刺梨及其近缘种PCR实验体系的建立与优化   总被引：13，自引：2，他引：13  

文晓鹏  邓秀新 《果树学报》2003,20(1):35-39

以刺梨及其近缘种月季为试材,进行了RAPD-PCR实验参数的确立和优化试验。结果表明,刺梨及月季25μL反应体系的最优组成为2.5μL10×反应缓冲液,2mmol/LMg2+,0.2mmol/LdNTP,1.6mg/L模板DNA,0.4μmol/L随机引物和1.2UTaqDNA多聚酶。经PCR扩增验证,此反应体系亦适宜于刺梨的部分近缘种,可有效用于RAPD分析;通过将退火温度提高至50℃或采用“Touchdown”扩增程序,并在50μL反应体系中适当增加特异引物对浓度(1.0μmol/L),模板DNA(4.0mg/L)和TaqDNA多聚酶(3.0U/管)的使用量,建立起适合于刺梨特异DNA片段检测及回收的特异PCR扩增实验体系,为刺梨的分子克隆奠定了技术基础。  相似文献   

DEB-2 菌株对贵州苹果早期落叶病病原的毒力效应     

何劲  雷帮星  宋贞富  乔光  宋莎  康冀川  文晓鹏 《西南农业学报》2014,(2):652-657

  相似文献   

‘玛瑙红’樱桃胚败育观察及胚抢救技术体系的建立     

邓彬  洪怡  田田  张璐芳  文晓鹏 《果树学报》2019,(5)

【目的】建立高效稳定的‘玛瑙红’樱桃胚抢救成苗技术。【方法】以‘玛瑙红’樱桃幼胚为材料,对不同发育时期的种胚进行解剖学观察和萌发实验,确定种胚败育时期和最佳胚抢救时间,设置不同植物生长调节剂配比研究其对种胚萌发及幼苗增殖的影响,确定最佳培养基配方。【结果】幼胚大规模败育发生在盛花期后30 d,最佳胚抢救时间为盛花期后25 d。胚萌发最佳培养基为MS+0.5 mg·L~(-1)TDZ+0.5 mg·L~(-1)6-BA+1.0 mg·L~(-1)IBA,萌发率达70%。幼苗增殖最佳培养基为MS+0.5 mg·L~(-1)TDZ+0.1 mg·L~(-1)6-BA+1.5 mg·L~(-1)IBA+0.5 mg·L~(-1)GA_3,增殖系数为5.45。幼苗经诱导生根后移栽至营养土中,成活率达90%。【结论】建立了‘玛瑙红’樱桃胚抢救技术体系,为‘玛瑙红’樱桃及其他核果类果树有效利用胚抢救技术解决杂交育种问题提供参考。  相似文献   

11种兰属植物DNA的提取及RAPD-PCR实验体系的建立与优化   总被引：3，自引：1，他引：3  

王国鼎  文晓鹏  季祥彪  乔光  胡鹏 《种子》2007,26(3):24-27

采用改进的CTAB-DNA提取方法，从11种兰属植物的嫩叶中提取总DNA。所得的DNA样品的A260／A280值在1．7～1．9之间，琼脂糖凝胶上主带清晰，较少降解，样品纯度高，DNA量大。另外，对影响RAPD-PCR的Mg^2＋、dNTPs、Taq酶、引物浓度等因素进行了优化。确定优化的反应体系为：75ng模板DNA，1×Buffer，2．5mmol／LMg^2＋，0．15mmol／LdNTPs，0．75UTaq酶，引物浓度0．4μmol／L，反应总体积为25山。该体系在20个供试兰属实验材料中获得较好的扩增结果。  相似文献   

贵州樱桃种质资源遗传多样性的分子评价     

宋常美  文晓鹏 《贵州农业科学》2011,(8):11-14

为贵州樱桃种质资源的进一步开发利用提供参考,采用RAPD标记,对35份贵州地方樱桃(Prunus pseudocerasuL.)种质资源的遗传多样性进行了分子评价.结果表明,从94条RAPD引物中筛选出30条稳定性强、谱带清晰及多态性丰富的引物进行PCR扩增,共获得298个标记,其中多态性标记为255个,多态性比例为8...  相似文献   

