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1.
肝素或钙离子载体诱导牛、羊冻精体外获能的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
本文采用肝素或钙离子载体(I-A)诱导牛、羊冻精体外获能,根据对去透明带仓鼠卵的穿透情况评定获能效果,并用台盼蓝·姬姆萨(TG)染色观察了精子的死活及顶体状态.结果发现,牛、羊冻精经肝素或I-A处理后与卵子一起培养,2 h穿透仓鼠卵,4 h开始形成雄原核,6 h形成发育良好的雄原核.牛冻精用50μg/mL肝素及0.1μmol/L I-A处理效果最好,穿透率分别为72.8%和92.3%;羊则以20μg/mL肝素及0.3μmol/L I-A为宜,穿透率分别为73.1%和68.O%.咖啡因与I-A或肝素并用均有协同作用,能提高精子的穿透能力,并能促进卵内原核的发育.肝素和I-A均能在体外诱导牛、羊冻精的顶体反应,有顶体反应活精子百分率与穿透率呈强正相关,羊冻精比较脆弱,获能处理后活力较低. 相似文献
2.
对棕熊精子体外获能前后和异种穿卵的超微结构观察表明,棕熊精子全长77μm,由头、颈和尾3部分组成.头部长7.3μm,宽2.5μm,主要由核、顶体及顶体后区组成;颈部由中心粒和9条纵行分节的节往组成;尾部全长68.2μm,其中中段长13.2μm,线粒体为65~68旋,主段中央为“9 2”的微管结构,其外方被9条致密纤维和纤维鞘包裹.精子获能前群集成簇,运动缓慢;获能后精子呈超激活运动.获能的精子质膜膨胀,顶体外膜囊泡化,引起顶体反应,质膜并未参加囊泡化.顶体反应完成后,仅有顶体内膜包在精子核膜的外面.棕熊精子与仓鼠的卵相互作用,多以赤道段和顶体后区附着于卵膜. 相似文献
3.
本文应用x射线能谱技术,对获能前后精子质膜表面(头部、中段)和内部(顶体内、中段线粒体内)的元素进行了分析测试。结果表明,牛精子用肝素+咖啡因体外获能后,头部、中段质膜表面的Na、Al、S、K含量升高,Cl、Ca含量降低;顶体内Na、Mg、Si、P和Fe含量降低,而Ca、K、Cl和S含量升高;精子中段线粒体内Na、P、Si、Cl和Ca升高,而Mg、S、K和Fe却降低。获能过程中精子顶体内Na/Ca、Na/K、Cl/Ca、Cl/K和Na/Cl的浓度比分别为42.13、12.43、15.36、45.31和2.74;而摩尔比又分别为73.42、21.13、17.37、4.99和4.23。本文并对可能的获能机理进行了讨论。 相似文献
4.
家兔精子体外获能与体外受精试验 总被引:4,自引:0,他引:4
本试验目的在于建立一种简便而有效的系统,能使家兔射出的精子完成体外获能,并获得体外受精、早期卵裂和正常产仔。精子体外获能采用三种方法:A.HIS(15min)+DM(1~2h);B.HIS(15min)+DM(11~12h);C.m-HIS(15min)+m-DM(2~4h)。经上述方法处理的精子与512枚输卵管卵母细胞进行体外受精和体外培养的结果表明,A组的受精和早期卵裂发育延迟;B组的受精卵大都停留在原核期;C组的受精和早期卵裂发育正常。将C组60枚2-4细胞移植至9只受体兔,5只妊娠,其中2只产4只试管仔兔,另外3只获得12个胎儿。 相似文献
5.
用S培养体系对Boer山羊精子进行体外获能试验,借助电子显微技术观察其获能前后超微结构的变化,结果表明,Boer山羊精子的超微结构与其它哺乳动物的类似,分头、颈、尾3部分。头部主要由细胞核构成,含有遗传信息;颈部脆弱,尾部易从此脱落;尾部是精子运动的器官,由中段、主段和末段3部分组成,精子获能后,顶体质膜膨胀、断裂和丢失;顶体外膜囊泡化,进而顶体内膜裸露。 相似文献
6.
