鸡Ii结合Rab5a和Rab7b分子的分析     

陈芳芳  桂亚萍  于凤梅  张俊  谈阳  李锦春  刘翠艳  查丽莎 《畜牧兽医学报》2021,52(12):3588-3597

本研究旨在探明鸡恒定链（invariant chain，Ii）与内吞体转运蛋白Rab5a和Rab7b结合的结构域和在细胞内共定位的特征。首先，用PCR和基因突变技术将Ii胞浆区与跨膜区[Ii_{（Cyt-Tra）}]、Ii CLIP （class Ⅱ-associated invariant chain peptide）-三聚体区[Ii_{（CLIP-TRIM）}]和Ii突变体[Ii_{（M81-87aa）}、Ii_{（M91-99aa）}和Ii_{（M81-99aa）}]分别插入pET-32a和pEGFP-C1构建相应的原核和真核重组质粒。其次，将构建的含有绿色荧光蛋白的重组质粒与实验室保存的含有红色荧光Rab5a和Rab7b的重组质粒共转染至人胚胎肾细胞系293 T，观察它们的共定位。将构建的原核重组质粒进行表达和纯化，最后用拉下法和免疫印迹检测Ii与Rab5a和Rab7b的结合域。结果表明，成功构建Ii结构域及Ii突变体的重组质粒。Ii_{（Cyt-Tra）}及Ii突变体均能与Rab5a和Rab7b在细胞内共定位，而Ii_{（CLIP-TRIM）}与空载体却不能。Ii的胞浆区和跨膜区是与Rab5a和Rab7b结合的功能结构域，而不是CLIP与三聚体区。综上所述，鸡Ii与Rab5a和Rab7b共定位和结合的区域是其胞浆区和跨膜区，而不是内质网腔区。这些结果提示Rab分子参与了Ii在胞内细胞器的转运机制，为进一步研究Ii及其载体在细胞内的转运机制和功能提供了新的途径。  相似文献   

猪CD3∈分子的cDNA克隆与序列分析     

王建华  杨汉春  郭鑫  陈艳红  查振林 《中国兽医杂志》2005,(6)

应用RT-PCR和3′RACE技术,本研究从猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增克隆了猪CD3ε基因并进行了序列分析。序列分析结果表明,猪CD3εcDNA序列长1241nt,其中5′非翻译区80nt,3′非翻译区570nt,开放阅读框591nt,该开放阅读框编码196个氨基酸残基的CD3ε前体蛋白(无糖基化位点);在猪CD3ε蛋白的胞外区,Cys49、Cys91、Cys108和Cys111为保守性氨基酸残基,它们与CD3ε免疫球蛋白样结构的形成有关。在猪CD3ε蛋白胞浆区,存在免疫受体酪氨酸活化基序(ITAM)、内质网潴留基序和1个SH3结合基序,其中ITAM基序含有2个SH2结合基序和2个潜在酪氨酸磷酸化位点Tyr177和Tyr188,这些基序是猪CD3分子参与T细胞活化信号转导和TCR-CD3复合体装配的结构基础。推导氨基酸序列分析结果表明,猪与人、鼠、狗、牛和绵羊CD3ε蛋白的氨基酸同源性分别为61.2%、58.7%、58.7%、65.1%和65.6%。  相似文献   

全球气候暖干化对秦岭南北河流径流泥沙的影响研究   总被引：8，自引：12，他引：8  

查小春 《干旱区研究》2002,19(3):62-66

以秦岭南侧汉江和北侧渭河多年的径流泥沙观测资料，分析了全球气候暖干化对秦岭南北径流泥沙的变化。分析指出在80年代后，由于全球气候变化的影响，秦岭南北河流年均径流量均减少，与1935－1980年相比，汉江河流年均径流量减少1.9%，渭河河流年均径流量减少27.4%；同时汉江河流泥沙含量明显减少，但渭河河流泥沙含量呈增加趋势，是汉江河流泥沙含量133倍，表明了秦岭南北两侧在全球气候暖干化表现出明显的区域响应性。  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒缺失变异株的基因组特征   总被引：51，自引：1，他引：51  

高志强  郭鑫  杨汉春  陈艳红  查振林 《畜牧兽医学报》2005,36(6):578-584

对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)分离株HB2(sh)／2002的全基因组序列进行了测定与分析。该毒株基因组全长为15373nt(不包括PolyA尾)，与国内外美洲型PRRSV分离株全序列相似性介于88．7％～95．1％之间。序列分析表明，该毒株是1个天然存在缺失的变异毒株，其ORFla的Nsp2存在编码12个氨基酸的连续36个核苷酸的缺失，ORF、3存在编码1个氨基酸的3个核苷酸的缺失。这是国内外首次发现PRRSV存在缺失变异现象，研究结果补充和丰富了PRRSV毒株的基因组信息数据，为深入研究该毒株的遗传与变异及其与生物学特性的关系奠定了基础。  相似文献   

