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利用昆虫杆状病毒表达系统表达水貂肠炎病毒(mink enteritis virus,MEV) VP2 基因,表达的蛋白能够形成病毒样粒子,具有反应原性,为研究MEV新型疫苗奠定基础。采用PCR方法扩增MEV VP2 基因,将PCR产物连接到pMD18-T载体,目的基因定向克隆到pFast-BacⅠ载体中,构建重组转座载体后转化DH10 Bac感受态细胞,获得重组Bacmid 质粒后转染Sf9昆虫细胞,传毒3代,对表达蛋白进行 Western blotting鉴定。结果成功克隆MEV VP2基因。Western blotting结果证实,表达蛋白能够被MEV单克隆抗体识别。在 Bac-To-Bac 杆状病毒表达系统中成功的表达了MEV VP2蛋白,目的蛋白具有较好的反应原性。 相似文献
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2013～2016年山东省、河北省、黑龙江省、吉林省的部分水貂养殖场发生了严重的水貂出血性肺炎,导致水貂大量死亡,为了客观评估水貂出血性肺炎的危害及为综合防控提供参考依据,试验对423个水貂病例样本进行分离鉴定并且对所分离的细菌进行了形态特征观察[1]、16SrRNA基因测序、血清型鉴定、小鼠毒力试验测定、生化试验及药敏试验测定.结果表明:423个样本中分离到90株绿脓杆菌,其中最为流行的血清型为G型(25株)、B型(21株)、I型(17株)、C、E型及未定型(27株);并筛选出12株菌株对小鼠有很强的毒力性.生化试验结果表明:同一血清型的不同菌株之间也存在明显差异.药敏试验结果表明:12株菌株对强力霉素、林可霉素均耐药;对阿米卡星为敏感;对庆大霉素等4种抗生素均为耐药或介于中间;对环丙沙星等6种抗生素的敏感性不同;对氧氟沙星为敏感或介于中间. 相似文献
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狐、貉源犬瘟热病毒H和F基因的克隆与序列分析 总被引：1，自引：0，他引：1
为研究我国圈养狐、貉流行犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)的基因分型与遗传变异情况,通过RT - PCR方法扩增与测序分析了2009年来源于山东省和河北省病料中的CDVH与F基因,并分别与GenBank CDV野毒株和疫苗株的基因序列比对,构建了核苷酸序列的系统发生树.H基因系统发生分析显示,6株毒株归属为Asia -1型.H蛋白氨基酸序列比较表明,除HeB(09)3株有8个潜在N-连接的糖基化位点外,其余毒株N-连接的糖基化位点均为9个.以往的研究结果显示,日本和中国台湾分离株的潜在N-连接糖基化位点为8～9个.6株野毒F蛋白编码区氨基酸的同源性为98.0％～99.5％,与CDV3(登录号EU726268)和Onderstepoort(登录号AF305419)疫苗株的同源性为89.1％～90.6％,F蛋白的前导区(1～ 135位氨基酸)与疫苗株相比的同源性为62.2％～66.7％;野毒株F蛋白氨基酸在108～ 110处比疫苗株CDV3多1个潜在N-连接的糖基化位点,HeB(09)3的F蛋白还在366～369位多1个潜在的N-连接的糖基化位点.目前在山东省和河北省2地狐狸和貉中流行的犬瘟热野毒株为Asia -1型,HeB(09)3株H蛋白和F蛋白在N-连接糖基化方面与其他5株野毒株有明显的不同. 相似文献
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通过羧甲基纤维素钠琼脂平板培养基结合刚果红染色法,从14个样品中筛选出11株具有较好降解纤维素能力的菌株,它们都能利用羧甲基纤维素作为生长碳源.将菌株分别接种在以桑树枝条粉末为主要碳源的固体复筛培养基上,11株菌株均能够生长,但0-18、9-9、13 -2、13 -3和12 -1生长缓慢,其余6株生长良好.将生长良好的6株菌株接种在液态复筛培养基上,30℃恒温培养发酵,7d后测定发酵液中纤维素酶活,结果显示7-7、0 -8和0 - 10具有较高的产纤维素酶能力,其中7-7和0-8菌株具有较高的产滤纸酶和羧甲基纤维素酶活力,0-8和0 - 10表现出较高的产β-葡萄糖苷酶活力.这3株菌株均为酸性菌,最适生长pH值为5～7,0-8和0- 10号菌株最适生长温度在32℃,而7-7号菌株最适生长温度在30 ～32℃. 相似文献
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近年来,随着水貂养殖行业的不断发展,一些疫病也成为了制约水貂养殖业发展的重要因素。水貂阿留申病作为毛皮动物的三大疫病之一(阿留申病、犬瘟热、病毒性肠炎),是导致母貂产仔率下降、公貂配种能力降低和毛皮质量下降的一种高度接触性传染病。至今为止,还没有商品化的疫苗来控制该病的传播及蔓延。控制水貂阿留申病最好的方法是通过检测淘汰所有抗体为阳性的水貂,进而达到净化貂群的目的。而在抗体检测过程中,诊断抗原的制备和纯化决定着检测方法的敏感性、特异性和准确性。论文对目前阿留申病毒细胞抗原及基因工程抗原研究进展做一综述,为今后该病病原检测工作提供参考。 相似文献
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