青海血蜱不同发育阶段蛋白分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

袁改玲  郭媛华  殷宏  罗建勋 《动物医学进展》2003,24(2):112-114

考虑到不同发育阶段蛋白多肽及抗原特性方面的差异,本实验利用SDS-PAGE和Westernblotting对青海血蜱的卵、幼蜱、若蜱、成蜱的蛋白进行了分析。SDS-PAGE结果显示,卵出现了7条主带,幼蜱出现了16条主带,若蜱出现了14条主带,成蜱出现了12条主带。它们的蛋白多肽在数量、含量和分子量上存在差异,共同带只有4条,但相邻发育阶段之间的共同带较多。用感染羊血清和免疫羊血清作免疫印迹时,感染羊血清在分子量5.6万处有明显的反应带,免疫羊血清在分子量9.7万处有明显的反应带。  相似文献   

猪肺炎支原体膜蛋白的电泳分析及免疫印迹检测   总被引：1，自引：1，他引：0  

张映  王肇悦  聂向庭 《畜牧与兽医》2003,35(5):6-8

以猪肺炎支原体Z株为试验材料,采用SDS-PAGE和Western印迹对该菌膜蛋白进行了分析。研究表明:猪肺炎支原体经A_(26)液体培养基培养,15000 r/min离心收集菌体细胞,低渗超声法破膜获得膜制剂后,应用12.5％的凝胶对膜蛋白进行SDS-PAGE分离,在电泳图谱上呈现出36条蛋白带,相对分子质量范围为1.18×10~4～9.12×10~4。同时以膜制剂作为抗原,分4次免疫试验兔,心脏采血,提取抗血清,并分离纯化得到IgG,然后进行Western印迹法检测。其结果发现在SDS-PAGE分离得到的36种膜蛋白(或多肽)中,有6种蛋白具有免疫原性。  相似文献   

不同含水量菜豆种子老化过程中生理特性的研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

李玉红  陈鹏  唐爱均  王绮  关志华  程智慧 《园艺学报》2005,32(5):908-910

 对不同含水量的菜豆种子( 2.1%、3.4%、3.8%、6.9%和9.0% ) 老化过程中的生理特性进行了研究。结果表明, 菜豆种子在含水量为318%时, 发芽率, 保护酶系统( SOD、POD和CAT) 活性和脱氢酶活性明显高于其它含水量的种子, 而脂氧合酶(LOX) 活性和丙二醛(MDA) 含量显著低于其它含水量的种子, 表现出较高的生活力。此结果表明适度降低菜豆种子的含水量可以提高其抗老化劣变能力;不同生活力的菜豆种子POD同工酶酶谱表现不同, 而SDS2PAGE蛋白质谱带则基本相同。  相似文献   

湖南永州尖吻蝮蛇蛇毒的蛋白组分及毒性分析     

肖纲  刘俊琦  夏雨  张志阳  孙志良 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2019,45(5)

采用Nano–LC–ESI–MS/MS蛋白鉴定技术对湖南永州尖吻蝮蛇蛇毒蛋白组分进行质谱分析,应用常规体外试管法对尖吻蝮蛇蛇毒体外溶血值进行检测,采用改良寇式法对尖吻蝮蛇蛇毒LD_(50)进行测定。结果显示:尖吻蝮蛇蛇毒含有50种蛋白,蛋白相对分子质量集中在1.0×10~4～2.0×10~4(46.9%)、4.0×10~4～5.0×10~4(22.4%)、2.0×10~4～3.0×10~4(10.6%)和7.0×10~4～8.0×10~4(7.6%),其中代表性的高丰度蛋白有蛇毒金属蛋白酶A(11.7%)、蛇毒金属蛋白酶H1(9.8%)、蕲蛇类凝血酶–2(7.3%)、抗凝血酶A–A亚基(6.8%),低丰度蛋白(0.1%)有Ecto–5'–核苷酸酶、碱性磷脂酶A2 DAV–N6、生长分化因子11;蛇毒引起红细胞溶血的最低质量浓度为60.00μg/mL,尖吻蝮蛇蛇毒对KM小鼠的LD_(50)为7.1796mg/kg,攻毒小鼠出现呼吸急促、躁动不安、注射部位出现奇特瘙痒和大面积溃烂,至死亡。  相似文献   

转基因小麦Puroindoline蛋白SDS-PAGE 方法的研究与应用     

张金锐  陈明洁  姜泽群  宋斐  熊晓燕  何光源 《湖北农业科学》2006,45(3):269-272

小麦嘌呤吲哚蛋白(Puroindoline)是优质遗传特性硬度的生化标记,对小麦磨粉品质起决定性作用.对目前分析此类蛋白的两类Triton-X-114和Tricine-SDS-PAGE系统进行了优化和比较,建立了详细的适合半子粒分离Pin蛋白的电泳方法.采用此法检测转pinA基因的硬粒小麦P34的后代以及转基因硬粒小麦之间杂交子代的外源基因pinA的表达情况,取得了良好的效果.该方法为Puroindoline蛋白的进一步研究奠定了基础,为小麦品质生化和分子标记辅助育种提供了方法.  相似文献   