安徽省发展大径级材森林资源的思考     

查朝生 《林业资源管理》2015,(1):27-30

珍贵大径级材是我国重要的战略资源。探讨了珍贵大径级材在安徽省培育的意义及有利条件等,并提出了相应的政策措施和技术路线。  相似文献   

基于EST-SSR和SNP标记的大麦麦芽纯度检测   总被引：3，自引：0，他引：3  

张利莎  董国清  扎桑  卓嘎  王德良  谷方红  袁兴淼  张京  郭刚刚 《作物学报》2015,41(8):1147-1154

大麦麦芽作为啤酒酿造的主要原料之一,其纯度决定了麦芽原料的均一性,进而影响加工工艺和啤酒品质。为高效准确地鉴定麦芽纯度,在啤酒企业进行麦芽原料采购和质量监测时提供参考依据。本研究分别利用EST-SSR和SNP标记定性检测了按比例预混的麦芽样品纯度,并利用SNP标记定量检测了4份送检的麦芽盲样纯度。结果表明,EST-SSR标记能定性检测混杂度高于10%的麦芽样品,而SNP标记能够有效鉴定混杂度低至5%的麦芽样品。SNP标记对纯度定量检测的单次抽样的测定值与真实值之间的误差在3%以内。比较发现,本研究所用的两类分子标记均可用于麦芽样品的纯度检测,但基于KASP技术的SNP标记可以满足麦芽纯度的快速定量检测需要。  相似文献   

茶树新品种--梦茗     

查道生  何汉华 《中国茶叶》2020,(4):16-18

"梦茗"系从安徽省岳西县来榜镇优良地方群体种中采用单株选育法育成的适制绿茶新品种。经安徽省内品比、推广示范和全国区试,发现"梦茗"物候期与福鼎大白茶相当,属早生种。品质优异,全国区试3个点感官审评总分均高于对照;内含物含量高,氨基酸含量4.9%、茶多酚总量26.9%、水浸出物总量40%。产量高,品比试验高于福鼎大白茶26.45%,全国区试产量与对照相当。抗旱能力强,抗寒能力与对照相当。  相似文献   

茄子新品种驻茄15号的选育     

王勇  姜俊  赵红星  李艳  吴雪霞  查丁石 《中国蔬菜》1981,1(9):82-84

驻茄15 号是以自交系P04-11 为母本，以高代自交系驻Q-25 为父本配制而成的中早熟绿茄一代杂种。植株生长势强，果实卵圆形，纵径15.0 cm 左右，横径10.6 cm 左右，平均单果质量0.52 kg，果皮绿色、光亮，肉质硬度中等，商品性好，一般每667 m² 前期产量1 100 kg 左右，总产量5 300 kg 左右，田间对青枯病、绵疫病、黄萎病的抗性强于对照郑研早青茄，适宜河南省及周边省份春、秋设施及露地栽培。  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白Nsp9基因的克隆与原核表达   总被引：2，自引：0，他引：2  

沈张奇  郭鑫  杨汉春  盖新娜  陈艳红  查振林 《中国兽医杂志》2007,43(10):3-5

通过PCR方法从重组质粒pSK-B2扩增得到非结构蛋白Nsp9的基因片段。将基因克隆至原核表达载体pET-28a( ),得到重组表达载体pET-28-Nsp9,转化Escherichia coliBL21(DE3)细胞。经IPTG诱导,Nsp9蛋白以包涵体形式表达,SDS-PAGE分析表明重组蛋白的分子量约为27.3 kD,表达量占菌体蛋白的43.2%。Western-Blotting结果表明重组蛋白可被PRRSV阳性血清所识别。表达的重组蛋白为进一步研究PRRSV的免疫特性和分子生物学功能奠定了基础。  相似文献   

鼠防御素cryptdin 4基因在杆状病毒中的表达及活性     

王尚荣  陈宝玉  刘勇军  查云峰  宋斯伟  刘立国  邓旭明  宋德光 《中国兽医学报》2007,27(4):540-544

以防御素cryptdin4为研究对象，在昆虫一杆状病毒表达系统对cryptdin4基因的成熟肽片段进行表达。通过SDS—PAGE电泳和Western—blot检测，结果发现在相对分子质量8000处出现目的蛋白条带，表明该基因在杆状病毒中获得表达；体外抑菌试验结果显示，目的蛋白具有明显的抗金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌、李斯特菌等指示菌的活性。  相似文献