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1.
应用SYBR Green I的Real-time PCR方法定量检测空肠弯曲杆菌 总被引:2,自引:0,他引:2
空肠弯曲杆菌(Campylobacterjejuni)被认为是人类主要食源性病原菌之一。由于空肠弯曲杆菌特殊的生长条件和容易进入不可培养但存活的状态(Viablebutnonculturable,VNC),所以传统的生化鉴定结果不一定可靠,并且是一项费时而繁琐的工作。核酸检测方法的出现为空肠弯曲杆菌的检测带来了方便。本文基于LightCycler为平台,利用SYBRGreenI染料能特异与双链DNA结合而发荧光的特性,建立一种Real-timePCR方法来定量检测空肠弯曲杆菌。用该方法检测时,发现所有空肠弯曲杆菌(11株)都呈阳性,所有其它弯曲菌(3株)和其它菌株(5株)都是阴性。整个检测过程60min内可以完成,检测限度为5CFU,标准曲线的相关系数为1。结果表明基于SYBRGreenI的定量PCR方法既为空肠弯曲杆菌提供了一种特异、敏感、快速和简洁的定量检测方法,又为研究空肠弯曲杆菌致病机理提供了一种重要方法。 相似文献
2.
3.
采用Vero/SLAM细胞,从疑似犬瘟热病毒(CDV)感染犬的眼鼻分泌物拭子中分离到1株病毒,经细胞病变(CPE)观察、RT-PCR检测和间接免疫荧光试验鉴定,确定该分离株为CDV,命名为BJ16B2。对其H基因进行克隆和测序分析,BJ16B2株属于Asia-1型;潜在N-糖基化位点分析,共有9个位点,且在309~311位点,为强毒株。同源性比对分析发现,BJ16B2与参考毒株核苷酸和氨基酸同源性分别为88.7%~99.5%和86.5%~99.5%。其中与Asia-1型SY株同源性最高,核苷酸和氨基酸同源性均为99.5%,与疫苗株Snyder Hill、CDV3、Convac以及Onderstepoort亲缘关系较远,核苷酸和氨基酸同源性分别为90.6%~91.1%和90.3%~91.4%。强毒株BJ16B2的成功分离以及对其H基因序列分析,有利于进一步了解当前中国CDV流行株变异情况,为CDV毒力变化和宿主嗜性的研究提供参考依据。 相似文献
4.
高钙饲粮对青年蛋鸡血清一氧化氮浓度和抗氧化功能的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
本试验旨在研究高钙饲粮对青年蛋鸡血清一氧化氮(NO)浓度和抗氧化功能的影响。将 35日龄 100羽伊沙蛋鸡随机均分为对照组(含钙 1.00%)和高钙组(含钙 3.78%),每组 5个重复,每个重复 10羽。每天观察鸡的精神状态、食欲和粪便情况。在饲喂高钙饲粮第 0、8、16、24和 32天时,分别测定 2组鸡的血清中 NO浓度和丙二醛含量及抗氧化酶系统的变化。结果表明:1)高钙饲粮能引起青年蛋鸡长期腹泻,在饲喂高钙饲粮的第 8天就发生高血钙症。2)与对照组相比,高钙组在饲喂高钙饲粮第 8天和第 16天血清 NO浓度无显著变化(P>0.05),第24天和第 32天显著升高(P<0.05);第 8天和第 24天血清超氧化物歧化酶活性、总抗氧化能力无显著变化(P>0.05),第 16天显著升高(P<0.05),第 32天显著降低(P<0.05);第 8、16、24天血清丙二醛含量无显著变化(P>0.05),第 32天显著升高(P<0.05);第 24天和第 32天黄嘌呤氧化酶活性有升高趋势(P>0.05)。结果提示,饲喂高钙饲粮可导致青年蛋鸡发生长期腹泻,引起高血钙症,导致其机体内自由基的产生与清除的动态平衡遭到破坏,使自由基的产生远远超出清除能力。 相似文献
5.
对硒的生物学特性,硒对奶牛健康的影响以及奶牛对硒的需要量作了比较全面的综述,为奶牛饲养过程提供科学的参考依据。 相似文献
6.
7.
副溶血弧菌基因分型和检测的研究进展 总被引:5,自引:0,他引:5
副溶血弧菌(Vibrio Parabaemolyticus,VP)是一种革兰氏阴性嗜盐杆菌,是引起食源性疾病的重要病原之一,可导致患者腹泻、肠痉挛、恶心、呕吐、发烧等典型胃肠炎反应。1998年以来的资料显示,副溶血弧菌引发的食物中毒的发生规模及人群暴露规模呈明显上升趋势,均已超过沙门氏菌食物中毒,跃居首位。为了便于进行临床诊断、流行病学调查、食品中微生物检测及医院感染监控,微生物的分型与诊断技术是必不可少的工具。随着分子生物学技术的发展,基因分型与诊断方法以其敏感性高、特异性强、分型率和分辨率佳的优点,逐渐取代传统的表型分型技术,在微生物的分型与诊断中发挥巨大的作用。本文就近年来国内外在副溶血弧菌的基因分型与检测方法上的研究作一综述。 相似文献
8.
9.
10.
雏鸡感染马立克氏病强毒后抗氧化酶活性和丙二醛水平的变化 总被引:5,自引:0,他引:5
对10日龄雏鸡人工感染马立克氏病毒后,马立克氏病发病率为78.0%,死亡率为76.0%,在攻毒后2,4和6周,感染鸡血清中超氧化物歧化酶(SOD),血液中过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性在总体上的均显著低健康对照组鸡(P〈0.05),血清丙二醛水平极显著地高于健康对照组鸡(P〈0.01)。结合对马立克氏病临床病例的研究结果认为,氧自由基介入了马立克氏病的发病过程。 相似文献