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H3亚型猪流感病毒荧光定量PCR检测方法的建立 总被引：3，自引：1，他引：2
通过RT-PCR方法克隆了H3亚型猪流感病毒HA基因一段靶序列,构建重组质粒作为标准阳性模板.根据GenBank中的H3亚型猪流感病毒HA基因保守序列设计了用于FQ-PCR的1对引物和1条TaqMan探针.通过条件优化,以10倍系列稀释的质粒为标准品进行荧光定量PCR扩增,并制作标准曲线,建立了检测H3亚型猪流感的荧光定量PCR方法.结果表明,该方法检测灵敏度可达1.0×100拷贝/μL,线性范围为109～100,达10个数量级;对起始浓度为1.0×109、1.0×108、1.0×107拷贝/μL的标准品的最终实际测得值(Ct)分别为13.68,18.21和20.57;变异系数分别为0.31%、0.17%和0.12%,均小于5%,说明此方法具有良好的准确性和重现性.对阳性组织病料的检测表明,该方法的检测灵敏度高出常规PCR,与套式PCR具有相近的灵敏度. 相似文献
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杆状病毒被视为安全和可供选择的生物杀虫剂,已经被广泛应用于防治多类害虫。限制杆状病毒使用的主要因素包括杀虫谱狭窄,杀虫速度缓慢,在试验商品生产中存在技术和经济困难,频繁监测其应用效果比较耗时,气候变化导致其田间药效变化不定等。科学家针对杆状病毒的缺点,尤其是其缓慢的作用速度,正在研究一系列策略,包括增加化学或生物物质的表达量及通过基因工程手段表达其毒素或荷尔蒙。此类策略能提高病毒的活动量和增加其作用速度,并且能够减少幼虫的进食量和进食速度。杆状病毒用于控制鳞翅目昆虫的功效正在接受检验。 相似文献
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根据GenBank公布的肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)P1蛋白羧基端序列(AF290001.1),设计合成2对特异性引物,采取套式PCR方法,以肺炎支原体培养物中提取的DNA为模板,扩增肺炎支原体P1蛋白羧基端基因序列,将其克隆至pET32a表达载体,构建重组质粒pET32a/P1(3 802～4 695),转化大肠埃希菌BL21-gold,测序验证后IPTG诱导表达,经SDS-PAGE表明重组蛋白表观分子质量与预期一致,可溶性表达产物经Western blot证实重组蛋白具有免疫反应性。 相似文献
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以国内收集到的15份主栽品种为试材,统计了种子萌发期10个芽苗性状的变异性,并对其进行了主成分和聚类分析,以期为不同甜瓜产区优良品种的早期筛选及进一步遗传改良提供参考依据。结果表明:芽长、主胚根长、种子根数、总鲜质量、根芽干质量、总干质量、干物质含量、根系活力等8个性状的变异系数较大,为18.53%~35.98%;利用主成分分析将10个性状指标可转化为3个主成分,其累积贡献率达81.45%,通过主成分综合分值排序结果显示,Var 2、Var 5、Var 7、Var 6、Var 3等品种占据前5位。以主成分中主要因子为指标进行聚类分析,可将15份甜瓜品种分为4类,各类间芽苗性状有较大差异。因此,从种子萌发期芽苗性状的角度考虑,8个变异较大的芽苗性状指标是今后品种改良的重点,排在5位的品种在实际生产中可优选。 相似文献
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以西瓜品种"绿之秀"的种子为试材,采用人工接种的方法,研究了细菌性果斑病(bacterial fruit blotch,BFB)病原菌燕麦嗜酸菌西瓜亚种(Acidovorax avenae ssp.citrulli,Aac)的流行因素、种传方式及其在西瓜幼苗的定植情况,并调查了西瓜病果种子不同部位带菌情况。结果表明:发生BFB的西瓜病果采得的种子不完全带菌,种壳和种仁均可带菌,而且种壳带菌率明显高于种仁带菌率;接种菌液量和空气相对湿度是影响BFB发生的重要因素;Aac在西瓜幼苗生长过程中先侵染幼苗子叶,随后沿叶脉侵入下胚轴,侵染过程中有一定的潜伏期,最终引起幼苗下胚轴发病,但不侵染西瓜幼苗的根部。 相似文献
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不同盐胁迫对甜瓜幼苗根系和地上部生长发育的影响 总被引：2，自引：0，他引：2
为探讨甜瓜幼苗对不同盐胁迫响应的差异性,以50、100、150、200 mmol/L KNO_3、K_2SO_4和KNO_3+K_2SO_4混合盐分对甜瓜幼苗进行模拟胁迫,比较其对甜瓜幼苗根系和地上部生长发育的影响。结果表明,3种盐胁迫均会抑制甜瓜幼苗根系和地上部的生长发育,低浓度胁迫抑制作用不显著,随盐浓度的增加,抑制作用逐渐增强;综合考虑3种类型盐分对各项生长指标的影响,KNO_3+K_2SO_4混合盐抑制作用最强,KNO_3次之,K_2SO_4相对较弱。从3种盐胁迫与各项生长指标的相关性分析可知,盐胁迫与地上部生长发育的5个指标均呈显著负相关性,与根系指标的相关性因盐种类而异,说明甜瓜幼苗地上部比根系对盐胁迫的反应敏感,受胁迫伤害的程度大。 相似文献
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为探明西瓜叶片对小西葫芦黄花叶病毒(ZYMV)侵染的生理响应机制。以感病品种18-025为材料，采用苗期常规汁液摩擦法接种ZYMV,比较分析了接种后2、4、6、8、10 d接与未接种叶片等生理指标的差异。结果表明，接种ZYMV后，叶片叶绿素、可溶性蛋白质含量均低于对照，其中，叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素含量在6～10 d时与对照差异达显著水平，可溶性蛋白质含量2～10 d时均与对照差异不显著；叶片脯氨酸、可溶性糖含量及3种保护酶活性均高于对照，其中脯氨酸含量在6、8、10 d时分别比对照显著提高21.92%、36.69%、58.01%,可溶性糖含量在4 d时比对照显著提高25.02%,超氧化物歧化酶活性在2～10 d时均与对照差异不显著；过氧化物酶活性在2、4、6、8 d时分别比对照显著提高46.76%、81.59%、48.74%、31.55%,过氧化氢酶活性在4、6、8 d时分别比对照显著提高23.93%、48.91%、46.15%;叶片丙二醛含量在2～6 d时高于对照，在8、10 d时低于对照，其中在6 d时比对照显著提高12.38%。综上说明，西瓜叶片叶绿素、脯氨酸、可溶性糖和丙... 相似文献
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