水貂生长激素的原核表达及特异性抗血清制备     

苏俊  刘曼  王吉贵  孙燕  刘维全 《中国畜牧兽医》2018,(4)

本研究旨在建立水貂生长激素(mink growth hormone,mGH)的原核高效表达体系,探索mGH蛋白规模化生产方法,利用获得的目的蛋白制备特异抗血清。将已构建的原核表达载体pET28b-mGH转化大肠杆菌Rosetta(DE3)TMpLysS感受态细胞,经IPTG诱导表达,超声破碎菌体后离心获得包涵体蛋白,利用8mol/L尿素对其进行溶解和复性,经Ni-NTA树脂亲和层析纯化获得重组蛋白。通过Western blotting检测及MALDI-TOFMS质谱分析对获得的蛋白进行鉴定。用SDS-PAGE电泳法检测蛋白纯度,用BCA法测定其浓度。复性mGH蛋白与完全弗氏佐剂或不完全弗氏佐剂乳化制备免疫抗原,采用皮下多点注射法免疫3只新西兰大白兔,首次免疫剂量为600μg/只,二免剂量为600μg/只,三免剂量为400μg/只。三免10d后分离制备血清,Western blotting法检测其特异性,间接ELISA法检测其效价。结果表明,原核表达的包涵体经Ni-NTA柱纯化后所得蛋白鉴定为mGH融合蛋白;SDS-PAGE电泳鉴定复性mGH蛋白条带单一,纯度达90%以上,BCA法计算蛋白浓度为669μg/mL,均达到了免疫动物的要求;制备的抗血清经Western blotting检测具有良好的结合特异性,间接ELISA法测定其抗体效价达1∶256 000以上。上述结果表明,原核表达载体pET28b-mGH可在大肠杆菌Rosetta(DE3)TMpLysS细胞中高效表达mGH融合蛋白,表达蛋白经变性、复性和纯化后免疫新西兰大白兔,可制备高效价特异性抗血清。  相似文献   

GDNF可调节出生后仔猪睾丸的发育和精子发生*     

孙燕  王鲜忠吴建云张家骅   《农业生物技术学报》2005,13(6)

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类固醇合成相关酶在小鼠不同组织中的表达     

王鲜忠 孙燕吴建云  罗英胡淮杰  李瑞玲张家骅 《中国兽医科技》2006,36(12):996-999

利用RT-PCR和Western-blotting技术分析了胆固醇侧链裂解酶（P450scc）、3β-羟甾脱氢酶（3β-HSD）、C17-20裂解酶（P450c17）、StAR mRNA和蛋白在成年昆明小白鼠心脏、脾、肝、肾中的表达.结果显示,StAR mRNA及其蛋白、P450scc mRNA在以上组织中均有表达;3β-HSD在肾中有较强的表达,在其他组织的表达较弱;P450c17在上述组织中无明显的表达,但在睾丸中有明显的表达.这表明,心脏、脾、肝、肾均具有合成类固醇的能力,但合成类固醇的类型存在一定的差异.  相似文献   

基质对黑果腺肋花楸幼苗生长的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

张成霞  孙燕  蔡灿  王香港  吴红 《草业科学》2018,35(3):574-580

以黑果腺肋花楸(Aronia melanocarpa)为试验材料,选用田园土、泥炭土、珍珠岩和黄沙,采用正交试验设计,研究不同基质配比对黑果腺肋花楸成苗率以及幼苗形态指标和生理指标的影响。结果表明,不同育苗基质对黑果腺肋花楸出苗率、苗高、地径、主根长、侧根数和高径比等形态指标以及根系活力、可溶性糖、淀粉和蛋白质等生理指标的影响差异显著,综合分析各项指标,筛选出适合黑果腺肋花楸容器育苗的栽培基质为田园土(40%)+泥炭土(30%)+黄沙(30%)、田园土(40%)+珍珠岩(30%)+黄沙(30%)、田园土(40%)+泥炭土(30%)+珍珠岩(30%)和田园土(60%)+泥炭土(20%)+黄沙(20%)。  相似文献   

