实时定量PCR测定爱德华氏菌隐蔽质粒的拷贝数     

付立霞  高雯  韩先干  高波  张晓君  刘晓丹  曾令兵 《淡水渔业》2018,(4)

为测定爱德华氏菌(Edwardsiella ictaluri)隐蔽质粒的拷贝数,并探究不同基因组制备方式及定量策略对质粒拷贝数测定的影响,分别采用试剂盒和水煮法制备爱德华氏菌基因组,通过绝对定量和相对定量PCR测定两种不同总DNA制备方式下的隐蔽质粒拷贝数,同时测定试剂盒对染色体DNA和质粒DNA的回收率。结果显示,以试剂盒提取的总DNA测得的pEI1和p EI2拷贝数绝对定量和相对定量分别为3.63±0.30、5.04±0.18和4.22±0.15、5.13±0.50,显著低于以水煮法测得的pEI1和p EI2拷贝数的绝对定量11.84±0.80、11.70±0.25和相对定量13.85±1.64、11.90±0.97。回收率结果显示,试剂盒对染色体DNA的回收率(45.8±4.1)%,显著高于对质粒pEII的回收率(25.1±0.5)%和pEI2的回收率(31.3±1.7)%。结果表明:通过实时定量PCR测定爱德华氏菌隐蔽质粒的拷贝数时,基因组的制备以水煮法为宜,爱德华氏菌隐蔽质粒pEI1和pEI2均属于中拷贝质粒。  相似文献   

湖北荆门市发生一起新的鲢鳙鱼疾病     

曾令兵 《科学养鱼》2010,(4)

<正>2010年1月8日,病毒病防控岗位专家曾令兵研究员与团队成员共7人前往荆门五里铺镇农山水库进行鲢鳙鱼疾病的现场诊断与应急服务工作。据患病鱼塘养殖户常士勇介绍,其有一5000米2左右、水深  相似文献   

推广免疫预防　促进水产发展     

曾令兵  贺路  何介华 《科学养鱼》1997,(12)

所谓免疫，就是指在病原微生物侵入生物体的过程中，生物体动员自身的防御力量阻止病原体的人侵、生长、繁殖，控制其传播，解除病原体毒害的过程。免疫预防，就是人为地将已灭活而未损害其抗原性的疫（菌）苗或弱毒化的疫（菌）苗等生物制剂接种生物体内，使之在体内产生一系列的反应，以预防和抵抗相对应的病原微生物的感染。采取免疫的方法预防和控制鱼类病害的发生和流行具有十分重要的意义，主要表现在以下几个方面。①免疫预防对于培养养殖对象的免疫品种和抗病个体具有重要意义，筛选有免疫保护力的个体，培育成抗病力强的群体是控制…  相似文献   

草鱼出血病细胞培养灭活疫苗研究初步报告   总被引：2，自引：0，他引：2  

杨先乐杜森英  曾令兵钱华鑫 左文功 《淡水渔业》1986,(3):1-5

<正> 草鱼出血病是一种危害草鱼的严重疾病。长期以来,因对该病缺乏有效的防治方法,而使草鱼的成活受到很大的威胁。草鱼出血病组织浆灭活疫苗,虽然在预防该病上有些成效,但其预防效果不稳定,广泛地推广和应用亦有一定的困难。  相似文献   

草鱼细胞和病毒的大规模培养研究     

曾令兵  高梦雪 《淡水渔业》1995,25(6):6-9

本文对草鱼细胞和病毒的两种大规模培养方式进行了研究和比较。静置培养条件下，细胞生长速度快，２—３天内可形成单层，单层均匀而稳定；旋转培养条件下，细胞７天左右长成单层，细胞单层面积大，病毒培养产量高。这两种培养方式所观察到的细胞病变过程及表征基本相同，病毒的ＴＣＩＤ５０／ｍｌ值稳定在６．０左右。采用这两种培养方式，可实现草鱼细胞和病毒的大规模培养。  相似文献   

