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试验旨在构建鸡Prnp基因原核表达载体,并在大肠埃希菌中进行表达,为制备鸡朊蛋白单克隆抗体提供材料。根据GenBank已报道的鸡Prnp基因组序列和pET-28a质粒多克隆位点设计引物,以健康的鸡全血基因组DNA为材料,采用PCR的方法扩增鸡的Prnp基因,将目的基因片段与pET-28a载体连接,构建重组原核表达载体。重组菌转化到E. coli BL21(DE3)感受态细胞中,并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)进行诱导表达,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定表达的重组蛋白。结果表明,重组蛋白在诱导剂的终浓度为0.08 mmol·L-1,16 ℃,220 r·min-1诱导7 h,蛋白表达量最高。综上所述,本研究成功构建了pET-28a-ChPrnp重组表达菌株,为Prnp朊蛋白的结构、生理功能和致病机制研究提供方法。 相似文献
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荔枝原生质体培养再生植株(简报)俞长河陈振光吕柳新(福建农业大学园艺系,福州350002)关键词荔枝;原生质体;幼胚;培养;再生植株中图分类号S667.1以荔枝(LitchichinensisSonn.)主栽品种下番枝的幼胚为材料,诱导出松散颗粒状... 相似文献
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散尾南椰又名香桄榔、山棕、香棕,原产于我国福建、台湾等地.该品种开花时香气袭人,所含花油或浸膏、净油香气幽雅,是较高级的调香香料,值得开发利用.叶羽状、丛生,树型美丽,是较理想的公园、庭院绿化观赏植物.耐寒性较强,可引种推广至长江流域地区作园林造景. 相似文献