性别控制胚胎玻璃化一步法稀释冷冻保存技术的研究     

徐庚全余四九  三宅晃次 《中国兽医科技》2007,37(12):1074-1077

为了创立在用户庭院就能应用的玻璃化保存性别控制胚胎的冷冻剂稀释处理方法，采用细管内3种不同液体层构成（A、B、C）法，对新鲜分割胚一步法稀释后的存活能力进行了研究；其次用特定细管最小容量冷却法与上述3种不同液体层构成中效果较好的B法对玻璃化冷冻溶解的新鲜分割胚、体外受精分割胚及冷冻溶解的体外受精分割胚进行一步法稀释后的存活能力予以对比。结果，3种不同液体层构成间胚胎的存活能力无显著差异，B法较高；应用特定细管最小容量冷却法在冷冻溶解的新鲜分割胚、体外受精分割胚及冷冻溶解的体外受精分割胚一步法稀释后的存活能力均显著高于B法。结果表明，特定细管最小容量冷却法是更有效的保存方法。  相似文献   

一步法实时定量RT-PCR检测小反刍兽疫病毒方法的建立   总被引：1，自引：3，他引：1  

包静月  李林  王志亮  李金明  刘春菊  肖肖 《中国动物检疫》2007,24(8):21-23

建立了检测小反刍兽疫病毒的快速、特异的基于Taqman的一步法实时定量RT-PCR方法。通过对GenBank已公布的小反刍兽疫病毒N基因序列进行序列比较分析,设计了一对特异性引物和一条Taqman探针。利用这对引物和探针对来自不同疫源地的小反刍兽疫病毒RNA样本进行检测,都获得了特异性扩增,但是,不与牛瘟病毒、海豚麻疹病毒等其他种的麻疹病毒属病毒发生交叉反应。本方法具有高度灵敏性,最低可检测到810拷贝的RNA模板。在模板浓度为8.1×102到8.1×108拷贝范围内,都呈现良好的线性关系,而且无论是组内和或组间重复的变异系数都很低。  相似文献   

杨木单板层积木一步和二步压制方法的比较     

韦益民  刘正添 《北京林业大学学报》1993,15(4):112-117

本文研究了两种制造单板层积木(LVL)的方法:一步压制法,将12张单板一次热压或冷压成厚板;二步压制法,先用热固胶将4张单板热压成薄板,然后将3块薄板用冷固胶冷压成12层厚板.结果证明,二步压制的LVL质量较好,特别是厚度方向的力学性能的均匀性好.  相似文献   

二段冷却与一段冷却对冷却肉损耗的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

徐春仲  李志方  王正云  刘宝庭  邹大明 《农产品加工．学刊》2007,(10):55-57

通过对应用一段冷却和二段冷却方法的冷却肉的冷却温度、损耗的测定和比较,得出二段冷却的冷却肉温度下降较快和肉质损耗低的结论。  相似文献   

用一步出流法测定土壤的导水参数   总被引：5，自引：0，他引：5  

张富仓  张一平 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》1993,(Z1)

采用一次加压出流法测定土壤水分运动参数——土壤水扩散率的方法,结合逐次加压法,测定土壤水分特征曲线,便可求出土壤的非饱和导水率K(θ),方法简便,概念明确,仪器设备简单,一次试验可以同时测得非饱和土壤水分运动的全部参数。  相似文献   

低浓度2,4-D提高水稻体细胞成苗研究   总被引：4，自引：1，他引：4  

过全生  沈瑛 《中国水稻科学》1996,10(2):103-109

 以较低浓度(0.2、0.4、0.8 mg/L)的2,4-D作为水稻(Oryza sativa L.)的外植体(种子)诱导愈伤组织培养基中的生长素类激素，发现0.8 mg/L的2,4-D能较早地使胚的盾片产生大量的愈伤组织，但这些愈伤组织在原培养基上不能分化出绿芽。含0.2 mg/L的2,4-D能在胚芽鞘节等部位产生一些较光滑、致密、白色颗粒状的结构或愈伤组织，虽然它们出现较迟，但这些结构物能在原诱导培养基上逐渐转化成芽簇，并产生一些纤细的根。将芽簇分割成小块，转移到加有KT等的成苗培养基上，能形成大量的幼苗，绿苗频率达80%以上，明显高于一般报道的水平。试管苗经大田种植后生长整齐一致，能产生出正常的种子。  相似文献   

