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1.
基于传统的酸性酚—异硫氰酸胍—氯仿一步提取法,比较分析多种优化操作步骤,摸索出一种高质量提取体质量为80~150 g草鱼肠系膜脂肪组织总RNA的改良方法。试验结果显示,相较于肝脏、脾脏、肠道等脏器组织,草鱼肠系膜脂肪组织RNA丰度低,且极易在样品前处理阶段出现顽固性降解问题。探索发现,将取样量增至约30 mg,可提升RNA产量以满足常规试验需求。针对降解难题,改良常规的样品前处理技术流程,采用鲜样液氮速冻,冻样直接放入TRIzol试剂中裂解,并即刻进行长时间机械匀浆,时长约3 min等核心操作步骤,可显著降低脂肪组织样品RNA的降解。Agilent生物分析仪检测结果显示,改良方法提取的草鱼肠系膜脂肪组织RNA完整度高,关键RIN值为8.7~9.0。研究推测,长时间机械匀浆所形成的持续剪切冲击力或许有助于TRIzol试剂中的异硫氰酸胍等成分突破油滴阻碍而有效抑制内源性RNA酶。本方法提取的草鱼脂肪组织总RNA质量可满足高通量转录组测序要求。 相似文献
2.
3.
以藏羊肉和蕨麻为主要原料进行新型复合型蕨麻佐餐藏羊肉酱的制作,在单因素试验基础上采用感官品评和正交试验分析,对复合酱配比、植物油添加量、藏羊肉添加量、蕨麻添加量以及复合酱添加量5个因素进行正交试验,依据感官评分表进行感官品评,确定蕨麻佐餐藏羊肉酱加工的最佳配方。结果表明,对蕨麻佐餐藏羊肉酱品质影响的因素依次为复合酱配比>复合酱添加量>植物油添加量>蕨麻添加量>藏羊肉添加量;并确定最终配方为植物油20.7%、羊肉17.2%、蕨麻3.4%、辣椒酱13.8%、甜面酱5.2%、花生酱5.2%、牛肉精膏0.3%、葱沫8.6%、蒜沫8.6%、盐1.0%、鸡精2.0%、味精1.7%、白糖3.1%、生姜粉0.3%、海天酱油3.1%、白芝麻1%、瓜子仁1%、辣椒粉3.4%。 相似文献
4.
为获得白皮大蒜组培繁殖体系,以其茎尖为材料,通过BA和NAA不同激素配比试验研究,结果表明:诱导愈伤组织的最适培养基为:MS BA0.2mg/L NAA0.5mg/L,诱导率达60%;诱导不定芽的最适培养基为:MS BA1.0mg/L NAA0.1mg/L,丛生芽繁殖系数高达80%。同时,为建立扩繁最佳体系,分别研究了激素、pH、谷氨酸钠三因素对不定芽增殖系数的调节效果,研究表明:添加0.5mg/L的GA3使增值系数提高到13.8;pH5.8最利于不定芽增值;添加10mg/L谷氨酸钠能在多次继代培养中保持较高的增值系数。 相似文献
5.
柚木为马鞭草科柚木属植物,是世界上最珍贵的用材树种之一。文章介绍了柚木的生物学特性、无性繁殖即组培技术要点以及造林技术,论述了柚木在我省的推广前景。 相似文献
6.
7.
CTGF, a member of the CCN family of immediate early genes, is a recently discovered profibrotic growth factor, which is involved in many pathophysiologic procedures. CTGF acts as a downstream effector of TGF-β acting on interstitial cells to enhance the progression of fibrotic renal diseases. It has been shown that CTGF gene expression can be induced or blocked by some kinds of cytokine and drugs. It is an interesting candidate target for future intervention strategies of renal interstitial fibrosis. 相似文献
8.
贮藏期间福桔果皮细胞始终具有分裂增殖能力,细胞生长的养分主要通过维管束向果肉吸取,因而促进果肉衰老,形成枯水.枯水果实在贮藏早期就发现果皮细胞层和油腔分泌细胞无丝分裂旺盛,双核细胞多,果皮增厚多.严重枯水时,果皮细胞还具细胞核、线粒体、有色体等超微结构,未枯水果实细胞分裂少见.经预贮后贮藏的果实,由于中断了果皮组织与维管束的联系,果皮细胞生长受抑制,果肉水分、养分消耗少,枯水率最低, 相似文献
9.
J. Rashid D. J. Weiss S. K. Maheswaran M. P. Murtaugh 《Veterinary research communications》1996,20(6):519-531
Local and systemic activation of coagulation is frequently associated with bacterial sepsis. The coagulopathy is due, at least in part, to expression of tissue factor (TF) by monocytes and macrophages. The purpose of this study was to evaluate the expression of procoagulant activity by bovine alveolar macrophages, leukocytes and platelets, and to determine the relative potency of three chemical inhibitors of TF expression (pentoxifylline, retinoic acid, and cyclosporin A). Bovine alveolar macrophages were stimulated with lipopolysaccharide (LPS) derived from Pasteurella haemolytica or recombinant bovine tumour nervous factor (TNF) and dose- and time-dependent effects on TF expression were studied. LPS and TNF induced TF expression in alveolar macrophages and LPS treatment of whole blood induced TF expression in mononuclear cells. Neutrophils and platelets also expressed procoagulant activity, but this activity was not inhibited by anti-bovine TF monoclonal antibody. Pentoxifylline (40 mol/L), retinoic acid (0.01 mmol/L) and cyclosporin A (0.08 mol/L) inhibited TF expression when added concurrently with LPS or TNF, but not when added 4 h after stimulation. TF mRNA was not detected in unstimulated alveolar macrophages by Northern blot analysis. In contrast, exposure to LPS or TNF for 6 h induced marked expression of TF mRNA, which was inhibited by treatment with pentoxifylline, retinoic acid and cyclosporin A. Expression of TNF by alveolar macrophages stimulated with LPS was also inhibited by these compounds. Our results indicate that procoagulant activity expressed by alveolar macrophages and monocytes is associated with expression of TF, whereas procoagulant activity expressed by neutrophils and platelets is not. The concentrations of pentoxifylline and retinoic acid necessary for inhibition of TF expression in vitro may not be achievable in vivo owing to their toxic effects. However, the in vitro concentration of cyclosporin A that inhibited TF expression did not exceed the plasma concentration observed in humans, and therefore may be useful for inhibition of TF expression in vivo.Abbreviations BAL
bronchoalveolar lavage
- LPS
lipopolysaccharide
- cDNA
cloned deoxyribonucleic acid
- cAMP
cyclic adenosine monophosphate
- GAPDH
glyceraldehyde phosphate dehydrogenase
- mRNA
messenger ribonucleic acid
- TF
tissue factor
- TNF
tumour necrosis factor
- DPBS
Dulbecco's phosphate-buffered saline 相似文献
10.