应用SYBR Green I的Real-time PCR方法定量检测空肠弯曲杆菌   总被引：2，自引：0，他引：2  

阳成波  蒋原  黄克和  祝长青 《动物医学进展》2003,24(1):74-78

空肠弯曲杆菌(Campylobacterjejuni)被认为是人类主要食源性病原菌之一。由于空肠弯曲杆菌特殊的生长条件和容易进入不可培养但存活的状态(Viablebutnonculturable,VNC),所以传统的生化鉴定结果不一定可靠,并且是一项费时而繁琐的工作。核酸检测方法的出现为空肠弯曲杆菌的检测带来了方便。本文基于LightCycler为平台,利用SYBRGreenI染料能特异与双链DNA结合而发荧光的特性,建立一种Real-timePCR方法来定量检测空肠弯曲杆菌。用该方法检测时,发现所有空肠弯曲杆菌(11株)都呈阳性,所有其它弯曲菌(3株)和其它菌株(5株)都是阴性。整个检测过程60min内可以完成,检测限度为5CFU,标准曲线的相关系数为1。结果表明基于SYBRGreenI的定量PCR方法既为空肠弯曲杆菌提供了一种特异、敏感、快速和简洁的定量检测方法,又为研究空肠弯曲杆菌致病机理提供了一种重要方法。  相似文献   

鸭瘟病毒的PCR检测及其产物分析   总被引：6，自引：0，他引：6  

陈建君  张毓金  杨增岐  宋长绪 《动物医学进展》2003,24(5):71-73

根据基因库中已有的鸭瘟 Ul6的序列 ,合成一对引物 ,对 3株鸭瘟病毒进行 PCR扩增 ,均扩增出大小约 42 0 bp的特异性片段。进行测序 ,结果表明 3个毒株扩增后的片段均为 42 1bp。经重复实验后确定最佳反应条件 ,按该条件对两例临床病料进行检测 ,结果均出现大小约为 42 0 bp的特异片段。PCR产物与 L ake Andes株的相关序列比较 ,广东毒株与 L ake Andes株同源性较高  相似文献   

表达HAV结构基因的重组腺病毒鉴定及细胞病变分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

李嘉琦  吴娟  孙茂盛  戴长柏 《动物医学进展》2003,24(2):68-71

利用RT-PCR方法,从HAV-L8株的RNA中扩增出结构基因(vp3 vp1),克隆到穿梭质粒pXCX2NotI上。采用磷酸钙-DNA共沉淀技术,将腺病毒载体pJM17与pXCX2-CMV-HAV共转染293细胞。在光学显微镜下观察到明显的细胞病变(CPE);经RT-PCR、免疫荧光染色和蛋白印迹鉴定证明HAV的结构基因已插入到腺病毒基因组中;在电子显微镜下观察发现有二十面体的病毒颗粒。以上结果表明获得了重组腺病毒rAdHAV,纯化后的rAdHAV滴度为1×109.0TCID50/mL。  相似文献   

山区农业面源污染的防治途径及对策     

喻尚其刘光德  李其林赵中金 《四川畜牧兽医学院学报》2005,3(4):1-4

结合重庆市地形地貌特点和山区农业面源污染发生的因子，提出山区农业面源污染的防治对策。一方面必需结合当地的自然环境条件和经济发展水平提出农业面源污染的防治规划；另一方面必需结合生态农业建设这一主线，使物质、能量在生态系统内良性循环。紧紧抓住产生农业面源污染源的因子——化肥、农药、农田秸杆、畜禽粪便、农村生活废物等，提出科学的防治和减少途径。  相似文献   

姬松茸与双孢蘑菇不同菌株的RAPD扩增研究   总被引：6，自引：1，他引：6  

李三暑  林新坚  陈惠成  雷锦桂  林勇  江枝和 《食用菌学报》2002,9(3):1-4

以4个姬松茸菌株和2个双孢蘑菇菌株为材料，用20个随机引物对它们进行RAPD扩增，通过对供试菌株遗传相似系数的估算和系统聚类分析，构建姬松茸和双孢蘑菇遗传相关树状聚类图谱，结果表明，进行RAPD扩增的20个随机引物中，有12个能产生三种带型，当遗传相似系数升至0.8713时，这6个菌株被分为3类，第一类为菌株18和26，第二类为菌株13和12，第三类为菌株33和45。  相似文献   

