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为建立SDS消除奇异变形杆菌质粒的方法,了解奇异变形杆菌的质粒与奇异变形杆菌耐药性表型之间的关系,采用正交设计的试验方法研究奇异变形杆菌的消除条件,并采用琼脂糖凝胶电泳的方法进行验证,筛选出质粒消除效果最佳的试验条件。采用微量稀释法进行质粒消除前后奇异变形杆菌对13种抗生素的药敏性测定。结果显示,消除效果最好的条件为消除剂SDS浓度0.2%,温度42℃,消除72 h。将该组消除后不含质粒的奇异变形杆菌与原含质粒奇异变形杆进行耐药性试验,结果表明,10株鸡源奇异变形杆菌消除质粒后,其中9株对头孢噻呋的药物敏感性由耐药变为敏感。 相似文献
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通过对饲料中的沙门菌进行分离和鉴定、血清型分型和脉冲场凝胶电泳分型,分析其存在和分布的情况,为分析饲料中沙门菌产生的原因,建立追踪溯源方法,并为其防治提供参考。按GB/T 13091进行分离、鉴定;参考GB 4789.4进行血清型分型;PFGE参照PulseNet的标准方法。分离、鉴定得到15株沙门菌,检出率为14.3%;血清型的出现频次依次为德尔卑、阿贡纳、里森等;PFGE结果显示,15株沙门菌相似度在38.8~100%之间,相同血清型的菌株聚类后,一般都能分到同一群,表明血清型与PFGE指纹图谱有一定相关性;随着同一批次检出沙门菌份数的增加,PFGE聚类结果越趋于集中,与血清型分析结果一致。沙门菌监测应设定科学的抽样份数;血清型和PFGE聚类结果的分布随着检出份数的增加差异越来越小,可能为风险爆发,PFGE可作为沙门菌风险溯源的方法;在一个血清型内,沙门菌既有较高的基因同源性,又具有遗传多态性。 相似文献
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本试验建立了生鲜乳中西草净、枯草隆、西码津、莠去津、乙草胺和丁草胺残留量的超高效液相―串联质谱检测方法。牛奶样品用乙腈提取,经固相萃取柱净化,C18色谱柱分离,以0.1%(V/V)甲酸―水/乙腈为流动相,采用梯度洗脱方式进行液相色谱分离,多反应监测模式,外标法进行定量。结果发现,西草净、枯草隆、西码津、莠去津、乙草胺和丁草胺的检测限分别为0.1、1.0、0.2、0.1、4.0和4.0 μg/L,线性范围分别为1.0~50.0、10.0~500.0、1.0~50.0、1.0~50.0、20.0~1000.0和20.0~1000.0 μg/L。表明该方法专属性强、灵敏度高、分离度好,适用于生鲜乳中西草净、枯草隆、西码津、莠去津、乙草胺和丁草胺残留量的测定。 相似文献
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试验旨在建立牛奶中6种玉米赤霉烯酮类霉菌毒素残留的超高效液相―串联质谱检测方法。牛奶样品经乙腈提取,免疫亲和柱净化,C18色谱柱分离,以0.02%(V/V)乙酸―水/甲醇为流动相,采用梯度洗脱方式进行液相色谱分离,多反应监测模式,外标法进行定量。牛奶中6种玉米赤霉烯酮类霉菌毒素的检测限可达到1.0 μg/L,且在2.5~100.0 μg/L的浓度范围内,线性关系良好。该方法专属性强、灵敏度高、分离度好,适用于牛奶中的6种玉米赤霉烯酮类霉菌毒素残留的测定。 相似文献
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为了建立柴胡注射液、维生素C注射液、盐酸林可霉素注射液、黄芪多糖注射液中非法添加倍他米松的超高效液相色谱检查方法,采用Waters ACQUITY UPLCBEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),以0.75%三乙胺溶液(用磷酸调节p H为3.0)-甲醇-乙腈(50∶45∶5)为流动相;流速为0.3 m L·min-1;二极管阵列检测器,波长采集范围为190~400 nm,记录色谱图波长242 nm。柱温25℃,进样量10μL。倍他米松质量浓度在20.0~180.0 mg·L-1内峰面积呈良好线性关系(R2=0.9997,n=7),在柴胡注射液、盐酸林可霉素注射液、维生素C注射液、黄芪多糖注射液中倍他米松的平均回收率分别为103.5%(RSD=0.2%)、101.2%(RSD=0.8%)、100.4%(RSD=1.7%)、99.2%(RSD=1.7%)。本方法简便、快速、准确,可用于柴胡注射液等四种兽用注射液中非法添加倍他米松的检测。 相似文献
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2012~2014年从辽宁某肉鸡养殖场采集300份鸡泄殖腔拭子,分离获得152株鸡源大肠杆菌。采用微量稀释法对152株鸡源大肠杆菌进行了14种兽用和16种人用抗菌药的药物敏感性测定,并参照CLSI肠杆菌判定标准进行判定。结果显示,鸡源大肠杆菌对兽用阿莫西林、氨苄西林、恩诺沙星、复方新诺明、磺胺异噁唑、四环素和人用哌拉西林、替卡西林、环丙沙星均产生明显耐药性,耐药率较高。对所分离的鸡源大肠杆菌耐药性检测结果与EUCAST发布的野生型菌株MIC值分布进行比较分析,耐药结果基本一致,但通过MIC值分布比较,结果显示出分离菌株的大观霉素、氨苄西林、恩诺沙星、复方新诺明、头孢噻吩、头孢呋辛、环丙沙星和妥布霉素药物的MIC值发生了明显右移,表明该肉鸡场大肠杆菌对上述抗菌药的耐药强度呈现逐渐增强的趋势。在养殖过程中应采取科学饲养和严格的生物安全措施防控疾病,科学合理使用抗菌药物,控制肉鸡场细菌耐药性的产生和传播。 相似文献
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