白鲢暴发病菌苗的制备及免疫效果分析     

曾令兵  蒋勇华 《水产科技情报》1995,22(5):199-203

在３２℃下对嗜水气单胸菌Ｈ２０株作振荡培养，１％福尔马林、６０℃灭活１ｈｒ．，制备白鲢暴发病菌苗。用该菌苗免疫白鲢，１８－２０℃水温下饲养１０天后，白鲢血清中凝集抗体效价达１：１１２８左右，未免疫对照组凝集抗体效价约为１：８。免疫鱼的抗感染保护力达８０％。  相似文献   

当前大宗淡水鱼类病害防治存在的主要问题     

曾令兵 《科学养鱼》2009,(10)

进入6月以来,因天气变化剧烈或持续高温,湖北、湖南等地养殖的大宗淡水鱼类普遍发病,死亡严重。体系病毒病防控岗位专家组织了本岗位和长江所知名水产养殖专家等80多人次,开展疫病防控应急处理、各种技术讲座、现场咨询与讲解,非常有效地解决了养殖生产实践中的病害问题,受到养殖户或渔民的极大欢迎,充分发挥了技术支撑产业发展的作用。  相似文献   

祁连山中段青海云杉高山林线交错区树轮宽度与气候变化的关系   总被引：2，自引：2，他引：0  

曾令兵  王襄平  常锦峰  林鑫  吴玉莲  尹伟伦 《北京林业大学学报》2012,34(5):50-56

通过对祁连山中段青海云杉高山林线交错区进行取样,研究了交错区内4个不同海拔树木生长与气候变化的关系。结果表明:在林线交错区内,树木生长对气候变化的敏感性不高,年表统计特征沿海拔并没有一致的变化趋势。气候对树木生长的影响表现出非常明显的“生长滞后效应”,所有样地的轮宽指数与上一年10月的降水显著正相关,多数样地的轮宽指数与上一年7、8月的温度显著负相关,后者体现了有效水分供应的限制作用。同时,多数样地的轮宽指数与当年2月降水显著负相关。整个林线交错区的树轮生长主要受生长季之前(上一生长季和秋冬季)的气候指标的影响,而与当年生长季气候没有明显的联系。本文和相关研究发现的林线树木生长对气候变化并不敏感的现象,与高山林线主要受生长季温度限制的传统认识明显不同。   相似文献   

草鱼呼肠孤病毒VP6蛋白与大肠杆菌LTB亚基植物融合表达载体的构建   总被引：1，自引：0，他引：1  

周勇  曾令兵  范玉顶  罗晓松  徐进  肖艺 《中国水产科学》2011,18(1):1-7

根据GenBank中草鱼呼肠孤病毒(Grass Carp Reovirus,,CCRV)VP6蛋白的全基因序列(AF403394)和大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)的基因序列(M17874),设计并合成特异性引物,从感染草鱼呼肠孤病毒(GCRV)09草鱼(Ctenopharyngodon idellus),肾细胞...  相似文献   

长江草鱼群体MHC Class ⅡB的多态性和进化分析     

张燕  姚延丹  段辛斌  陈大庆  曾令兵  汪登强 《淡水渔业》2010,40(5)

克隆及测序草鱼(Ctenopharyngodon idella)长江3个群体的主要组织相容性复合体(MHC)Class II B基因编码β1和β2区的第2和第3个外显子及两个外显子之间的内含子,分析了草鱼MHC的进化模式和种群遗传结构。结果显示:实验共定义了34个等位基因,每条序列包括长为130~136 bp的第2个外显子,长为218 bp的第3个外显子以及长81~371 bp的内含子。序列分析揭示,第2个外显子有106个核苷酸变异位点(78%)和40个氨基酸变异位点(88%),而第3个外显子有100个核苷酸变异位点(45%)和41个氨基酸变异位点(56%),β1变异要大于β2区。用β1和β2区序列分别构建的邻接(NJ)系统树均显示5个具有高支持率的谱系,结合序列变异特点和内含子长度,推测草鱼至少存在5个MHC Class II座位。分别计算β1的肽结合位点(PBR)、非肽结合位点及β2的非同义替换率(dN)和同义替换率(dS),PBR的dN/dS为2.03(P<0.05),非肽结合位点和β2则小于1,表明草鱼MHC受到歧化选择作用。根据等位基因在群体中的分布频率作分子方差分析(AMOVA),得出FST为0.37%,提示长江草鱼MHC没有遗传分化。  相似文献