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TGF-β/Smad信号通路在Follistatin调节鸭骨骼肌卫星细胞增殖过程中的作用机制 总被引:1,自引:0,他引:1
【目的】卵泡抑素(Follistatin)能够调节骨骼肌肥大和脂肪沉积,可促进骨骼肌卫星细胞增殖。拟采用体外重组 Follistatin处理增殖期的鸭骨骼肌卫星细胞,阐明TGF-β/Smad信号通路在Follistatin调节鸭骨骼肌卫星细胞增殖过程中的作用机制。【方法】以孵化14 d的鸭胚为试验材料,采用差速贴壁的方法分离骨骼肌卫星细胞,待细胞长到70%-80%时,将培养基换成含有浓度分别为0、1、10、100 ng·mL-1的Follistatin培养基,继续培养36 h后,采用CCK-8检测骨骼肌卫星细胞增殖情况;使用抗pax7抗体染色,DAPI染核,鉴定骨骼肌卫星细胞;采用real-time qPCR方法检测Follistatin对骨骼肌卫星细胞增殖过程中的标记基因PCNA、生肌因子基因MyoD和TGF-β信号通路中TGF-β、Smad2和Smad3的表达的影响。【结果】在倒置显微镜下观察,传代培养12 h鸭骨骼肌细胞一部分未贴壁呈圆形,一部分贴壁呈梭形。24 h后细胞全部贴壁,细胞略有变长。2 d后细胞继续增多,且呈长梭形。3 d后细胞数目增加,个别细胞融合。4 d后细胞数目进一步增加,细胞变粗,个别细胞融合。5 d后有少量细胞开始分化,细胞进一步融合。Pax7免疫荧光染色分析显示,95%以上的细胞中Pax7呈阳性表达;CCK-8检测细胞增殖分析表明,不同浓度的Follistatin处理鸭骨骼肌卫星细胞后,各处理组细胞增殖均显著高于对照组(P<0.01),且10 ng·mL-1 Follistatin处理鸭骨骼肌卫星细胞增殖效果最明显,为最佳处理浓度;与对照组相比,10 ng·mL-1 Follistatin处理组的MyoD基因表达量显著下降(P<0.05),PCNA基因表达量显著升高(P<0.05),Myf5基因表达量显著升高,TGF-β和Smad2基因表达显著升高(P<0.05),且Smad3基因表达量极限著升高(P<0.01);Western blotting检测蛋白表达水平结果表明,与对照组相比,TGF-β、Smad2 和Smad3磷酸化水平也显著升高。【结论】10 ng·mL-1 Follistatin能显著促进鸭骨骼肌卫星细胞增殖,这一过程可通过TGF-β/Smad信号通路实现。使用最佳Follistatin处理浓度能够显著促进鸭骨骼肌卫星细胞增殖,该研究为鸭骨骼肌生长发育调控机理研究奠定分子基础。 相似文献
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氧弹燃烧-氟离子选择电极法测定蔬菜中的氟 总被引:1,自引:0,他引:1
本试验建立了一种测定蔬菜中氟含量的新方法。蔬菜经氧弹燃烧处理后在一定浓度的高氯酸和柠檬酸钠的介质中利用氟离子选择性电极法测定其微量氟。菠菜、卷心菜、油菜、生菜、香麦、白菜中氟的测定结果表明,氟离子浓度为1.0×10-2~1.0×10-6mol/L范围内呈现良好线性关系,线性相关系数r为0.999 3,相对标准偏差(RSD)为0.93%~1.91%(n=6),不同添加水平中回收率均在96.4%~105.7%之间。 相似文献
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利用Logistic、von Bertalanffy和Gompertz三种非线性生长模型,分别对东乡绿壳蛋鸡与本地培育的苏垦黄鸡的正反交后代以及东乡绿壳蛋鸡纯繁后代进行生长发育规律研究,并通过拟合度(R~2)和残差平方和(E)进行各生长模型的效果比较。结果表明:正反组的生长发育显著优于纯繁组,但正交组和反交组公母体重对应比较显示,组间无显著差异;3种模型均能较好地拟合3个群体的生长曲线(R~20.99),但综合考虑拟合度和E值后,提示Gompertz方程拟合效果最佳;由Gompertz生长模型得出的正反交组生长发育的拐点周龄在6.9~7.5周之间,较早于其他培育的蛋鸡品种2周,说明本研究正反交组合的体成熟和性成熟及开产日龄可能会稍早于纯种蛋鸡品种。这一结果提示,本研究的正反交组合后代可用于优质性早熟的金陵黑鸡新品种(系)培育,可进一步选育。 相似文献
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试论我国高等教育大众化的质量观、质量标准与质量保证 总被引:3,自引:0,他引:3
本就我国进入高等教育大众化时代中树立与之相适应的质量现和建立相应的质量标准与质量保证机制等进行了深入阐述。 相似文献
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