细粒棘球蚴GST-mu2基因的克隆、表达及重组蛋白反应原性研究     

陈英  乔军  孟庆玲  钟文强  刘田莉  贡莎莎  才学鹏 《家畜生态学报》2018,39(1):19-24

为了研究细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)谷胱甘肽S-转移酶mu 2(GST-mu 2)蛋白的反应原性,根据GenBank中Eg GST-mu2基因cDNA序列设计特异性引物,以Eg头节总RNA为模板,进行RT-PCR扩增,将PCR产物克隆到pMD19-T载体,测序验证后,将GST-mu2基因亚克隆至表达载体pET-28a中,构建pET-GST-mu2原核表达载体,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG进行诱导表达,并对表达蛋白进行反应原性分析。结果表明,GST-mu2cDNA全长660个核苷酸,编码219个氨基酸,该多肽含有2个N端酰基化位点,2个PKC磷酸化位点,3个CKⅡ磷酸化位点,1个TYR磷酸化位点,抗原表位区集中在28~70、147~219位;SDS-PAGE可以检测到32kDa的蛋白特异性条带;Western blot分析显示,表达的pET-GST-mu2重组蛋白能与Eg阳性血清发生特异性反应,具有较强的反应原性,为进一步利用GST-mu2蛋白作为Eg感染诊断的候选抗原奠定了基础。  相似文献   

犬腺病毒SY-45株不同大小蚀斑特性研究     

范泉水  夏咸柱  邱薇  黄耕  何洪彬  余春  乔军  武银莲  殷震 《动物医学进展》2001,22(4):86-87,99

应用蚀斑方法将SY－45毒株经过3次蚀斑纯化直到蚀斑大小相对稳定。从不同大小的蚀斑中挑选出三种蚀斑，大斑直径约3mm(简称LP）、中斑约2mm(简称MP）、小斑约1mm(简称SP）。分别在MDCK细胞上增殖并进行了三种不同大小斑毒对犬的毒力、免疫原性和在MDCK细胞上产毒量比较，以筛选最佳的疫苗株，试验结果表明用不同大小蚀斑病毒大剂量人工感染易感犬后，所有的试验犬临床症状和病理解剖学和病理组织学表现均正常；对挑选的4窝CAV HI抗体效价小于等于1：2的健康幼犬进行免疫试验，测定血清的中和抗体效价和血凝抑制抗体效价，结果表明：大斑毒的免疫原性要稍高于中斑毒，而明显高于小斑毒；不同大小蚀斑毒在MDKC细胞上产毒量差异很大，大斑毒可达10^7TCID50／mL、小斑毒达10^6TCID50／ml、小斑毒达10^4.5TCID^50/mL。综合所有试验结果表明：大斑毒株具有产毒量高、安全性好、免疫原性强的优点，是较为理想的疫苗株。  相似文献   

用于免疫治疗和疫苗佐剂的禽细胞因子     

Louise S Hilton  乔军  孟庆玲  许小琴 《中国畜牧兽医》2003,30(5):48-49

随着饲用抗生素及化学药物广泛的禁用 ,需研究替代方法以确保畜牧业不会受到影响 ;对家禽的研究结果表明 ,被饲料中抗生素抑制的产气芽孢杆菌若大量繁殖将会引起胃肠疾病并导致畜产品产量和品质的下降。因此 ,研制促畜禽生长的抗生素替代品至关重要。1　抗生素的替代品一种抗生素替代品如纤维素酶可增加饲料消化率并促进肠道菌群的平衡。消化后的营养成分被鸡体吸收用于能量代谢和生长而不是被肠道微生物消耗。另一个替代品是甜菜碱 ,它能降低肠道寄生虫如艾美耳球虫引起的损伤 ,抑制球虫的再次感染 ,降低肠炎的发生率。细菌素是由某些细菌…  相似文献   

犬细小病毒病的诊断与治疗   总被引：1，自引：0，他引：1  

贾桂珍  乔军 《广西畜牧兽医》2003,19(1):23-24

犬细小病毒病在临床上常表现为剧烈呕吐，腹泻，血痢等症状，和犬的其它传染病难以区分，易造成临床误诊，延误病情而导致患病犬严重脱水，中毒，全身衰竭而死亡。通过临床症状，病理剖检和实验室检查对其进行了诊断并运用特异性疗法加“一消二止三补”的综合治疗方法治疗，取得了较好的治疗效果。科学的饲养管理和严格的预防措施是防制该病的根本。  相似文献   

