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1.
本试验研究建立了猪尿中莱克多巴胺(Ractopamine, RAC)残留的直接竞争化学发光免疫检测方法。合成了莱克多巴胺和辣根过氧化物酶的偶联物(RAC-HRP),方法的检测限为0.09 ng/mL,空白猪尿中添加浓度为0.5、10和100 ng/mL RAC时,检测范围为0.3~157.0 ng/mL;回收率为76.3%~87.6%,批内变异系数为10.0%~12.2%,批间变异系数为14.2%~15.2%。  相似文献   
2.
莱克多巴胺胶体金免疫层析法快速检测试纸条的研制   总被引:1,自引:0,他引:1  
为研制一种快速、简便的基于胶体金免疫层析法的试纸条,快速检测猪尿中莱克多巴胺(ractopamine,RAC药物残留),采用柠檬酸钠还原法制备胶体金颗粒,标记莱克多巴胺单克隆抗体并喷于玻璃纤维上制备胶金垫,RAC-BSA偶联抗原和羊抗鼠IgG分别结合于硝酸纤维膜上,依次将样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸水纸组装并切割成莱克多巴胺胶体金免疫层析快速检测试纸条。试验结果表明该快速检测试纸条的检测限为5 ng/mL,可在8~10 min内完成测试,肉眼即可判断,无需其他检测设备。该试纸条灵敏度、特异性、稳定性和重复性均达到临床使用要求,适用于现场快速检测和筛选工作。  相似文献   
3.
莱克多巴胺人工免疫原合成及抗体特性   总被引:3,自引:1,他引:2  
将莱克多巴胺(RAC)进行化学修饰引入羧基活性基团,合成具有半抗原结构特征的RAC-戊二酸酐半醛化合物(RAC-SA);采用混合酸酐法(MA)将RAC-SA与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成人工免疫原BSA-RAC和包被抗原OVA-RAC,用红外(IR)、紫外(UV)和凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定,推算分子结合比;用BSA-RAC免疫新西兰白兔,间接ELISA测定多克隆抗体(pAb)效价,阻断ELISA鉴定其敏感性,琼脂双扩散试验、WestGold膜杂交试验和交叉反应试验鉴定其特异性。结果表明,BSA-RAC偶联成功,分子结合比为24.5∶1;获得了高价、敏感、特异的RAC pAb,为RAC残留免疫学检测方法的建立奠定了基础。  相似文献   
4.
选用40头杜洛克×长白×大约克夏三元杂交肥育猪和8只大白鼠进行饲养和体外组织培养试验,从细胞信息传导角度对Ractopamine的作用机理进行探讨。试验结果表明:在13.5%和18%蛋白饲粮下, Ractopamine使猪背长肌RNA含量分别升高了20.83%(P < 0.01)和12.65%(P < 0.05),cAMP含量分别升高了47.12%(P < 0.05)和43.01%(P < 0.01),同时还使股二头肌细胞膜Na#+(+)、K#+(+) -ATPase活性分别升高了41.42%(P < 0.01)和30.20%(P < 0.05),肌浆网Ca#+(2+)-ATPase活性升高了35.73%(P < 0.05)和46.19%(P < 0.01);另外, Ractopamine使乳鼠腿肌细胞Ca#+(2+)降低了48.19%(P < 0.01),心肌细胞Ca#+(2+)和肝细胞Ca#+(2+)则分别升高了126.42%(P < 0.05)和37.18%(P < 0.05),使猪皮下脂肪组织中的cAMP浓度分别升高了57.94%(P < 0.01)和56.58%(P < 0.01),大白鼠离体脂肪组织甘油释放率增加了38.05%(P < 0.01);此外,Ractopamine使猪血清中甲状旁腺激素水平显著升高。以上结果表明:Ractopamine通过刺激肌肉与脂肪组织中cAMP的产生,使组织有关酶活性发生改变,进而达到营养再分配的目的。  相似文献   
5.
应用经验证可靠的ELISA方法,对进口猪产品进行莱克多巴胺残留快速筛选检测,对ELISA检测阳性的样品采用色谱质谱联用分析方法进行确证检测。1330份猪产品的检测结果显示,采用ELISA方法检出阳性率达11.4%(152/1330);对ELISA阳性样品采用高效液相色谱-串联质谱(HPLC—MS/MS)或气相色谱-质谱方法(GC—MS)确证,阳性率达90.8%(138/152)。检测工作表明,综合运用快速筛选检验技术与确证检测技术可实现快速准确检测动物产品中莱克多巴胺残留,提高进出境检验工作效率。  相似文献   
6.