苹果砧木M26试管苗不定根发育过程中蛋白质的变化     

辛蓓  徐继忠  邵建柱  孙建设 《河北农业大学学报》2006,29(5):16-19,27

为进一步了解木本植物不定根发生、发育的机理,对苹果砧木M26试管苗不定根的发生、发育过程进行解剖观察,利用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对M26试管苗在接入生根培养基前后,不同时期表达的蛋白进行了研究。结果发现:在不定根原基形成和发育的阶段性过程中,茎基部蛋白质的种类和数量出现明显差异。生根培养后,在继代苗茎基部表达的5条蛋白条带减弱或消失,其分子量分别为26.8 kDa、37kDa、40.3 kDa、43 kDa和66 kDa;明显表达了4条新的蛋白条带,其分子量分别为26 kDa、27.7 kDa、32.5 kDa、和45 kDa,同时有4条蛋白条带(38.5 kDa、42 kDa、53.2 kDa和55.5 kDa)其表达丰度提高。多种蛋白条带的消失和出现,可作为M26试管苗不定根产生的生化标志。在不定根原基逐步形成发育的同时,有3条蛋白条带的表达丰度也逐步提高,可作为不定根形成过程表达的特异标记蛋白带。  相似文献   

Effect of aging at different temperatures on LAOS properties and secondary protein structure of hard wheat flour dough     

《Journal of Cereal Science》2020

The effects of aging from t = 0–108 h at two different temperatures (4 and 25 °C) on the non-linear viscoelastic rheological properties and secondary protein structure of hard wheat flour dough (HWD) were investigated using large amplitude oscillatory shear tests (LAOS) coupled with Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) and SDS-PAGE. Storage (G') and loss (G'') moduli rapidly decreased during aging at 25 °C. Subjecting HWD to progressively longer aging times at 25 °C caused dramatic changes in the non-linear viscoelastic properties demonstrated by strain softening (negative values of e₃/e₁) and shear thinning (negative values of v₃/v₁) behavior. Elastic Lissajous curves of the unaged control dough showed clockwise turn and wider elliptical trajectories as dough aging proceeds especially at higher temperatures. Other non-linear LAOS parameters (G'_M-G''_L, η'_M-η'_L, S and T) supported that aging process at higher temperature caused a progressive change in dough structure from strain stiffening to strain softening behavior while dough samples aged at 4 °C showed fairly close behavior with the control dough sample. FTIR spectra indicated that the relative content of β-sheet and β-turn structures decreased while the content of α-helix structure increased for all dough samples as a result of dough aging. SDS-PAGE results supported the breakdown of high molecular weight (HMW) and low molecular weight (LMW) glutenin subfractions. Aging at the higher temperature of 25 °C decreased the HMW/LMW ratio from 0.77 to 0.59, while the ratio was 0.73 for the dough aged at 4 °C which is fairly close to the control sample. Our results show that the degradation rate of gluten/starch network was triggered by aging at higher temperature, longer aging time, and natural fermentation which resulted in increasing acidity and increase in endogenous proteolytic and amylolytic activity, and also increasing gluten solubility and break down of intermolecular disulfide bonds at acid pH.  相似文献   

仿刺参胶原蛋白的提取及理化性质   总被引：9，自引：0，他引：9  

崔凤霞 《水产学报》2006,30(4):549-553

对仿刺参（Stichopus japonicus）胶原蛋白的提取及理化性质进行了研究。结果表明，低温提取可得到胃蛋白酶促溶且去除端肽(telopeptide)的酸溶性胶原蛋白（PSC）。紫外-可见扫描测得PSC的最大吸收峰位于220 nm；氨基酸分析发现，在1 000个总氨基酸残基中，甘氨酸为329个，羟脯氨酸为66个，羟脯氨酸与脯氨酸之比为0.69，酪氨酸、苯丙氨酸及组氨酸的含量较低，可能不含胱氨酸，这些特性均符合Ⅰ型胶原的特征。差示量热扫描法（DSC）测定仿刺参PSC的热稳定性温度（T^s）为57 ℃，低于牛皮Ⅰ型胶原5 ℃；苯酚-硫酸及次甲基蓝法测得PSC的总糖及粘多糖含量分别为0.61％及0.48％；经DEAE52纯化后，可得到除去粘多糖的蛋白纯品。SDS-PAGE显示，本研究所提取的仿刺参PSC不含杂蛋白，主要成分为胶原β及α链，含少量γ链；其中α链类似于脊椎动物Ⅰ型胶原α¹链，PSC分子组成为（α¹）3。  相似文献   

鳖源嗜水气单胞菌M-96株表面抗原分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

苟琳  王印 《水产科学》2000,19(6):1-3

用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、免疫印迹技术分析嗜水气单胞菌Ｍ－９６株表面抗原,表明该菌体表面抗原是由分子量为３０ＫＤ、３３ＫＤ、３６Ｋ和３９ＫＤ的蛋白质和脂多糖组成,其中部分对胃蛋白酶敏感。  相似文献   

酶法提取椰子蛋白质及其对亚基的影响   总被引：2，自引：0，他引：2  

郑亚军  李艳  陈华  张木炎  马子龙 《果树学报》2009,26(1)

研究酶制剂的种类、用量、提取温度、pH、料液比等因素对椰子蛋白质提取率的影响,通过正交试验研究最佳的提取条件。得到的椰子蛋白质进行SDS-PAGE分析,研究酶法提取对椰子蛋白质亚基组成的影响。结果表明,添加质量分数0.3%的风味蛋白酶的提取效果最好,各因素对提取率影响的次序为:料液比>pH>温度>提取时间,其中,料液比和pH对提取率的影响达到了显著水平;最佳工艺参数为:酶质量分数0.3%、50℃、pH8.5、料液比1∶15和时间2h,在此条件下,椰子蛋白质的提取率为78.28%。SDS-PAGE分析表明,风味蛋白酶对椰子蛋白的酶解作用十分显著,与缓冲溶液提取的椰子蛋白质相比,酶法提取的椰子蛋白质中小分子质量亚基含量很高。  相似文献