重庆市部分地区H5和H7重组禽流感病毒二价灭活苗免疫效果监测     

杨泽林  巫廷建  凌洪权  孙燕  董春霞  赵曼  李永强  熊仲良 《中国动物检疫》2018,35(2):13-15

2017年7月7日,农业部决定对全国家禽开展H7亚型流感免疫。为了掌握重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活苗的免疫效果,2017年8—9月,重庆市动物疫病预防控制中心进行了控制性试验和大面积临床监测。控制试验结果表明:首免15 d后,H7亚型禽流感抗体合格率可达70.00%,H5亚型抗体合格率仅为10.00%;首免22 d后,H7亚型禽流感抗体合格率达到93.33%,H5亚型抗体合格率达到60.00%;该疫苗未出现严重免疫副反应;H7亚型禽流感抗体产生的时间早于H5亚型。随机选取5个区县,采集414份免疫血清进行监测。结果显示:二价灭活苗免疫21 d后,H5和H7亚型禽流感抗体平均合格率分别为92.27%和76.00%;5个区县的抗体水平存在差异;蛋鸡抗体水平高于肉鸡。控制试验及临床监测结果提示,该疫苗免疫效果确实,但部分区县仍存在免疫抗体水平不高的养禽场。因此,在新旧疫苗交替使用期间,各地应高度重视高致病性H5和H7亚型禽流感防治工作,尤其是肉鸡。  相似文献   

海南省蔬菜根结线虫发生种类与分布     

李周容  龙海波  孙燕芳  裴月令  陈园  冯推紫 《植物保护》2020,46(6):213-216

2014年-2018年, 对海南省蔬菜根结线虫病害进行了田间随机采样调查和病原种类分子鉴定?结果显示, 蔬菜根结线虫病在海南18市县均有发生, 且大部分旱田连作地块病株率达到80%以上?进一步对采集的295份根结线虫样本种类进行了分子鉴定, 共鉴定出象耳豆根结线虫?南方根结线虫和爪哇根结线虫3种病原种?其中, 象耳豆根结线虫单一检出率达到62.37%, 南方根结线虫单一检出率为23.39%, 爪哇根结线虫的检出率仅为5.76%, 象耳豆根结线虫和南方根结线虫复合侵染检出率为8.47%?除五指山市样本以外, 海南其余17市县样本均检测到象耳豆根结线虫侵染为害?本研究显示象耳豆根结线虫为海南省蔬菜上的优势病原根结线虫种类, 该结果对指导品种布局?制定根结线虫病害的防治策略具有重要意义?  相似文献   

吉林省新型农村社会养老保险制度的思考     

孙燕 《当代生态农业》2011,(Z1):96-99

本文依据目前吉林省养老保险现状、存在的问题,提出了建立新型农村养老保险的措施。  相似文献   

山葵种子的活力测定研究简     

宋超  王跃华  孙燕霞  段茂华  任三军  刘银花 《种子》2014,(1):108-110

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八棱海棠实生砧木硬枝扦插试验     

赵玲玲  宋来庆  杨新  刘美英  唐岩  孙燕霞  姜中武 《烟台果树》2015,(3):11-12

<正>八棱海棠树体强健,抗寒,抗旱,抗盐碱,抗病虫,耐瘠薄,寿命长,是我国苹果产区普遍应用的苹果实生砧木。由于其为异花授粉,实生苗表现为多种类型。自2010年开始,烟台市农业科学研究院利用八棱海棠、福山沙果等砧木为材料,采用重茬地硬枝扦插的方式,筛选生根容易、在重茬地中成活良好的优良株系和砧木资  相似文献   

简述牛屡配不孕的原因及治疗方法     

于爱露  孙燕芳  刘友财 《黑龙江动物繁殖》2016,(6):18-19

正一些地区母牛屡配不孕的情况较为普遍,严重影响养殖效益,给养殖户带来很大困扰。现根据临床诊断及治疗经验对母牛不孕的原因进行简单分析,总结几种临床常用效果较好的治疗方法,希望对养殖户有所帮助。1不孕的原因及分类牛的不孕会给养殖者造成严重的经济损失。引起母牛不育的原因比较复杂,按照其性质可以概括为7大类:1)先天性不育:由先天性或遗传性因素导致生殖器官异常或发育畸形。2)营养性不育:营养  相似文献