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1.
2.
猪O型口蹄疫病毒强弱毒株VP1基因的克隆与序列分析 总被引:3,自引:0,他引:3
本研究根据口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因的序列,设计并合成了1对用于扩增整个VP1基因的引物(5P、P6)。从细胞培养液或组织中提取总RNA,通过PT-PCR扩增,从F29株O3I3株和T509株中均获得了1条约740bp的DNA电泳带。将PCR产物双酶切后电泳回收,插入到相应双酶切的pUC18质粒中,获得了重质粒。通过PCR鉴定,证明重组质粒pUCVP1/F29,pUCVP1/0313,pUCVP1/T509均插入了VP1基因。对上述3个重线质粒进行测序后分析,F29强毒株与O313、T509弱毒株相比,其核苷酸序列同源性分别为98.75%和99.06%;因F29株核苷酸发生3个碱基缺失与1个碱基替换,故推导的氨基酸序列同源性分别仅为44.13%和41.32%,而T509和O3I3株相比,其核苷酸、氨基酸序列同源性分别为99.37%和95.31%。通过序列分析发现,本研究的3个毒株与国内大多数毒株(包括1997年台湾暴发FMDV所分离的毒株,除O/A/58株外)均属同一基因型,核苷酸序列同源性为85%-94%;而与国外毒株相比,属不同的基因型,核苷酸序列同源性仅为81%-82%,其推本研究的3个毒株与国内分离的大多数毒株的VP1基因的氨基酸序列同源性高达87%-95%,本项研究对猪O型FMDV的强弱毒株VP基历进行克隆与序列分析,将进一步丰富我国FMDV毒株VP1基因资料库,为更加科学地防制FMD提供分子水平依据。 相似文献
4.
5.
张春红 《河南畜牧兽医(综合版)》2011,32(2):23-24
当前,新城疫严重威胁着养鸡业的健康发展.新城疫又称亚洲鸡瘟,是由副黏病毒引起的急性高度接触性传染病,以往主要对鸡侵害性较大,最近几年感染宿主增多,出现对鹅、鸭强致病性的毒株,强毒株新城疫可以在免疫良好的鸡群发病,并迅速波及全群,如果不尽快治疗或治疗不当,死亡率达90%以上(主要是100天以前的育成鸡). 相似文献
7.
8.
表达猪生长激素基因的重组腺病毒的构建及对猪生长的促进效果观察 总被引:1,自引:0,他引:1
利用复制缺陷型重组腺病毒作为基因表达载体,将猪生长激素(pGH)基因直接转导到猪体内细胞,研究猪生长激素基因在猪体内的促生长作用.用同源重组的方法,构建含pGH基因的重组腺病毒(Ad-pGH).将其感染293细胞和PK-15细胞,均可检测到pGH.用1 mL此重组腺病毒(1010TCID50)一次性肌肉注射60日龄的杂交长白猪.结果表明,试验组的猪平均增重比对照组的猪增加37%(注射后第4周)和19%(注射后第6周);饲料报酬提高28%(注射后第4周)和18%(注射后第6周).试验结果证明,由重组腺病毒表达的pGH具有生物学活性,在猪体内起到明显的促进生长的作用.重组腺病毒介导的pGH基因在猪体内的表达可维持约4周. 相似文献
9.
通过细菌内同源重组的方法成功构建了表达H3N2亚型猪流感病毒血凝素的重组腺病毒。首先将血凝素基因亚克隆到穿梭载体质粒pAdeno Vator-CMV5-IRES-GFP上,与腺病毒基因组质粒pAdeno Vator△E1/E3共转化大肠杆菌BJ5183菌株,经细菌内同源重组产生重组腺病毒质粒pAd—HA—GFP。将该重组质粒转染293细胞以包装重组腺病毒。根据报告基因GFP的表达及Western-blot分析,证明获得了可正确表达猪流感病毒血凝素的重组腺病毒rAd—HA—GFP。重组腺病毒经一次性腹腔注射接种昆明鼠,2周后可检测到血凝抑制抗体,并且抗体至少可以持续12周,证实重组腺病毒介导表达的血凝素蛋白具有良好的免疫原性,可诱导小鼠产生高滴度的特异性抗体。 相似文献
10.