绵羊肺炎支原体核糖体蛋白30S RPS11基因的克隆、表达及重组蛋白免疫原性研究          下载免费PDF全文

田路路  孟庆玲  乔军  才学鹏  陈创夫 《家畜生态学报》2017,38(5):64-69

本研究以绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)新疆流行株基因组DNA为模板,通过PCR扩增30S RPS11基因,对其进行分子特征性分析,并将其抗原表位集中区进行原核表达,分析重组蛋白免疫原性。结果表明,30S RPS11基因全长405bp,编码134个氨基酸,该蛋白是一种受磷酸化调控的蛋白,含有一个核糖体蛋白S11信号。SDSPAGE结果显示,筛选的抗原表位集中区重组蛋白分子质量为29kDa;Western blot分析显示,该重组蛋白可被MO阳性血清特异性识别,说明其具有良好的反应原性;小鼠免疫试验表明,重组蛋白诱导机体产生的间接血凝抗体效价可达1∶32~1∶64,表明其具有较强的免疫原性。本试验首次证实MO核糖体蛋白(30SRPS11)具有良好的免疫原性和反应原性,为MO血清学诊断及亚单位疫苗研发提供了科学依据。  相似文献   

‘天工墨玉’葡萄在辽宁熊岳的试栽表现     

马丽  乔军  朱绍坤  高圣华  孙凌俊 《北方果树》2021,(3):59-60

‘天工墨玉’是浙江省农业科学院园艺研究所从‘夏黑’芽变选育的早熟葡萄新品种,2017年通过浙江省林木品种审定委员会认定[1].2018年辽宁省果树科学研究所从浙江省农业科学院园艺研究所引入,经过3年的试栽观测,该品种果实上色早,退酸快,着色均匀,美观,果肉硬脆,甜酸适口.果皮厚而脆,无涩味,可食.不裂果,不掉粒,抗性较强.浆果8月初即完全成熟,属于早熟品种,适合在辽宁熊岳或其他相似区域露地及设施推广种植.  相似文献   

果菜类蔬菜早熟性育种研究进展     

乔军  石瑶  王利英 《中国蔬菜》2015,1(5):14

早熟性是蔬菜作物育种的重要指标,对农业增产和农民增收意义重大。本文对果菜类蔬菜早熟性评价指标,早熟性相关农艺性状和早熟性育种方法三个方面的研究进展进行综述,并对基因工程辅助早熟育种进行了展望。  相似文献   

对我国蔬菜温室的评价及新型日光温室的研发     

蒋锦标  姜兴胜  乔军  满朝红  吴国兴 《中国蔬菜》2011,1(11):8-10

针对目前我国温室发展中的问题，研发了内保温组装式日光温室，介绍了内保温组装式日光温室的开发进展及应用情况。  相似文献   

古尔班通古特沙漠南缘蜱携带无形体的调查   总被引：1，自引：0，他引：1  

孟庆玲  乔军  盛金良  王俊伟  王为升  姚娜  陈创夫  张丽娟 《中国兽医学报》2012,32(8):1158-1163

为了解古尔班通古特沙漠南缘蜱携带无形体的状况,在该地域3个不同生境区域11个地点采集家畜寄生蜱标本,进行分类鉴定;运用套式PCR筛选无形体阳性蜱样本,并用半套式PCR扩增无形体科16SrRNA基因5′端高变区,进行克隆测序;将所获得的DNA序列与GenBank收录的序列作比对,并用Mega 5.0软件构建系统发育树,鉴定蜱携带无形体的种类。结果共采集708只蜱,鉴定为4个属8个种。在分类后的236份蜱样本中,检测出无形体阳性25份,阳性率为10.59%。序列比较发现,在亚洲璃眼蜱、血红扇头蜱、残缘璃眼蜱、长角血蜱中分别存在查菲埃立克体（Ehrlichia chaffeensis）、犬埃立克体（Ehrlichia canis）、边缘无形体（Anaplasma marginale）和绵羊无形体（Anaplasma ovis）的16SrRNA基因片段。研究结果证实在古尔班通古特沙漠南缘家畜寄生蜱中携带无形体,提示该地域可能是无形体病的自然疫源地。  相似文献   

犬冠状病毒基因疫苗表达载体的构建及其免疫原性研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

乔军  夏咸柱  杨松涛  郝峰  高玉伟  郑晓一  黄耕 《畜牧兽医学报》2006,37(4):412-416

以pVAX1为载体首次构建了犬冠状病毒病基因的3种真核表达质粒。首先将犬冠状病毒大熊猫株（CCVDXMV）纤突蛋白（S）、膜蛋白（M）和核蛋白（N）基因进行了克隆和序列测定。将测序后的质粒pTS、pTM和pTN分别双酶切，回收目的基因片段并将其定向克隆到真核表达质粒pVAX1中得到重组质粒pVAXS、pVAXM和pVAXN。将这3种真核表达质粒通过脂质体介导法转染MDCK细胞，通过RT—PCR法进行转录水平的检测，并用间接ELISA法检测目的蛋白的表达情况。结果在pVAXS、pVAXM、pVAXN转染MDCK细胞36h后就可检测到目的基因的转录；在转染72h后可检测到3种目的蛋白的表达。动物免疫试验表明，3种真核表达载体能有效地诱导机体产生细胞免疫与体液免疫应答，这为CCV基因疫苗的研究奠定了良好的基础。  相似文献