肌抑素Myostatin突变体Pro区域的克隆、表达和活性     

杨兴元  杨树洪  侯健  陈永福 《农业生物技术学报》2004,12(1):56-60

为了检测肌抑素Myostatin突变体的Pro区域生化活性，设计引物从肌抑素突变的双肌牛皮尔蒙特(Piedmontese)的基因组中扩增得到肌抑素突变体的Pro区域，并分别将其亚克隆到pMD18-T载体上。利用基因重组技术，构建原核表达质粒。pET30a( )／Myostatin-Pro(简称pEMPro)，在大肠杆菌(Eschetichia coli)中分泌表达肌抑素突变体Pro区域，采用亲和层析法纯化表达产物，并将其共孵育于体外培养的绵羊的骨骼肌细胞。证实肌抑素的突变体Pro区蛋白具有促进肌肉细胞增殖的功能。  相似文献   

利用精子介导法建立hHT/hDAF双基因转移小鼠模型   总被引：1，自引：0，他引：1  

郭战军  马毅  李三华  韩瑞发  李胜芝  孙光  乔宝民  马腾骧  陈永福 《华北农学报》2010,25(3)

为探讨超急排斥反应(Hyperacute rejection,HAR)及延迟性异种排斥反应(Delayed xenograft rejection,DXR)的分子调控机制,采用优化的精子介导法(Sperm-mediated gene transfer,SMGT)对建立hHT/hDAF双基因转移小鼠模型进行了研究。结果表明,应用树枝状聚合物(Dendrimers)优化SMGT后,2细胞胚GFP+RFP的阳性率达到4.51%,同对照组相比差异极显著(P0.01)。选取标记基因GFP+RFP双阳性的胚胎进行移植后获得36只仔鼠,PCR及Southern Blot检测结果表明,17只小鼠PCR结果呈hHT+hDAF双阳性,其中5只小鼠Southern Blot结果呈hHT+hDAF双阳性。上述结果表明,成功建立了Hht/hDAF双基因转移小鼠模型。  相似文献   

Pseudomonas cepacia脂酶的分子克隆   总被引：1，自引：0，他引：1  

李宁  陈永福 《农业生物技术学报》1995,3(4):43-47

本研究从Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃｅｐａｃｉａ染色体文库中分离到了４个酯酶基因的阳性克隆，限制性酶切分析发现脂基因位于一个３．０ｋｂ的ＤＮＡ片段上。脂酶基因的部分核苷酸序列进行了测定，并与已报道的酯酶基因序列作了比较分析，此外，还对不同物种的脂酶底物结合区域进行了讨论。  相似文献   

表达鸡传染性法氏囊病病毒VP2重组鸡痘病毒的构建   总被引：2，自引：0，他引：2  

刘小军  陈楠  陈立栋  周胜花  陈永福 《农业生物技术学报》2000,8(2):186-189

含ＩＢＤＶ保护性抗原ＶＰ２的质粒,以ＳｐｈＩ消化,然后用Ｔ４噬菌体ＤＮＡ聚合酶将末端补平,产物纯化后再以ＳａｌＩ消化一次,经再次纯化后与ＳｍａＩ和ＳａｌＩ分步酶切的鸡痘病毒插入载体ｐＦＧ１１７５－１相连,使唤基因顺向插入到载体Ｐ７５启动子下游,得到含ＩＢＤ ＶＰ２基因的重组插入载体ｐＦＧ ＶＰ２。  相似文献   

提高PCR产物T-A克隆效率的研究   总被引：6，自引：0，他引：6  

李瑞国  安晓荣  苟克勉  柏家林  侯健  陈永福 《农业生物技术学报》2003,11(2):158-162

摘要：比较了3种T-A克隆法对于4个不同长度PCR产物的克隆效率。结果表明,对于较短的PCR产物（500 bp左右）,采用常规的T-A克隆法即可得到较高的克隆效率;对于中等长度的PCR产物(3 000 bp左右),用温度循环T-A克隆法可获得较高的克隆效率;对于较长的PCR产物（6 000 bp左右）,用二次重组T-A克隆法可以提高克隆效率。  相似文献   

