯观测 ,已初步了解各树种在科尔沁沙地的生长情况 ,经试验分析和造林对比已初步筛选出适宜该地生长的 4个树种9个种源 ,丰富了科尔沁沙地的树种资源。 相似文献
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日光温室是我国北方反季节生产的主要保护地设施之一,是本地区农民增收致富的新途径,文章根据中国三北009项目已有研究成果,总结出的日光温室葡萄栽培技术,以期为日光温室调整结构和增收致富提供更好的技术支撑。 相似文献
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通过对哲盟地区现有针阔混交林的调查,从林分生长,抗逆性及种间的相互作用等多方面进行综合功能评价。结果表明,同等立地条件下配置合理的针阔混交林优于纯林。从而提出了哲盟境内不同立地条件下,营造针阔混交林的树种选择、结构配置和营造技术经验。为开发半干旱地区沙产业和“低产林”改造提供一定的依据。 相似文献
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