鸵鸟禽副粘病毒Ⅱ型抗体阳性的检出     

徐彪  梁成珠  马丰忠  朱来华  吴德茂 《中国进出境动植检》1997,(1)

１９９５～１９９６年对从津巴布韦、美国、荷兰引进的５批共３０９头鸵鸟进行了检疫：颈静脉采血，分离血清，进行禽副粘病毒Ⅱ型的血凝抑制试验，共检出禽副粘病毒Ⅱ型阳性８头，阳性率为２．６％。然后将阳性血清于５６℃灭活３０ｍｉｎ，平行做血凝抑制试验，结果发现１份血清中抗体下降，１份完全消失，其余不变。将７份血清中加入等量的红血球于室温下感作１ｈ，其抗体滴度全部升高且均达到阳性标准。  相似文献   

实时定量PCR技术及其在水生动物研究中的应用     

周优  岳志芹  孙敏  梁成珠  刘荭  邓明俊  汪东风 《中国水产科学》2007,14(Z1)

多聚酶链反应(PCR)研究与应用的飞速发展使其成为分子生物学实验室重要的工具,实时定量PCR(Real-time quantitative PCR)技术是20世纪90年代中期发展起来的一种新型核酸定量技术,该技术以其特异性强、灵敏度高、速度快、污染少等优点,促进了PCR技术的发展.实时定量PCR技术在水生动物研究中有着广泛的应用,目前主要集中在病原体检测、定量分析以及基因表达差异等方面.本文对实时定量PCR技术的原理、特点及5种主要的荧光化学作一介绍,对其目前在水生动物研究中的应用进行了概述,并探讨了该技术存在的问题和应用前景.  相似文献   

非洲马瘟VP7蛋白多克隆抗体的制备及IgM捕获ELISA检测方法的建立     

郑小龙  朱来华  王群  艾军  邓明俊  肖西志  梁成珠  姜帆  于业锋 《中国动物检疫》2014,31(5):70-73

  相似文献   

对虾桃拉综合征(Taura syndrome,TS)传入我国的初步风险分析     

雷质文  黄捷  梁成珠  江育林 《中国动物检疫》2002,19(3):43-45

自1993年以来,我国沿海地区养殖的日本对虾(Marsupenaeus japonicus)、中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)、斑节对虾(Penaeus monodon)、长毛对虾(Fenneropenaeuspenicillatus)、脊尾白虾(Palaemo(Exopalaemon)carinicaula Holthuis)等经济养殖对虾因患白斑综合征(white spot syndrome,WSS)而大面积死亡,造成很大的损失.养殖品种结构调整是减轻WSS危害的重要手段之一.  相似文献   

黄曲霉毒素的检测技术及预防措施   总被引：1，自引：0，他引：1  

曲秋颖  鲍蕾  石媛嫄  梁成珠  王雄 《农产品加工．学刊》2011,(8):85-89

黄曲霉毒素是危害较大的毒素之一,给食品、饲料和畜牧等行业造成了极大的损失。由于它的强致病性及强致癌性,很早就受到了广大科学家及国际粮农组织的广泛关注。针对黄曲霉毒素的众多检测技术进行了归纳和总结,并比较了优缺点,为更好的检测黄曲霉毒素提供了理论依据。针对黄曲霉毒素的高度毒性,提出防治措施,以期保护公众健康、减少经济损失。  相似文献   

基因芯片技术检测5种马病毒   总被引：8，自引：0，他引：8  

朱来华  梁成珠  陆承平  吴华  杨元杰  马丰忠  王树峰  于红光 《农业生物技术学报》2006,14(2):203-207,i0002

通过分子克隆技术获得马疱疹病毒1型(Equineherpesvirus1,EHV1)、马动脉炎病毒(Equinearteritisvirus,EAV)、马流感病毒(Equineinfluenzavirus,EIV)、马传染性贫血病毒(Equineinfectiousanaemiavirus,EIAV)和东部马脑脊髓炎病毒(East-ernequineencephalomyelitisvirus,EEEV)等5种病毒各一段高度保守的特异性基因片段,用芯片点样仪逐点分配到处理过的玻片上,制备成检测芯片。提取样品中的RNA,进行反转录和荧光标记后滴加到芯片上进行特异性杂交,对杂交结果进行扫描检测和计算机软件分析。结果显示,制备的基因芯片可同时检测和鉴别上述5种病毒,可检测到阳性杂交信号的最高稀释度为10-6的病毒液,约25个病毒DNA拷贝,但其它病毒材料未见红色荧光信号,证明了本方法的特异性。在进口马的隔离检疫期间,采集马鼻肺炎、马动脉炎中和抗体阳性但病毒分离阴性马匹的白细胞悬液,分别在EHV1和EAV位点处可检测到阳性杂交信号。证明基因芯片技术不但快速、准确和敏感,而且可同时进行多种病毒的检测。  相似文献   