3种苹果潜隐性病毒一步多重RT-PCR检测体系的优化   总被引：1，自引：0，他引：1  

陈红霞  邵建柱  孙建设  乔雪华  曹晓凤 《河北农业大学学报》2012,35(4):51-57

为建立更为快速准确的苹果潜隐性病毒检测方法,以携带苹果茎沟病毒(ASGV)、苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)和苹果茎痘病毒(ASPV)的田间苹果成龄树为试材,设计合成了扩增目的片段为273 bp(ASGV)、358bp(ACLSV)和432 bp(ASPV)的3对特异性引物,并对影响RT-PCR体系的主要参数进行试验优化.结果表明:建立的一步多重RT-PCR体系可以实现对3种主要潜隐性病毒的特异性检测;通过对田间多个样品的检测验证,表明该方法的准确性和灵敏度都很高,并缩短了单个样品的检测时间,极大地提高了工作效率.  相似文献   

乙型脑炎病毒荧光定量PCR的建立及对病毒体外复制动态的研究     

王帅涛  王新卫  陈陆  赵军  常洪涛  杨霞  刘红英  王川庆 《中国兽医学报》2013,33(6)

根据乙型脑炎病毒(JEV)NS3基因保守序列设计并合成一对引物,以构建的重组质粒作为阳性标准品,建立了一种敏感、特异、重复性好的快速检测JEV的SYBR Green I荧光定量PCR方法.该方法在1.92×108～1.92×101拷贝/μL范围内具有良好的线性关系,可检测到初始模板中19拷贝/μL的病毒核酸,敏感性是常规RT-PCR方法的10倍;检测时间缩短了50％,该方法不与其它猪源病毒发生交叉反应;在重复性试验中,批间、批内变异系数均小于1.2％.应用本方法对JEV在BHK-21细胞上繁殖滴度进行定量检测,绘制JEV在BHK-21细胞上的一步生长曲线,并与TCID50方法绘制的复制动态曲线进行比较.结果显示,两种方法测定的JEV在BHK-21细胞上的复制动态具有一定的平行关系,对于制备灭活疫苗而言,荧光定量PCR方法更快速和敏感,所测得的抗原含量更精确,有利于企业机动灵活地安排生产.  相似文献   

多倍体金线莲一次性成苗及移栽     

何碧珠  吴沙沙  邹双全  兰思仁 《福建农林大学学报(自然科学版)》2016,(5):522-528

筛选多倍体金线莲一次性成苗的最佳培养基配方并探讨不同基质对移栽苗生长的影响.结果表明:MS+1.0 mg·L-16-BA+1.5 mg·L-1NAA+150 g·L-1土豆+3%蔗糖+0.65%琼脂+0.15%活性炭为最佳一次性成苗培养基配方;经120 d培养即可获得生长、生根同步完成的组培瓶苗,具有长势一致(株高5~7 cm),茎节多且粗(茎粗1.19 cm),根系发达(每株2~3条根)等优势;最佳移栽基质为:泥炭土∶碎松树皮=1∶1(体积比),移栽苗成活率(92%)最高,长势最好,植株增高(1.53 cm)、增重(0.43 g)均达到最大,折干率(13.31%)相对较高.  相似文献   

双重一步法RT-PCR检测2种主要兰花病毒     

柳爱春  赵芸  刘超  张乐 《安徽农业科学》2009,37(27):12960-12961

[目的]研究建兰花叶病毒（CymMV）和齿兰环斑病毒（ORSV）双重一步法RT—PCR检测方法,为病毒的早期快速诊断提供技术支持。[方法]根据2种病毒的外壳蛋白基因的保守序列分别设计两对特异性引物,并进行双重与单一RT—PCR对比试验。[结果]结果在健康蜘蛛兰被人工接种病毒后第10天和第21天用一步法RT-PCR方法分别获得CymMV和ORSV与预期相符的约764和946bp扩增产物务带;且双重一步法RT—PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后,出现两务与单一RT—PCR产物相对应的清晰务带,获得较理想的检出效果;扩增产物的核酸序列经BLAST分析,同源性均在85％以上,证实了检测结果的准确性。[结论]该方法具有更加灵敏、特异、快速和简便的特点,适合于两种主要兰花病毒的同时快速检测。  相似文献