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动物克隆技术及其意义西北农业大学常万存窦忠英1997年2月27日,英国的《自然》杂志发表了Wilmut等人题为“来自胚胎和成年哺乳动物细胞的存活后代”一文,引起了全世界的广泛关注。该文报道了1996年7月5日诞生于苏格兰首府爱丁堡罗斯林研究所的小绵... 相似文献
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采用放射免疫分析法测定了10只西农萨能奶山羊分娩期外周血浆、脐静脉、羊水和尿水中孕酮(P)、雌激素(E)、前列腺素E_1(PGE_1)和前列腺素F_(2α)(PGF_(2α))的含量,并对其分娩机理作了探讨。 产前72~12小时,外周血浆P水平迅速下降,与E水平逐渐上升呈极显著的负相关(r=-0.95,P<0.005);产前60小时至产出期,E和PGF_(2α)逐渐升高,二者呈极显著的正相关( r=0.93,P<0.005)。开口期,E、PGE_1和PGF_(2α)迅速增加,三者均于产出期达峰值,分别为2158±294、1397±398和744±181pg/ml(x±SE)。分娩后,P、E、PGE_1及PGF_(2α)均明显下降。 脐静脉血浆P、E、PGE_1和PGF_(2α)分别是胎羔排出时母体外周血浆含量的3.4、2.1、3.5和36.0倍,羊水中E、PGE_1和PGF_(2α)分别是该时期母体外周血浆含量的1.4、2.0和7.0倍。 相似文献
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为了克隆奶牛Oct4基因开放性阅读框全序列,并建立高效、稳定产生逆转录病毒质粒pMSCV-Oct4的包装细胞株.我们以50~60日龄的胎牛原始生殖嵴为材料,用RT-PCR的方法扩增出牛Oct4基因全序列,全长为1 083 bp与GenBank公布的序列的同源性为99.4%.将其插入到逆转录病毒载体pMSCVneo的多克隆位点,获得重组逆转录病毒质粒pMSCVneo-Oct4.鉴定正确后,通过Lipofectamine2000将其转导入包装细胞PT67,用含有G418的培养液进行抗性筛选,获得阳性细胞克隆.细胞上清经过RT-PCR、透射电镜及病毒滴度测定等方法鉴定,证实所包装病毒存在,其滴度值为8.83×107 cfu/mL.试验结果表明我们已获得携带牛Oct4基因的高滴度感染性逆转录病毒. 相似文献
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波尔山羊胚胎移植应用研究报告 总被引:2,自引:0,他引:2
2002年10~11月,分4批使用阴道栓 FSH对36只供体波尔山羊进行超数排卵处理.在放人阴道栓的第12~15d,连续4d递减量早晚肌注FSH.34只供体羊发情、配种、采胚(反应率94.44%,34/36),平均采胚18.03枚(613/34),其中可用胚平均15.65枚(532/34),可用胚率86.79%(532/613),将532枚7日龄可用胚移植给277只受体关中奶山羊,妊娠217只,妊娠率78.34%.妊娠受体羊共产羔257只,每只供体平均获羔羊7.56只,供体羊采胚后,平均45 d发情配种,有34只妊娠,产羔65只,平均产羔1.91只.胚胎移植羔羊性别、初生重、发病率和波尔山羊自繁羔羊无显著差异(P>0.05).本次波尔山羊胚胎移植产生明显的经济效益,技术成熟,可推广应用. 相似文献
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观察小鼠ES-D3细胞在MEF、新生牛睾丸支持细胞(nBTSCs)和新生兔睾丸支持细胞(nRTSCs)饲养层上生长4 d nanog基因的表达水平和生长行为。RT-PCR分析显示,MEF饲养层上培养4d的ES-D3 nanog基因含量高;nBTSC饲养层上培养nanog基因表达较低;而RTSC饲养层上培养nanog基因表达最低。结果显示:不同饲养层上的ES-D3细胞集落形态和培养4d分化程度有差异。在MEF饲养层上的ES-D3细胞培养4d,集落形态仍然很规则,细胞间紧密,集落表面少见大细胞,AKP染色强阳性。在nBTSC饲养层上的ES-D3细胞,集落界限清晰,AKP染色显示,集落大部分细胞呈阳性,少数的细胞集落为弱阳性,可见集落表面分散有较多的大细胞。在nRTSC饲养层上的饲养层上的ES-D3,集落隆起不明显,集落界限不清晰,大部分集落形态不太规则,AKP染色显示集落中部分细胞呈阳性,少数的细胞集落为全阴性,集落表面有较少的大细胞,集落周围有伸出的成纤维细胞。 相似文献
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小鼠胚胎干细胞体外定向诱导分化成骨细胞 总被引:3,自引:0,他引:3
将小鼠5d龄ES-D3细胞源的类胚体(EBs)单细胞,按5×104/mL接种6孔细胞培养板,在DMEM基础培养基中使EBs单细胞贴壁培养。于第14!21天时,分别添加60%成骨细胞条件培养液(A组)、50μg/mL维生素C"50mmol/Lβ-磷酸甘油(B组)和50μg/mL维生素C"50mmol/Lβ-磷酸甘油"1μmol/L地塞米松(C组),并设不添加诱导剂对照组(D组)。第22天时用1%茜素红染色显示阳性细胞,计算成骨细胞诱导形成率,数据用方差分析和多重比较检验。结果表明,A组细胞增殖呈团状聚集,茜素红染色阳性细胞结节多分布于聚集的细胞群内及其边缘,成骨细胞诱导形成率为10.04%,与对照组比较,差异极显著(P<0.01);B组诱导分化的细胞分泌物形成网状结构,茜素红染色阳性细胞分布在这些网状结构中,成骨诱导形成率为7.43%,与对照组比较差异显著(P<0.05);C组茜素红染色阳性细胞分散而均匀,但未出现网状结构,成骨细胞诱导形成率提高至27.57%,与对照组比较差异极显著(P<0.01)。 相似文献