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1.
猪胚胎多能性干细胞的分离培养 总被引:3,自引:0,他引:3
收集妊娠26.0~29.0d的猪胚胎,分离培养原始生殖细胞(PGCs),在STO细胞饲养层上生长,形成了多能性干细胞(EG)。发现其具有干细胞的显著特性,并能在体外定向分化为神经细胞、上皮细胞和胚泡细胞。试验使用A、B、C3种不同的培养基培养PGCs,结果在形成EG细胞集落的数量和EG细胞分化上有着明显的差距,说明血清的质量和浓度以及细胞因子对干细胞的生成和增殖有着重要的影响。 相似文献
2.
猪原始生殖嵴细胞(PGCs)建系因素的研究 总被引:4,自引:3,他引:4
从五指山猪(WSZP)近交系第8~13代培育群中,先后选用21头5~10月龄青年母猪,分别于授精后25~30d采集胎儿106个,进行原始生殖嵴(PGCs)细胞分离、培养等建系技术研究。以DMEM F10(1:1)为基础培养液,按添加或不添加生长因子,将培养液分为A、B、C3种,并以STO细胞作饲养层,在38℃、5.0%CO2和湿润的气相中进行培养建系。结果获得胚胎生殖嵴细胞(EG)细胞系6个细胞株,其中1个EG细胞株传至11代、2个传至5代、1个传至4代、2个传至3代冻存。并进行了AKP染色、体外分化、冷冻-解冻复苏和嵌合体制作等鉴定研究。研究发现:不同胚龄对EG细胞建系具有一定影响,不同培养液对EG细胞建系效果不同,STO细胞饲养层的质量是建株、传代、冷冻-解冻复苏的关键因素之一。EG细胞系的初步建立,为今后筛选进入种系的EG细胞系、实施体外基因操作提供了可能。 相似文献
3.
小型猪近交系新品种的培育与开发利用 总被引:1,自引:0,他引:1
小型猪近交系是中国农业科学院北京畜牧兽医研究所以2头五指山猪(Sus scrofa)为系祖,历时15年,采用“近亲交配”、提高营养水平、同期发情以及笼架等饲养技术,逐步克服后代畸形率高、弱仔率高、成活率低等3大阶段性难题,育成国际上首个近交系猪.本文介绍小型猪近交系的培育过程、近交系研究鉴定、新遗传资源种质特性,以及开发利用.该研究成果填补了国内外近交系猪的研究空白,为大型哺乳近交系动物培育理论和应用研究提供了新的视角. 相似文献
4.
作者综述了制备富含ω-3多不饱和脂肪酸克隆猪的研究意义和国内外的研究现状,并介绍了自己的研究进展。用化学合成的方法获得了C briggsae的ω-3脂肪酸去饱和酶基因sFat-1,并构建了哺乳动物细胞表达载体。通过显微注射的方法制备了转基因小鼠,sFat-1基因能够在转基因小鼠中产生更多更长链的而且更有价值的DHA以及DPA。在确认sFat-1基因功能的基础上,将载体转染到猪胎儿成纤维细胞,利用阳性的细胞克隆通过核移植方式制备富含ω-3多不饱和脂肪酸克隆猪。 相似文献
5.
生长因子EGF、bFGF对猪孤雌胚体外发育的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
在胚胎发育的不同阶段,分别在培养基中添加EGF和bFGF,研究EGF和bFGF对猪孤雌胚体外发育的作用。结果表明:在1细胞阶段添加EGF或bFGF,添加EGF能够显著提高孤雌胚的卵裂率(P〈0.05);2~4细胞阶段添加EGF和bFGF,添加EGF组和添加bFGF组的囊胚率都显著高于对照组(P〈0.05),而添加bFGF组的囊胚率和囊胚细胞数都略高于对照组和添加EGF组。说明EGF和bFGF有利于猪孤雌胚的体外发育,而且,bF-GF能够通过提高囊胚细胞数而提高猪孤雌胚的质量。 相似文献
6.
7.
8.
【目的】为探讨五指山小型猪(WZSP)近交系群体中SLAⅠ3 (SLA-3) 位点等位基因分布结构及其特性。【方法】利用4对引物,采用RT-PCR扩增了32头WZSP SLA-3基因部分外显子1、外显子2和大部分外显子3序列。根据家系和扩增结果,选择8头个体的PCR产物克隆测序。【结果】获得9个不同的核苷酸序列。与GenBank中所用SLA-3基因的核苷酸序列及其编码的氨基酸序列进行比较分析,确定这9个序列均为SLA-3位点上的新等位基因,但这些等位基因间核苷酸变异很少;氨基酸序列比较发现猪和人之间有很高的保守性。同时,构建了23个SLA-3的等位基因和1个HLA-A等位基因核苷酸序列的系统树。【结论】WZSP在SLA-3位点和其它猪品种有明显的差异,拥有其独特的遗传资源。从分子水平为WZSP SLA-3基因的分子分型及特异单倍体猪的培育和异种器官移植实验用动物的研究提供理论依据。 相似文献
9.
10.
系统地掌握猪早期胚胎体内外发育规律是进行猪胚胎冷冻、胚胎分割、鲜胚移值、长途运输引种以及基因转移等生物技术研究和应用的基础。本研究包括2个实验,实验1,利用89头超排母猪和19头自然发情母猪,于配种后第2、3、4、5、6、7、8、9和10天手术采得胚胎1612枚,系统地观察猪早期胚胎体内发育规律,即:2日龄胚胎中原核胚占77.39%(397/513),3日龄胚胎中4和6细胞胚占79.05%(83/105),4日龄胚胎中4~8细胞占40%(35/76),5日龄胚胎多为桑椹和囊胚83.12%(64/77),6日龄胚多为膨胀囊胚42.09%(181/430)和孵化囊胚34.19%(147/430),7和8、9、10日龄胚发育到孵化囊胚分别为76.34/oo(71/93)和100%(77/77),而自然发情的5日龄胚胎中桑椹和囊胚仅占32.5%(13/40),6日龄胚胎中膨胀囊胚仅占11.11%(17/153),孵化胚仅占19.61%(30/153)。各发育阶段的胚胎比例均明显低于5、6日龄超排供体(P<0.05)。实地2,将138枚囊胚和膨胀囊胚,分别体外培养24和12小时,囊胚发育阶段的胚胎50%(48/96)? 相似文献