刘彩云  周围  毕阳  魏晋梅 《安徽农业科学》2007,35(17):5178-5179
对饲料中盐酸克伦特罗和莱克多巴胺的液质联用检测方法进行了研究。采用0.5%钨酸∶甲醇(80∶20)提取试样中的盐酸克伦特罗和莱克多巴胺,用Oasis MCX小柱净化,4 mmol/L乙酸胺溶液∶乙腈(80∶20)为流动相,用PDA检测器分离测定。盐酸克伦特罗和莱克多巴胺的检测限分别为1.05μg/kg和1.37μg/kg,平均回收率为89.7%和84.4%。该方法操作简单、结果准确,可用于测定饲料中盐酸克伦特罗和莱克多巴胺的含量。  相似文献   
7.
高效液相色谱法测定猪肉组织中莱克多巴胺的残留   总被引:1,自引:0,他引:1  
用乙酸乙酯-正丁醇混合液为提取剂提取猪肉组织中的莱克多巴胺,经固相萃取柱净化,浓缩后用2%乙酸溶液定容,用高效液相色谱-荧光检测法分离测定;色谱柱为C18柱,长250mm,内径4.6mm,粒度5μm;流动相为戊烷磺酸钠溶液:乙腈(78:22,V/V);激发波长为226nm,发射波长为306nm;流速1mL/min;进样量50μl;猪肉组织中莱克多巴胺的检测限为5μg/kg;莱克多巴胺的测定在2.5~25ng/mL范围内具有良好的线性关系,平均回收率在85.0%以上,RSD小于2.5%;方法简单,灵敏度高,可用于猪肉组织中莱克多巴胺残留的测定。  相似文献   
8.
用添加20mg/kgRactopamine的饲粮饲喂纯种大约克肥育猪,发现半腱肌DNA含量降低14%(P<0.01),RNA含量升高7.7%(P<0.01),背最长肌DNA含量下降7%(P<0.01),RNA上升5.5%(P<0.01),且两种肌肉中的RNA/DNA均呈升高趋势;背最长肌中酪氨酸、苏氨酸和蛋氨酸含量分别降低25%(P<0.05)、9%(P<0.01)和17%(P<0.05),而甘氨酸和丙氨酸含量分别上升15%(P<0.05)和8%(P<0.05),肝组织中天冬氨酸和异亮氨酸分别提高11.6%(P<0.01)和12%(P<0.01);此外背最长肌肌原纤维的降解系数(MFI)明显降低,血清尿素氮下降16.6%(P<0.05)。同时还发现Ractopamine使皮下脂肪中异柠檬酸脱氢酶活力降低27%(P<0.01),血清脂肪酶活力升高12.2%(P<0.05),血清胆固醇降低23.5%(P<0.05)。上述结果显示:Ractopamine可促进体内蛋白质的合成和脂肪的分解,而抑制蛋白质的降解和脂肪的合成  相似文献   
9.
化学发光免疫分析法检测猪尿中莱克多巴胺残留   总被引:4,自引:1,他引:3  
本试验运用化学发光免疫分析法(chemiluminescence immunoassay,CLIA)检测猪尿中莱克多巴胺(Ractopamine,RAC)的残留。检测限为0.01 ng/mL,检测范围为0.036~32.2 ng/mL。添加浓度分别为0.1、1、10 ng/mL,平均回收率为73.2%,批内平均变异系数为9.7%,批间平均变异系数为11.3%。而本研究所建立的化学发光免疫检测方法(CLISA)可以达到检测RAC残留的要求。  相似文献   
10.
The effects of the β-adrenergic agonists ractopamine hydrochloride (RH; 0.35, 0.70 and 1.05 mg kg− 1 of BW d− 1) and zilpaterol hydrochloride (ZH; 0.10, 0.20 and 0.30 mg kg− 1 of BW d− 1) on growth performance and carcass characteristics were determined in 84 Dorper × Katahdin lambs (12 lambs per treatment), that were randomly assigned to a complete block design during a 42-day feeding trial. Lambs were fed a corn grain-based diet (18.71% CP and 12.9 MJ/kg ME). Nutrient digestibility of diets and blood serum metabolites were also determined. There were no significant (P > 0.05) differences in growth characteristics by effect of ZH or RH administration. However, lambs final weight, total weight gain and ADG increased linearly (P < 0.05) as levels of both β-adrenergic agonist increased. RH or ZH administration did not affect feed efficiency, diet digestibility or particular blood serum metabolites of lambs. Carcass characteristics of lambs consuming ZH were significantly better (P < 0.01) than RH or control lambs; RH produced significant linear response on carcass weight, dressing percentage, longissimus muscle area, carcass conformation and quality grade, and improved quadratically (P < 0.05) fat thickness and USDA yield grade of lamb carcasses. On the other hand, increasing levels of ZH decreased linearly (P > 0.01) fat thickness and improved (P > 0.05) USDA yield grade and carcass quality grade. Both β-adrenergic agonists improved carcass characteristics; although greater improvements were obtained with ZH than RH for most carcass characteristics.  相似文献   
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