一个马铃薯Y病毒山东分离物的分离与鉴定   总被引：4，自引：1，他引：4  

王秀芳  朱常香  温孚江  竺晓平  郭兴启 《植物病理学报》2003,33(3):203-208

 从具有典型花叶症状的马铃薯叶片中分离到马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)(本文称PVY-SD-TA分离物),扩繁后,提纯病毒,电镜下可观察到700~900 nm×11 nm的病毒粒体,病组织超薄切片观察可见风轮状的内含体结构,寄主反应特性研究表明其能侵染2科13种植物。SDS-PAGE电泳检测病毒编码的外壳蛋白亚基的分子量为33 kDa。以PVY-SD-TA基因组RNA为模板,应用RT-PCR方法和特异引物合成了外壳蛋白基因。对cDNA全序列分析表明,PVY-SD-TA CP基因核苷酸序列与N株系的同源性为96%,与GenBank中登录序列号为AJ390306的O株系分离物的同源性最高,为99%;与国内不同学者报道的PVY中国流行株的同源性分别为96%,97%和98%。通过以上生物学特性和分子水平的研究将PVY-SD-TA鉴定为普通株系(PVY^O株系)。  相似文献   

桃树根癌病防治技术探讨   总被引：8，自引：0，他引：8  

罗维德  杨金兰  杨永启 《中国植保导刊》2004,24(3):13-17

桃树根癌病是公认最难防治的土传细菌病害之一。在对该病进行较系统研究的基础上,采用多种抗菌药剂、多种方法进行了室内、外药敏测定与防治试验,显示出异菌氰、次氯酸钠、乙蒜素、妥布霉素、环丙沙星、庆大霉素及其混用对防治桃树根癌病菌有明显防效。  相似文献   

茶传记拟人化艺术和茶语模因的变异表征     

姜欣  黄荷 《农业考古》2020,(2):162-166

茶传记的发展历经了唐、宋、元、明四个朝代,是中国茶典籍的重要组成部分,蕴含着大量独特的茶语模因。在拟人化艺术的加持下,语言模因与其他强势因子相结合,构建出新的模因复合体,在变异的同时既保留了元模因的重要特质,又发展了深层蕴义,使模因产生了更强的生命力。本文以四篇最著名的茶传记:《叶嘉传》《清苦先生传》《味苦居士传》《六安州茶居士传》为评议对象,从名号中的茶称化用表征、形象中的茶质移就表征、叙事中的茶性借代表征三个方面,分析拟人化艺术如何增强语言模因的感染力和表征力。  相似文献   

2020年农机行业的主旋律     

柳琪 《当代农机》2020,(1):40-42

过去的一年,有人说是行业的拐点,有人说是新的机遇之年,也有人说行业迎来了至暗时刻,虽然“仁者见仁,智者见智”,但企业的日子不好过是肯定的。凡是过往,皆是序章!2020已经到来,在接下来的一年,农机行业的“灰犀牛”是什么呢?(“灰犀牛”是与“黑天鹅”相互补足的概念,“灰犀牛事件”是太过常见以至于人们并不在意的事情,但是往往会影响行业的走向或企业的生存,在这里的“灰犀牛”就是行业的主旋律。)虽然我们将面临着更多的风险和不确定性,但是总会有一些“灰犀牛”是确定的,以确定应对不确定才能在未来更加从容。本文分析的就是2020年农机行业的主旋律。  相似文献   

水稻小粒密穗突变体sep1的遗传分析、基因定位与育种利用     

王跃星  吴昆  方云霞  陈红旗  倪深  付向东  朱旭东 《中国水稻科学》2014,28(3):229-234

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