基于FAdV-4中国流行株Fiber2蛋白的间接ELISA抗体检测方法的建立     

万文妍  刘延珂  王贝贝  吴艳阳  杨东东  高冬生  李永涛  王新卫  杨霞  常洪涛  陈陆  王川庆  赵军 《中国兽医学报》2018,(5)

利用在大肠杆菌中表达的FAdV-4中国流行株Fiber2蛋白作为包被抗原,建立了检测抗禽腺病毒血清4型(FAdV-4)中国流行株抗体的间接ELISA方法。所建立方法的最佳条件为:抗原最适包被量为0.25μg/孔,包被时间为37℃1h,然后4℃过夜;被检血清的最佳稀释度为1∶800,作用时间为2h;二抗选用HRP标记的兔抗鸡IgY,稀释度为1∶4 000,作用时间为1.5h;显色液TMB作用条件为室温5 min。所建立ELISA的判定标准为:样品的S/P值大于或等于0.055 3判为阳性,小于0.041 8判为阴性。用建立的ELISA方法对抗鸡新城疫病毒、禽流感病毒、传染性法氏囊病病毒、传染性支气管炎病毒、减蛋综合征病毒阳性血清进行了检测,均无交叉反应,表明该方法有较好的特异性,组内和组间重复的最大变异系数为5.6%和5.7%,所建立的ELISA方法重复性良好。用所建立的ELISA方法对50份来自于疑似患肝炎-心包积液综合征病鸡的血清样品进行检测,阳性检出率为98%,与FAdV-4病原学检测结果符合率为100%。结果表明:本试验所建立的ELISA方法可用于抗FAdV-4中国流行株抗体的检测,为肝炎-心包积液综合征病监测和流行病学调查提供了方法。  相似文献   

桃若干重要特异性状的遗传趋向分析     

王力荣  王蛟  朱更瑞  方伟超  王新卫  陈昌文  曹珂 《园艺学报》2017,44(2):223-232

为了明确桃树菊花花形、窄叶形、白化与黄化叶色及盘龙形与垂枝形树形等6个性状的遗传特性,以‘粉菊花桃’ב红根甘肃桃1号’、‘红花重瓣垂枝桃’(简称‘红垂枝’)ב粉菊花桃’、‘S9’ב粉菊花桃’、‘粉菊花桃’ב瑞光2号’、‘红珊瑚’×(‘粉菊花桃’ב瑞光2号’)为组合配制F_1和F_2代,研究菊花花形、叶片白化及垂枝树形的遗传特性;以‘98-4-32’ב金蜜狭叶桃’、‘99-7-14’ב金蜜狭叶桃’及‘99-7-15’ב金蜜狭叶桃’为组合配制F_1和F_2代,研究窄叶形遗传趋向;以‘北京2-7’ב白花山碧桃’为组合配制F_1和F_2代,研究叶片黄化遗传特点;以‘红垂枝’ב帚形山桃’及‘96-7-56’ב帚形山桃’为组合配制F_1和F_2代,研究盘龙形树形的遗传。结果表明:在蔷薇花形与菊花花形组合中,"蔷薇形/菊花形"表现出2对等位基因(Ch/ch及Ch_2/ch_2)控制的遗传特性,且蔷薇形对菊花形为显性;在铃形花形与菊花花形组合中,F_1代蔷薇形表现为二者的中间类型。在‘98-4-32’ב金蜜狭叶桃’及‘99-7-14’ב金蜜狭叶桃’组合中,"宽叶/窄叶"表现出2对等位基因(Nl/nl及Nl_2/nl_2)控制的遗传特性,且宽叶对窄叶为显性;在‘99-7-15’ב金蜜狭叶桃’组合中,"宽叶/窄叶"表现出1对等位基因控制的遗传特性。叶片"正常/白化"表现出1对等位基因(Wl/wl)控制的遗传特性,且正常对白化为显性,白化基因可能来自‘粉菊花桃’;叶片"正常/黄化"表现出2对等位基因(Yl/yl及Yl_2/yl_2)控制的遗传特性,其中1对为显性时对另一对具有抑制作用,黄化基因可能来自‘白花山碧桃’。直立树形同时表现为盘龙形与垂枝形及盘龙形与开张形的中间类型;"开张形/垂枝形"表现出1对等位基因(We/we)控制的遗传特性,且开张对垂枝为显性。结论:菊花花形由2对隐性基因(chchch_2ch_2)控制;窄叶形可能由2对隐性基因(nlnlnl_2nl_2)控制;叶片白化由1对隐性基因(wlwl)控制;叶片黄化可能由2对等位基因(Yl_yl_2yl_2或Yl_2_ylyl)控制;仅盘龙形与直立形由1对等位基因(Br_2/br_2)控制,其中盘龙形基因型为br_2br_2;垂枝形由1对隐性基因(wewe)控制。  相似文献   