25个酿酒葡萄品种DNA指纹鉴定     

孙明君  汪东风  高宏伟  梁成珠 《植物检疫》2018,(1)

以取自华东酒庄、烟台酒堡、宁夏葡萄园的25个葡萄(Vitis vinifera)品种为试材,对葡萄叶片进行DNA提取,选用4对核心引物进行PCR扩增,扩增产物进行毛细管电泳,所得微卫星等位基因数据与瑞士葡萄数据库进行比对,来鉴定25个葡萄品种。结果表明:利用4对基本核心引物对位于不同染色体上的SSR位点进行PCR扩增,对扩增产物进行拼接,通过得到的微卫星等位基因与葡萄数据库进行比对,可以准确鉴别19个酿酒葡萄品种,其他6个品种的3对引物得到的微卫星数据与数据库一致,其品种的鉴定需进一步实验确定。  相似文献   

PCR结合变性高效液相色谱法与荧光定量PCR法在检测禽白血病中的比较与应用     

孙涛  张太翔  徐彪  梁成珠  朱来华  岳志芹 《中国畜牧兽医》2011,38(11):157-162

本研究旨在比较PCR结合变性高效液相色谱技术(PCR-DHPLC)与荧光定量PCR(Real-time PCR)两种方法在检测禽白血病中的应用。根据禽白血病pol基因序列,设计1对引物和1条探针,利用引物进行禽白血病模板的RT-PCR扩增,产物经变性高效液相色谱上样处理;利用引物及探针进行荧光定量PCR扩增,结果与PCR-DHPLC进行比对。两种方法同时用正常鸡胚尿囊液、鸭瘟病毒、传染性支气管炎病毒、鹅细小病毒、H5N1亚型禽流感病毒、新城疫病毒、传染性法氏囊病毒、减蛋综合症病毒做特异性检测;以稀释成不同梯度的AV228毒株核酸做敏感性检测。试验结果表明PCR-DHPLC方法只对禽白血病病原有阳性扩增的吸收峰,Real-time PCR也只对禽白血病病原有阳性扩增,两法均对其他禽源病毒核酸无特异性扩增;PCR-DHPLC与Real-time PCR法相比,灵敏度虽低于Real-time PCR 1个数量级,但检测限仍可达到3 pg核酸模板。两种方法均能检测到感染鸡的泄殖腔拭子所采集的病毒量。采集120份蛋鸡棉拭子同时进行临床检测,两种方法检测ALV的符合率为100%(15/120)。研究表明两种方法均可用于诊断禽白血病病毒。  相似文献   

牙鲆弹状病毒环介导等温扩增检测方法的建立与应用     

孙颖杰  岳志芹  刘荭  赵玉然  史秀杰  梁成珠  吴斌  李叶  王哲 《华中农业大学学报》2010,29(2):203-207

建立了牙鲆弹状病毒的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法,首先根据牙鲆弹状病毒的糖蛋白的基因保守序列,利用Primer Explorer V3软件设计了6条引物,并对LAMP反应温度和反应时间等条件进行了优化。该方法的检测限为30fgRNA,比常规RT-PCR灵敏度高100倍,与鲤春血症病毒、传染性胰脏坏死病毒、传染性造血器官坏死病毒、海洋双RNA病毒、病毒性出血败血症病毒以及病毒性神经坏死病毒等没有交叉反应。该方法检测时间短,在1h内即可完成检测。用建立的LAMP方法对临床鱼样进行了检测,结果表明40尾石鲽鱼样品中有3尾感染HRV,与病毒分离结果一致,说明LAMP方法比较适合牙鲆弹状病毒的早期及现场诊断。  相似文献   

对虾白斑综合症病毒变性高效液相色谱检测方法的建立与应用     

赵巍  马亚  赵玉然  杨大伟  梁成珠  刘荭  何俊强  史秀杰  岳志芹 《中国动物检疫》2011,28(5):47-50

据对虾白斑综合症病毒(WSSV)的基因保守序列,使用Primer Explorer V3软件设计了2条引物,利用PCR的扩增产物,结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术,建立了一种对虾白斑综合症病毒的DHPLC快速检测方法。该检测方法特异性好,与传染性皮下和造血器官坏死病毒、斑节对虾杆状病毒、肝胰腺细小病毒、对虾杆状病毒以及对虾基因组DNA无交叉反应;检测灵敏度较高,约为10-5ng/μL,高于常规PCR及荧光定量PCR的灵敏度。用建立的DHPLC方法对100尾对虾样品进行了临床检测,结果与荧光定量PCR检测结果一致。WSSV的DHPLC检测方法,特异性强、灵敏度高,是对WSSV进行有效检测的一种新方法。  相似文献