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为了探求新生克隆猪可能的死亡原因以及是否存在不完全的DNA甲基化重编程,本试验运用亚硫酸氢盐测序法分别检测了H19基因和IGF2R基因差异甲基化区(DMR)在新生死亡克隆猪和同期正常猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏中的甲基化状态。结果发现,H19基因DMR在克隆猪肺脏中表现为超甲基化,极显著高于正常猪(95.20%VS46.80%P〈0.01),且10个测序克隆中存在2处连续的全甲基化CpG位点(4-9位、12-S17位),而在其他组织中甲基化差异不显著(P〉0.05);IGF2R基因DMR在肝脏中处于超甲基化状态,显著高于正常猪(80.00%V839.41%P〈0.05),而在肺脏中为去甲基化状态,板显著低于正常猪(14.71%VS66.47%P〈0.01),在其他组织差异不显著(P〉0.05)。结果说明,在死亡克隆猪中,H19基因DMR在肺脏和IGF2R基因在肝脏与肺脏中存在不完全的DNA甲基化重编程,这可能是导致克隆动物死亡的因素之一。 相似文献
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为优化湖羊冻精生产工艺,提高冻精质量,以湖羊种公羊的精液为试验材料,分别选择7种稀释液进行处理,采用液氮熏蒸法进行冷冻,并设置不同解冻温度和时间进行交叉试验。结果表明:7号稀释液处理的湖羊精子在42℃和70℃两种解冻条件下的活力、活率、质膜完整率和顶体完整率均最高; 6种解冻条件中,70℃解冻5 s的解冻效果最佳,其活率、活力、质膜完整性和顶体完整率分别达50. 62%、43. 09%、40. 09%和54. 37%。综上,7号稀释液和70℃解冻5 s是湖羊精液冷冻的最佳稀释液和解冻条件。 相似文献
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<正> 林内计划火烧是一项新发展起来的营林用火技术,国内外已大面积生产应用。采用低强度火有计划地烧除地表可燃物,可有效地减少林内可燃物数量,增加土壤肥力,促进林木生长。该技术应用于病害防治国外已有先例。落叶松落叶病(Mycosphaeria Laricileptolepis)是我国重要林木病害之一,已在许多地区造成严重危害。特别是林内卫生条件不好,郁闭度不高的林分,加之测报条件不完善等原因,应用烟雾剂防治效果不够理想。根据落叶松落叶病侵染循环特点,结合营林用火经验,我们 相似文献
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分析了在受精液SOF中添加发情绵羊血清、肝素和牛血清白蛋白(BSA)对绵羊冷冻-解冻精液体外获能和受精的影响。结果表明:(1)使用含发情羊血清浓度为0、5%、10%和20%的受精液,分裂率分别是0、73.79%、73.25%和77.61%。加发情羊血清的3个试验组分裂率差异不显著。而未加血清的试验组分裂率为0,证明发情羊血清促进了绵羊冷冻-解冻精液的体外受精效果。(2)以含5%发情羊血清受精液为基础液,添加0IU/mL、5IU/mL和10IU/mL的肝素,受精后分裂率分别达86.64%、86.63%和75.53%。不加肝素组和5IU/mL肝素组分裂率差异不显著,而10IU/mL高浓度肝素组同其他两组比较,差异极显著(p<0.01)。说明含10IU/mL肝素的受精液,降低了绵羊体外受精后的分裂率。(3)用含5%发情羊血清受精液为基础液,以添加3mg/mLBSA为试验组,不加BSA为对照组,受精后两组分裂率差异不显著。发情绵羊的血清促进绵羊冷冻-解冻精子的体外受精效果。在受精液中添加发情绵羊血清进行绵羊冷冻解冻精子的体外受精,无需添加肝素和BSA。而且添加10IU/ml肝素,降低了受精后的分裂率。建议受精液中添加发情绵羊血清浓度在2%~10%较合适。 相似文献
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为促进崇明白山羊实验动物化应用和临床诊断提供数据,本研究采用全自动血细胞分析仪,对上海市崇明地区不同性别和生理状态的185只健康崇明白山羊19项主要血液生理指标进行测定。结果显示:后备母羊,妊娠母羊,哺乳母羊,成年母羊,成年公羊,断奶小母羊,断奶小公羊,哺乳小羊之间嗜酸性粒细胞计数(EO)指标差异显著(P<0.05),中性粒细胞计数(NEUT),嗜碱性粒细胞计数(BASO),嗜碱性粒细胞百分比(BASO%)3项指标差异不显著(P>0.05),其他15项指标差异均极显著(P<0.01)。说明不同性别和生理状态的崇明白山羊部分血液学指标波动范围有一定的差异。 相似文献
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为获得具有植酸酶腮腺特异性表达的猪转基因克隆胚胎,本研究使用植酸酶腮腺特异性表达的DNA质粒(包含腮腺分泌蛋白(parotid secretary protein,PSP)启动子与终止子序列、Neo筛选基因、绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因和高比活的植酸酶appA基因),采用脂质体转染和基因素418(G418)药物抗性筛选的方法获取稳转细胞系,并利用体细胞核移植技术获得植酸酶转基因胚胎。结果表明,本研究构建的DNA质粒可用于细胞筛选,且质粒越小,细胞的转染效率越高,14.89 kb的YM6552仅获得了7.1%的转染率,EGFP质粒则获得了43.4%的转染效率。在单克隆形成上,较小的pYN3600也获得了更高的单克隆形成数(25个),其中表达EGFP的单克隆有14个,植酸酶PCR阳性集落有11个,高于YM6552的单克隆数(19、8和6)。转基因细胞构建重构胚胎后,所有的胚胎均能表达绿色荧光蛋白,虽其体外发育能力有所下降,但差异不显著(P>0.05)。综上所述,本研究所采用的植酸酶质粒、细胞筛选方法和核移植技术可生产植酸酶重构胚。 相似文献
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