数字经济助力农业农村现代化研究——以甘肃省武威市为例          下载免费PDF全文

卢洋洋  陈永福  杨子娴  石凌宇 《现代农业研究》2023,(3):75-77

在乡村振兴的背景下,越来越多的乡村开启了现代科技助推产业集群化的模式,农业农村的现代化离不开数字经济的助力,通过提高产业技术水平,推动农业机械化进程、实现农业生产经营的数字化来助力乡村振兴。与此同时,也出现了部分问题使得农业经济发展遇到阻碍。本文主要通过分析武威市农业产业化的发展困境,来为建设甘肃省武威市的农业发展新模式提供参考,也为其他地区的农业发展提供有效思路。  相似文献   

被毛突变小鼠解剖及繁殖学特性观察   总被引：2，自引：1，他引：1  

李善如  遇秀玲  王冬平  吴娜  李吉庆  李润芳  郑亚萍  朱士恩  张忠诚  陈永福 《中国兽医学报》2000,20(1):92-96

对一种新的具有个毛、无毛、稀毛３种表型的被毛突变小鼠的大体解剖学特性研究结果表明,其心肝、脾、肺、肾、肾上腺等脏器的位置、形态及组织学结构无表型间差异,但无毛小鼠被毛和皮肤结构异常,大多数脏器的重量和脏器系数表现出表型差异和性别差异（Ｐ〈０．０５或Ｐ〈０．０１）。繁殖学特性研究结果表明,虽然无毛小鼠雌雄生殖系统的器官组成、发情周期与其他２种表型之间无明显差异,但其雄性的初情期明显滞后（约２周左右）  相似文献   

鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的克隆及序列分析     

刘小军  陈楠  陈永福 《农业生物技术学报》1999,7(2):129-134

  相似文献   

一种新的精子膜蛋白sp18基因的克隆及其在E.coli 中的表达     

柏家林  苟克勉  安晓荣  李瑞国  侯健  陈永福 《农业生物技术学报》2003,11(3):268-272

摘要：利用sp18 mAb筛选小鼠睾丸λgt11-cDNA表达文库,命名为sp18（GenBank登录号：AF129872）的阳性克隆由 1 468 bp组成,开放阅读框（open reading frame, ORF）长约429 bp,编码142个氨基酸。起始密码ATG位于第694 bp,终止密码位于第1 122 bp,polyA位于1 245~1 250 bp。核苷酸同源性分析表明,sp18 cDNA的10~651 bp与人视神经Hr44的532~ 1 173 bp、sp18 cDNA的10~816 bp、864~1 444 bp与牛视神经Hr44的1 408~2 208 bp、2 250~2 309 bp的cDNA序列有很高的同源性, 高达98%。推测sp18基因可能是生殖系统存在的一种新基因。sp18编码蛋白的理论分子量约为15.7 kD,有8个N-糖基化位点和12个O-糖基化位点,亲水性分析表明sp18多肽是一种精子跨膜蛋白,跨膜区位于第17~33氨基酸处。将sp18 cDNA亚克隆到原核表达载体pET-30a(+),在E. coli BL21（DE3）中得到诱导表达,其表观分子量约为16.5 kD,表达量约占菌体总蛋白的32%。Western blot分析表明sp18 mAb能识别重组的sp18膜蛋白,表明重组蛋白具有免疫原性,为进一步研究sp18基因的功能打下了基础。  相似文献   

转基因羊研究进展   总被引：3，自引：0，他引：3  

崔文涛  靳二辉  李奎  陈永福 《农业生物技术学报》2007,15(3):519-525

转基因动物已成为当今生命科学发展的热点，其中转基因羊的研究又是转基因动物中较为活跃的领域。自1985年用显微注射法获得了第1只转基因羊以来，随后有关转基因羊获得成功及取得突破的相关报道逐渐增多；同时转基因羊的研制目的也从当初的转基因育种逐渐倾向于乳腺生物反应器，并亦取得显著成效。本文就此作一简要综述。  相似文献