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通过探究鸡腺苷琥珀酸裂解酶(adenylosuccinate lyase)基因ADSL与其互作基因的调控关系,为进一步研究ADSL在肌肉中高表达的原因和ADSL影响肌肉风味的机制提供参考。本研究构建了鸡(gallus)ADSL基因的重组真核表达载体pEGFP-C1-ADSL,将pEGFP-C1-ADSL和pEGFP-C1质粒分别转染鸡成肌细胞,提取表达成功的细胞总蛋白,利用免疫共沉淀(co-immunoprecipitation, Co-IP)联合质谱分析鉴定与鸡ADSL蛋白互作的细胞蛋白,并对结果进行GO功能注释、KEGG通路和蛋白互作网络分析。通过分析筛选出RPL4、PDLIM5、ACTG1和SRSF10蛋白,检测在ADSL基因过表达和沉默状态下,RPL4、PDLIM5、ACTG1和SRSF10基因在成肌细胞中的表达情况。结果表明,与ADSL互作的蛋白共94个;生物信息学分析表明,这些蛋白定位于细胞结构体、胞内和含蛋白质的复合物上,它们主要参与细胞进程、生物调节和刺激反应等生物进程。间接免疫荧光结果显示,重组蛋白pEGFP-C1-ADSL主要定位于细胞核和细胞质。ADSL过表达时,... 相似文献
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【目的】探究赤水乌骨鸡胸肌组织中腺苷琥珀酸裂解酶基因（ADSL）表达特征及其目的基因的干扰载体构建,为深入研究畜禽组织肌肉中肌苷酸（IMP）的表达规律及ADSL基因影响畜禽风味的机制提供理论参考。【方法】以不同月龄（3、4、5和6月龄）的赤水乌骨鸡（公鸡和母鸡各半）为试验材料,运用实时荧光定量PCR检测不同月龄及不同性别赤水乌骨鸡胸肌组织中ADSL基因的表达情况;同时根据GenBank中鸡ADSL基因mRNA序列（NM＿205529.2）设计4对短发夹RNA(shRNA)干扰序列（sh1-ADSL、sh2-ADSL、sh3-ADSL和sh4-ADSL）和1对阴性对照序列（sh-NC）与pGPH1/GFP/Neo载体连接后进行测序,将构建成功的ADSL基因干扰载体转染至成肌细胞,检测并筛选出干扰效率最高的干扰载体。【结果】ADSL基因在不同月龄赤水乌骨鸡胸肌组织中的相对表达量排序为5月龄>4月龄>6月龄>3月龄,赤水乌骨母鸡3月龄母鸡的ADSL基因相对表达量极显著高于公鸡（P<0.01,下同）,4月龄母鸡ADSL基因的相对表达量显著高于公鸡（P<0.05）,... 相似文献
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试验旨在探究饲粮中添加绿茶渣对赤水乌骨鸡肌肉中氨基酸和脂肪酸含量的影响。选取360只300日龄的赤水乌骨鸡母鸡，随机分成4个组，每组6个重复，每个重复15只鸡。各组分别饲喂添加0%（对照组）、0.8%、1.6%、2.4%绿茶渣的饲粮，预试期14 d，正试期60 d，屠宰后采集胸肌测定肌肉常规营养成分、氨基酸和脂肪酸含量。结果表明：与对照组相比，添加绿茶渣可降低胸肌中铁含量（P<0.05）,0.8%绿茶渣组粗脂肪含量降低（P<0.05）,1.6%绿茶渣组粗蛋白质含量提高（P<0.05）,2.4%绿茶渣组鸡肉亮度增加（P<0.05）；绿茶渣对胸肌中氨基酸含量无显著影响；绿茶渣对总饱和脂肪酸的含量无显著影响，添加1.6%绿茶渣使得单不饱和脂肪酸（MUFA）含量有升高趋势（P>0.05），多不饱和脂肪酸（PUFA）含量有降低趋势（P>0.05）。综上，饲粮中添加1.6%绿茶渣对赤水乌骨鸡肌肉中氨基酸含量影响不显著，对脂肪酸的影响较大。 相似文献
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为了探究赤水乌骨鸡SLCO1B3基因外显子上的遗传变异位点对蛋壳颜色、蛋品质指标的影响，对300只赤水乌骨鸡SLCO1B3基因的功能突变位点EAV-HP进行基因分型，筛选出109只绿壳纯合基因型(SL/SL)的母鸡。通过直接测序方法鉴定纯合子基因型(SL/SL)个体的SLCO1B3基因外显子上存在的SNPs,并构建这些SNPs的双倍型，再与蛋品质指标进行相关性分析。结果表明：在赤水乌骨鸡SLCO1B3基因外显子上共检测到3个SNPs,第5外显子上的g.65235858G>A位点为非同义突变，突变后mRNA二级结构发生改变；关联性分析表明，赤水乌骨鸡SLCO1B3基因的这3个SNPs构建的双倍型对蛋壳颜色ΔL*值、蛋壳颜色Δb*值、蛋形指数有显著影响(P<0.05)。结果表明，SLCO1B3基因的遗传变异与蛋壳颜色、蛋形指数存在显著相关。 相似文献
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【背景】绿壳蛋深受消费者喜爱，蛋壳绿色的深浅在市场上是影响绿壳蛋定价销售的重要参考指标。绿壳蛋的形成受多基因共同调控，蛋壳绿色深浅不一，其分子机理尚不清楚。通过对赤水乌骨鸡蛋壳腺组织进行转录组测序，挖掘其调控绿壳蛋蛋壳颜色深浅的候选基因以及关键信号通路，探究影响蛋壳颜色遗传性，以期发展绿壳蛋的选种选育和提高经济效益。【目的】探讨赤水乌骨鸡的遗传基础，并通过SLCO1B3基因分型对其进行鉴定和筛选，以期通过分子标记在青壳鸡育种规划中提供新的见解，并在后期的选择策略中帮助控制和提高赤水乌骨鸡蛋壳品质的同质性。【方法】以纯系的280日龄赤水乌骨鸡为研究对象，屠宰产浅绿色蛋（QL）和深绿色蛋（SL）的母鸡各3只，采集蛋壳腺以RNA-seq技术检测分析，筛选与蛋壳颜色密切相关的差异表达基因（differentially expressed genes, DEGs），并对这些DEGs进行GO和KEGG富集分析。利用qRT-PCR技术检测与蛋壳颜色相关的6个候选基因的转录水平变化以验证转录组数据可靠性。【结果】在深绿组与浅绿组中共筛选到93个显著DEGs，有59个基因在深绿组中显著上调，34个显著下... 相似文献
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