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基于PCV2滚环复制原理,在分析PCV2不同基因亚型代表毒株基因组结构和序列的基础上,设计2对引物用于PCR扩增PCV2基因组序列。以从收集到的疑似PCV2感染的10份猪血清样品中提取的DNA为模板,用设计的引物扩增目的片段,并进行测序分析,1株为PCV2a型,4株为PCV2b型,5株为PCV2d型。每种基因型毒株中各选取一个样本,利用上述2对引物进行PCR扩增,并将扩增产物克隆至pEASY-Blunt simple载体中,通过双酶切连接2个PCR片段,构建含有约1500 bp重叠序列的PCV2基因组的质粒。通过脂质体转染法将含PCV2全基因组的质粒转染至PK-15细胞进行病毒拯救,经PCR和IFA两种方法验证,证明成功拯救出3个基因型的PCV2毒株。通过对PCV2全基因组结构及序列分析,该方法同样适用于PCV2g、PCV2h基因型病毒的感染性克隆构建。本研究建立了一种基于反向遗传学技术的PCV2感染性克隆的构建方法,为开展PCV2的病原学研究提供了技术支持。 相似文献
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一、利用植物种质资源的意义植物种质资源(genetic resources,germoplasm resources),是具有一定遗传物质,表现一定遗传性状的植物资源。从遗传学的角度上看,植物的不同特性都具有其物质基础,都是由“种质”(基因)所决定的。也就是说,每一个“种”,代表着一个特殊的种质资源或种质库,物种一旦消失,就不能复得,植被一旦破坏,就难以恢复。世界上发达国家很早就认识到丰富而优异的植物种质资源,是自然进化和世界人民长期劳动的结晶,是人类赖以生存和维持生态平衡所必须,也是研究引种驯化和其他植物学分支学科的物质基础。因此,他们从种质的角度有目的地搜集和研究这些资源。利用不同的种质进行杂交育种,或 相似文献
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重组病毒活载体疫苗是通过基因工程方法构建的活载体疫苗,规避了传统疫苗的一些缺点,具有极大的优势和应用前景。目前被广泛用作重组病毒载体的动物疱疹病毒有火鸡疱疹病毒(Herpesvirus of turkey, HVT)、伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus, PRV)、鸭瘟病毒(Duck enteritis virus, DEV)、鸡传染性喉气管炎病毒(Infectious laryngotracheitis virus, ILTV)等。对疱疹病毒基因组序列进行分析显示,其基因组大,复制非必需区域多,容纳外源基因的能力强。同时疱疹病毒具有宿主范围广泛、免疫持续期长、安全性较好及相关基因操作技术成熟等优点。笔者总结了当前构建重组动物疱疹病毒的主要方法,包括传统同源重组技术、细菌人工染色体(BAC)技术、Fosmid文库及CRISPR/Cas9基因编辑技术,简述了各个方法的基本原理及技术特点,比较了各个方法的优缺点,并分析了各个方法的最适运用条件,从而更准确地为研究工作提供理论及技术参考;对外源基因的表达方式进行分析,论证了不同启动子对外源基因表达的调控作用不同,同时对不同疱疹... 相似文献
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为了全面掌握聊城地区母驴的繁育状况,该课题对聊城市内21家母驴场进行调查与分析。调查显示聊城各县区母驴规划存栏总量为17331头,母驴实际存栏总量为11467头。繁殖母驴繁育情况为:发情率为81.20%~93.55%,受孕率为52.35%~89.00%,孕后流产率为4.46%~20.98%,出生驴驹死亡率为1.23%~16.02%等。结果显示:聊城地区繁殖母驴的发情率和受孕率偏低,孕后流产率和出生驴驹死亡率偏高。该结果为提高聊城地区繁殖母驴的发情率和受孕率,降低孕后流产率和出生驴驹死亡率提供理论基础。 相似文献
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黄淮海夏玉米花期高温发生特点、危害机理与防控措施综述 总被引：2，自引：0，他引：2
近年来黄淮海平原夏玉米区花期高温频发,常引起玉米花粒现象,严重影响夏玉米籽粒产量和品质。花期高温已成为影响该地区玉米丰产稳产的主要限制因素之一。基于当前研究现状,综述近年来黄淮海地区玉米季气候变化规律及高温热害发生特点;基于源库理论与产量形成特点,进一步分析玉米花期高温危害特点及其影响机理。还从品种选择、种植方式、耕作方式与水肥管理等方面综述当前高温热害的栽培技术防控措施。玉米花期高温发生常伴有干旱特点,加大了危害程度与危害机理研究难度,从而影响对玉米花期高温的有效防控。因此花期高温与干旱叠加危害机理及其防控措施研究将是未来黄淮海地区玉米丰产、稳产的研究重点。 相似文献
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优质丰产抗病甜菜新品种ZD204的选育 总被引：2，自引：2，他引：0
ZD204为德国KWS公司和中国农科院甜菜研究所联合选育的甜菜二倍体多胚杂交种。该品种适应性强，丰产性突出，块根含糖率较高，属标准偏丰产型品种；抗褐斑病，耐丛根病和根腐病；糖汁纯度高，块根品质好，2000－2001年参加国家甜菜新品种区域试验，在全国三大甜菜产区32个试验点（次）平均根产量53724．3kg/hm^2，比对照增产27．9％；平均含糖率15．6％，比对照低0．4度，平均产糖量8263．5kg/hm^2，比对照提高26．8％，平均褐斑病病情为1．2级，发病程度与对照相仿；平均根腐病罹病率为0．5％，根腐病发病程度明显低于对照；在丛根病发病地区，ZD204发病率为1．0－7．7％，对照品种发病率为1．5％－76．6％，发病程度明显低于对照。适宜在东北，华北和西北三大甜菜产区种植推广。 相似文献
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