小鼠催乳素释放肽的初步克隆     

朱河水  都军霞  王新卫  王月影  王艳玲 《华北农学报》2007,22(6):199-200

为克隆并分析小鼠催乳素释放肽基因,从小鼠下丘脑提取总RNA,进行RT-PCR,PCR产物与pMD-19T连接后转化E.coli DH5α,检测阳性克隆并测序。测序结果表明,所得序列与大鼠催乳素释放肽编码区序列的相似指数为86.3%。克隆所得序列为小鼠催乳素释放肽的基因片段。  相似文献   

郑果所成功育成桃多抗砧木——中桃抗砧1号     

王新卫  王力荣  朱更瑞  方伟超  曹珂  陈昌文  李勇  吴金龙 《果农之友》2021,(1)

针对老桃区、老桃园更新再植和桃园机械化对无性系抗性砧木的需求,中国农业科学院郑州果树研究所桃种质资源与育种团队经过近40年的评价、创新和多区多点试验等研究,成功育成桃多抗砧木.  相似文献   

脂肪对家禽免疫的影响     

王新卫  贾强  周彦 《中国畜牧兽医》2007,34(11):22-25

营养因素对家禽免疫具有重要作用。脂肪是家禽必需的重要营养元素之一，不仅是维持家禽正常生长、繁殖、生产不可缺少的组成成分与营养物质，也是调节家禽免疫器官、组织和免疫应答反应不可缺少的物质基础。作者从脂肪的生理营养功能，就其对家禽的免疫器官发育、体液免疫、细胞免疫、非特异性免疫、细胞因子产生的影响等方面进行了综述。为合理配制家禽日粮，提高家禽抵抗疾病的能力提供理论依据。  相似文献   

鸡新城疫融合蛋白基因在大肠杆菌中的表达   总被引：3，自引：0，他引：3  

王忠田  王新卫  陈溥言  申秀琴 《河南畜牧兽医(综合版)》2000,(8)

根据NDVNL株的F基因序列，自行设计带有XbaⅠ和XhoⅠ酶切位点的一对引物,应用聚合酶链式反应(PCR)扩增含NDVF基因的PFL质粒,扩增结果与设计相符，大小为630bp。该片段覆盖F基因的2/3的抗原决定簇。对该片段两端酶切后，克隆到融合表达载体pThioHisB中，并转化到大肠杆菌Top10内，利用AMP抗性筛选阳性重组子，并用PCR及双酶切鉴定克隆成功，用IPTG化学诱导表达了F基因。经SDS－PAGE电泳分析，结果在分子量约为35KD处可见到表达的蛋白条带。这与根据核苷酸大小计算的蛋白及融合蛋白之和的大小相符。说明外源片段插入正确表达成功。用HRP标记的兔抗鸡抗体与该条带进行Western－Blot检测，该条带呈阳性反应。进一步证实表达正确。通过蛋白灰度扫描显示表达的融合蛋白占菌体总蛋白的20％。  相似文献   