中国樱桃体细胞胚的诱导   总被引：1，自引：0，他引：1  

宋常美  文晓鹏  李庆宏 《种子》2011,30(8)

探讨了基因型、发育期和植物生长调节剂对中国樱桃(Prunus pseudocerasu L.)体细胞胚诱导的影响.结果表明,长5mm左右的未成熟种子胚性愈伤组织诱导率较高；细胞分裂素/GA接近1,甚至无细胞分裂素时易于诱导胚性愈伤组织;生长素中NAA更适合胚性愈伤组织诱导.  相似文献   

贵州野生枇杷资源遗传多样性的ISSR分析     

范付华  宋莎  洪怡  赵亚楠  文晓鹏 《中国果业信息》2012,41(3)

本文采用ISSR标记，构建了贵州39份野生枇杷种质的DNA指纹图谱，并对其遗传多样性进行了评价。结果表明，以筛选出的15条引物进行PCR扩增，获得清晰、重复性好的谱带125条，其中多态性谱带108条，多态性比例为86.4%；应用引物815、825和841的组合，构建了39份枇杷种质的ISSR指纹图谱，可以有效区分所有供试材料；15条引物的谱带数据聚类分析表明，供试种质的遗传相似性系数为0.40~0.98，在相似性系数为0.70时，可将供试种质分成五大类。聚类结果与种质表型相关，与地理分布的相关性不明显。  相似文献   

不同基因型刺梨及其近缘种亲缘关系的RAPD分析*   总被引：2，自引：0，他引：2  

文晓鹏  邓秀新 《农业生物技术学报》2003,11(6):605-611

采用RAPD标记，对刺梨(Rosa roxburghii Tratt)7个基因型及8个近缘种(类型)进行鉴定和亲缘关系分析。结果表明，筛选出的16个随机引物可扩增出137条480bp到3.3kb大小的清晰。DNA片段，其中95条为多态性片段，为总数的69．3％；每个引物平均产生8．6条。由OPB-11、OPAF-16和OPW-02扩增的14条特异DNA片段，可有效地将普通刺梨7个基因型和无籽刺梨区分开来。基于遗传距离矩阵，采用IJPGMA法对15个供试样品的亲缘关系进行了聚类分析，文中还就无籽刺梨及重瓣刺梨的可能来源进行了探讨。  相似文献   

贵州野生半夏资源遗传多样性的ISSR分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

王爱华  季祥彪  文晓鹏 《种子》2011,30(3)

采用ISSR标记对来自贵州省及周边省区的60份野生半夏(Pinellia ternate(Thunb.)Breit.)遗传多样性进行分析.从100条引物中筛选出16条多态性丰富,条带清晰的引物,共扩增出150条谱带,其中119条显示多态性,总多态百分率为79.33%,平均每个引物能扩增出9.4条;贵州省不同样品间的遗传差异性较大,多态百分率为38.0%～60.3%.高于55%的样品占全部贵州省样品的2/5,分布于全省各个地州市;样品间相似系数分布在0.63～0.93之间.UPGMA法将60份样品分为6类,样品的聚类存在一定的地域性.  相似文献   

分子标记在园艺植物上的应用与研究进展   总被引：7，自引：0，他引：7  

SONG Chang-mei  文晓鹏 《山地农业生物学报》2005,24(5):442-447

分子标记是继形态学标记、细胞学标记和生化标记之后发展起来的一种新的遗传标记,已广泛应用于园艺植物上.本文综述了分子标记技术在园艺植物种质资源遗传多样性评价、遗传变异检测、遗传图谱构建、分子克隆、分子标记辅助选择育种等领域上的研究进展.文中还就分子标记在园艺植物遗传育种上存在的问题进行了探讨.  相似文献