关于哺乳动物体外受精的研究,已经历了120多年,直到80年代才获得了第一例“试管家畜”。近年来,尽管“试管婴儿”平均每天有4例问世,但到1990年4月10日为止,全世界获得的“试管家畜”仅有130例,其中“试管牛”54头,“试管猪”52只,“试管绵羊”23只,“试管山羊”只有1只。 为了克服山羊体外受精的难点,Rao等将山羊输卵管卵母细胞输入事先经子宫输入新鲜羊精的假孕兔输卵管,培养24~36h,有37.0%完成了异体受精。将这些受精卵移植给9只受体羊后,有1只正常分娩,获得了首例异体受精山羊羔。我们将超排羊输卵管卵母细胞移入事先经阴道输入新鲜羊精的假孕兔输卵管,获得了44.8%的异体受精率。但迄今尚未证实,山羊体外获能的精子与超排卵母细胞在假孕兔输卵管内能否完成受精过程和产出正常后代。本试验旨在研究山羊体外获能的精子与超排的输卵管卵异体受精及受精卵移植后产羔的可能性。 相似文献
7.
奶山羊精子体外获能与体外受精 总被引:1,自引:0,他引:1
供体用FSH+LH超排,卵母细胞从注LH后约30h回收。将获能精子与10枚卵母细胞在受精液(mDM+输卵管上皮细胞)和培养液(mDM+30%供体羊血清)中连续培养(38℃)24h后,有6枚卵受精,抛出第二极体。将6枚受精卵移植到3只受体中,有1只妊娠,产出1只试管母山羊。初步表明,本试验的奶山羊精子体外获能与体外受精程序是简便而有效的。 相似文献
8.
采用3种获能方法(常规获能法、肝索获能法、钙离子载体获能法)进行猪冷冻附睾精子的体外获能研究,其相应的受精率分别为42.5%,32.0%,30.8%,卵裂率分别为18.6%,15.7%,16.1%。受精率、卵裂率间均无显著差异。精子与SMT-PGH基因质粒混合培养后引起卵裂率下降,实验组的卵裂率(7.5%)显著地低于对照组的水平(21.0%).39℃与37℃下受精,其受精率分别为38.8%。18.7%;多精受精率分别为89%,30.7%;卵裂率分别为26.9%,3.7%,39℃组的受用率、卵裂率均显著高于37℃组水平,而多精受精率则极显著地低于37℃组。发育培养液A液、B液中的卵裂率分别为24.3%,13.0%,两者无差异。在兔输卵管内培养猪体外受精卵,卵裂率为46.7%,极显著地高于对照组水平(10.9%).受精卵体外培养16~17h后离心,可观察到18.4%的原核形成率,这与受精卵体外培养的卵裂率(19.5%)相当。 相似文献
9.
为了优化猪体外受精技术体系,本试验探索了甲基-β-环化糊精(methyl-beta-cyclic dextrin,MBCD)对猪体外受精以及早期胚胎发育的影响。在体外受精0和4 h向受精液(modified Tris-buffered medium,mTBM)中添加不同浓度(0,0.5,1,2,5,10,15,20μmol/mL)的MBCD,受精孵育结束后转至PZM-3培养液中进行胚胎培养。对各处理组卵母细胞的受精情况以及胚胎发育能力进行了系统的检测,并用金霉素(chlortetracycline,CTC)染色法评估了MBCD处理后精子获能状态。结果显示:1)体外受精0 h添加5μmol/mL MBCD组的卵裂率、囊胚率、囊胚细胞数显著高于(P<0.05)对照组和除10μmol/mL MBCD组之外的其他试验组。2)体外受精0 h添加5和10μmol/mL MBCD组、单精入卵率显著高于(P<0.05)对照组和其他试验组,而多精入卵率显著低于(P<0.05)对照组和其他试验组。3)添加5μmol/mL MBCD组,0~1 h,F型精子迅速减少(78.56~19.43),B型精子迅速增加(10.79~69.86);1~4 h,F型精子和B型精子基本保持不变(B型:69.86~78.78,F型:19.43~9.11)。上述结果表明在体外受精0 h向mTBM中加入5μmol/mL MBCD可以显著提高获能精子比例,减少多精受精发生,提高早期胚胎发育潜能。 相似文献
10.