早熟黄肉桃新品种中桃金阳的选育     

方伟超  王力荣  陈昌文  朱更瑞  曹珂  王新卫  吴金龙 《果树学报》2023,(7):1490-1493

中桃金阳是1998年用五月魁自然实生获得优良单株98-6-40,2008年选用98-6-40为母本、黄肉油桃品种双喜红为父本，进行人工杂交培育而成的早熟黄肉桃新品种。2017年正式命名，2021年通过河南省林木品种审定委员会审定。果实圆形，两半部对称，果顶平，梗洼浅，缝合线浅，成熟状态一致；平均单果质量190 g，大果质量250 g；果皮茸毛短，底色黄，果面95%以上着红色；果肉黄色，果肉与近核处花青苷含量较少，肉质为硬溶质；果实风味甜，可溶性固形物含量（w）13.5%～15.0%，黏核。树势健壮，树姿半开张；叶片长椭圆披针形；花为铃型，花色粉红，花粉多，自花结实。郑州地区3月初叶芽膨大，3月下旬始花，6月中下旬果实成熟，果实生育期85 d左右。落叶终止期11月10日左右，全生育期260 d。可在黄河故道地区广泛栽培。  相似文献   

株)二联灭活苗的免疫保护期测定     

王新卫  刘勇兵  王泽霖 《中国畜牧兽医》2008,35(3):80-82 

 传染性支气管炎能引起鸡的急性、高度接触性的呼吸道、消化道和泌尿生殖道疾病，对我国养鸡业构成严重威胁。而新城疫也是危害我国养鸡业的重要传染病。疫苗免疫是公认的预防这2种疫病的方法。本研究利用自制的3批ND-IB二联灭活疫苗，分别对28日龄易感雏鸡和120日龄开产前母鸡进行免疫，利用HI试验测出试验鸡群的抗体值。结果表明28日龄易感雏鸡在2个月内，开产前母鸡在3个月内均受到有效保护，为本批新支二联疫苗的实际临床免疫接种提供了依据。   相似文献   

不同培养条件对鸭源鸡杆菌生物被膜形成的影响     

张秀平  郭占达  陈陆  赵军  王新卫  常洪涛  刘红英  姚慧霞  王川庆  杨霞 《兽医大学学报》2014,(7):1083-1088

采用体外定量法检测20株鸭源鸡杆菌的被膜形成能力,并对被膜形成能力较强的1株鸭源鸡杆菌在不同环境（培养时间、培养基质、营养条件）下产生生物被膜（BF）的差异进行了研究。结果显示,大部分鸭源鸡杆菌均具有不同程度形成被膜的能力,其中3株被膜形成能力中等,2株形成能力较强;鸭源鸡杆菌在银染法、试管法和微量板定量检测法中形成BF的最佳培养时间分别是24、60、24h。其生长周期为8h开始起始黏附、20h大量黏附阶段、24h时形成了完整的生物被膜、32h生物被膜老化散播,之后起始新一轮的被膜周期。葡萄糖、蔗糖及NaCl的加入均在一定程度上抑制了被膜的形成,且随着加入量增加NaCl对被膜形成抑制更显著,而低质量浓度的MgSO4在一定程度上促进BF的形成。扫描电镜观察发现,生物被膜内鸭源鸡杆菌聚集成团状、相互黏连形成致密的三维立体结构。  相似文献   

2012―2013年猪繁殖与呼吸综合征病毒河南流行株的分离鉴定及分子流行病学调查     

周峰  常洪涛  赵军  陈陆  王新卫  刘红英  姚慧霞  王川庆  杨霞 《兽医大学学报》2014,(9):1398-1404

为了解河南地区猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）流行毒株的遗传变异情况和发展趋势。通过RT-PCR方法,对2012―2013年采自河南省各地疑似病料进行PRRSV检测,并对阳性病料进行病毒分离鉴定及分子流行病学分析。结果显示：54份疑似病料中17份检测为阳性,阳性率为31.5%,并分离出3株PRRSV;通过完整的ORF5基因和部分NSP2基因序列遗传进化分析表明,河南地区流行毒株主要为美洲型PRRSV,且17份阳性样品中10份与高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（HP-PRRSV）高度同源、2份与经典PRRSV高度同源、另外5份与美洲流行毒株NADC30高度同源,该类毒株的NSP2基因在不同部位存在393个核苷酸缺失,国内尚未见相关报道。结果表明,2012―2013年河南地区PRRSV主要流行毒株为HP-PRRSV,同时出现了新的变异毒株,使河南地区乃至我国PRRSV变异种类更加多样化,提示加强PRRSV流行及变异的监测十分必要。  相似文献